本文選取了25種香豆素類化合物,測定其對多酚氧化酶（PPO）的抑制作用,從中篩選出抑制效果最強的目標抑制劑—4-羥基香豆素。通過酶抑制動力學分析4-羥基香豆素對PPO的抑制機理,利用凝膠電泳、圓二色光譜、內(nèi)源熒光光譜和透射電鏡等方法探討了目標抑制劑對PPO結(jié)構(gòu)的影響。為考察目標抑制劑對梨汁褐變的影響,將不同濃度的4-羥基香豆素添加到多個品種的梨汁中,觀察在20℃與0℃貯藏期間梨汁色澤變化。主要研究結(jié)果如下:比較香豆素類化合物對PPO的抑制作用,發(fā)現(xiàn)4-羥基香豆素對PPO的抑制作用最強,且隨4-羥基香豆素濃度的升高,抑制效果增強。當4-羥基香豆素濃度為3.33 mmol·L^-1時,酶活力僅剩5%,因此選擇4-羥基香豆素作為目標抑制劑,進一步分析其對PPO結(jié)構(gòu)的影響。測定4-羥基香豆素對PPO的抑制類型,發(fā)現(xiàn)它是PPO的競爭型可逆抑制劑,抑制常數(shù)K_I為1.685 mmol·L^-1。利用Native-PAGE、圓二色光譜、熒光光譜及透射電子顯微鏡等方法探討了4-羥基香豆素對PPO結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明:4-羥基香豆素處理后PPO... 

【文章來源】：鄭州輕工業(yè)大學河南省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

多酚氧化酶三維結(jié)構(gòu)圖

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香豆素及其衍生物廣泛存在于植物界，為高等植物的次生代謝產(chǎn)物，在蕓香科和傘形科中含量最高，微生物中含量很少[42]。傳統(tǒng)中藥蛇床子、秦皮、祖師麻等含有豐富的香豆素類成分，隨著藥理學研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)香豆素類化合物具有抗腫瘤、抗凝血、抗氧化、抗菌等多方面生物學活性[43]。圖 1-3 香豆素分子結(jié)構(gòu)Fig 1-3 The molecular structure of Coumarin香豆素被認為具有毒性，動物實驗表明香豆素會使小鼠肝臟發(fā)生不同程度的中毒、壞疽現(xiàn)象[44]。隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)香豆素的代謝途徑與人類的香豆素代謝途徑是不同的。通過研究人類和猴子的肝臟，發(fā)現(xiàn)其肝細胞具有顯著抑制香豆素毒性的作用，推測可能與香豆素的 7’位羥基化有關(guān)[45]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)香豆素及其代謝產(chǎn)物都是非誘變產(chǎn)物，具有抑制人類腫瘤細胞的生物活性功能，且對 7’位羥基化酶缺乏患者也不會造成肝中毒[44]。因此，香豆素對于人體并非具有毒害作用。另外，在食品加工中，香豆素可作為調(diào)味劑，具有維持食品原料的風味、口感和香氣等作用。1.3.1 香豆素類化合物的結(jié)構(gòu)類型香豆素的 α-苯并吡喃酮母核上存在多種不同的取代基。按照取代基位置的不同可將香豆素類化合物分為四類：（1）無取代基香豆素類化合物，包含香豆素和二氫香豆素等；（2）酯環(huán)取代香豆素類化合物

【參考文獻】：
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