結(jié)合地方特色,進一步明確牦牛酥油支鏈脂肪酸的功能特性。本文利用尿素絡(luò)合及過氧化原理純化牦牛酥油中的功能性脂肪酸,探討從牦牛酥油中純化的支鏈脂肪酸（branched chain fatty acid,BCFA）在乳腺癌細胞株（SK-BR-3）中的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究,并進行流式細胞計數(shù)、DAPI染色（DAPI即4’,6-二脒基-2-苯基吲哚,4’,6-diamidino-2-phenylindole）、MTT比色法（MTT即噻唑藍,Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide）及熒光定量驗證。明確牦牛酥油中的BCFA對乳腺癌細胞的抑制作用。本研究主要結(jié)論:（1）采取尿素絡(luò)合結(jié)晶工藝,絡(luò)合溫度4℃,絡(luò)合時間8 h,尿素/脂肪酸（w/w）比例為6.5:1時,可獲得純度最高為16.29%的支鏈脂肪酸,得率為3.28%。（2）對牦牛酥油進行過氧化反應(yīng),獲得中鏈脂肪酸（medium-chain fatty acid,MCFA）純度為67.70%,得率850%。脂肪酸/過氧乙酸比值1:3時獲得純度為15.91%的BCFA,得率21.57%,同時獲得環(huán)氧脂肪酸甲酯,純... 

【文章來源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

尿素/脂肪酸（w/w）對絡(luò)合純化BCFA的影響

圖 2.2 絡(luò)合溫度對絡(luò)合純化 BCFA 的影響 2.2 Effect of complexation temperature on complexation and purification of B溫條件耗能大，高溫下脂肪酸易氧化，并綜合考慮其純度和提取FA 的絡(luò)合溫度應(yīng)設(shè)在 4℃左右為宜。絡(luò)合時間對絡(luò)合工藝的影響置尿素/脂肪酸（w/w）為 2:1、絡(luò)合溫度為 4℃，在絡(luò)合時間分別4 h、20 h、26 h、32 h 的條件下絡(luò)合，獲得富集相的游離脂肪酸。表 2.7 絡(luò)合時間對絡(luò)合工藝的影響-純度（%）Table 2.7 Effect of complexation time on complexation process - purity (%)FA 酥油絡(luò)合時間/h2 8 14 20

3.3.2 脂肪酸甲酯的制備取適量（20 g）游離脂肪酸。再加入質(zhì)量分數(shù)為 1%的硫酸-甲醇溶液 100 mL到錐形瓶中，用錫箔紙封口，60℃水浴 30 min。冷卻后，加入 50 mL 的正己烷及 50 ml 的飽和 NaCl 溶液，萃取取正己烷層。水洗至中性后，干燥并過濾。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（40℃）獲得游離脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低溫-20℃保存?zhèn)溆谩?.3.3 脂肪酸甲酯的過氧化脂肪酸甲酯的過氧化目的是使不飽和脂肪酸的雙鍵氧化生成飽和脂肪酸。加入過氧乙酸（過氧化氫與乙酸 1:1 配置），設(shè)定三個單因素脂肪酸與過氧乙酸比值為 1:1、1:2、1:3 反應(yīng)以判斷過氧化程度[93]。再加入正己烷進行萃取，水洗至中性，干燥并過濾。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（40℃）獲得游離脂肪酸甲酯，并回收正己烷。脂肪酸甲酯低溫（-20℃）保存?zhèn)溆谩?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]阿托伐他汀調(diào)控MMP-9、Cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表達對胃癌細胞增殖、周期和凋亡的影響[J]. 王玲,周巧直,王曉燕,吳云娜,樊愛平.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2018(11)
[2]GB/T 16886.5-2017中MTT細胞毒性試驗方法解讀[J]. 胡煜雯,高靜賢.  中國醫(yī)療器械信息. 2018(21)
[3]白藜蘆醇通過激活Caspase-3和PARP-1影響前列腺癌細胞侵襲和凋亡[J]. 袁逾喆,張忠泉,孫慶紅,聶建軍.  實用藥物與臨床. 2018(07)
[4]含鋅指和BTB結(jié)構(gòu)域7B（ZBTB7B/ThPOK）及其相關(guān)因子在T細胞分化及功能中的作用[J]. 黃麗芳,李啟睿,李國華.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(11)
[5]介導(dǎo)細胞凋亡的caspase-3在卵巢癌中的表達和放療敏感性的關(guān)聯(lián)性研究[J]. 張春年,王建中.  東南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)
[6]槐定堿通過Caspase-3介導(dǎo)的人胰腺癌細胞株capan-1凋亡機制研究[J]. 任麗平,李先佳,金少舉.  河南科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(01)
[7]苦參堿促進胃癌細胞凋亡及對STAT3、Cleaved-caspase3、MMP-2蛋白表達的影響[J]. 梁辰,戴靜,周福祥,張俊紅,於海軍.  腫瘤藥學(xué). 2017(01)
[8]miR-330抑制乳腺癌細胞增殖及其臨床病理學(xué)意義[J]. 丁克碩,吳正升.  臨床與實驗病理學(xué)雜志. 2016(09)
[9]利用TCGA及GEO數(shù)據(jù)集分析claudin11在胃癌中的表達及臨床意義[J]. 王碩,李智,鄭春雷,曲秀娟,劉靜,曲晶磊,車曉芳,劉云鵬.  武警后勤學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(06)
[10]牦牛酥油理化性質(zhì)研究[J]. 孫美青,馬鶯,程金菊.  中國乳品工業(yè). 2016(03)

博士論文
[1]LncRNA-AK123483的靶向基因PARP、caspase-3在心肌缺血再灌注損傷中的調(diào)控機制[D]. 鄭誠飛.浙江大學(xué) 2018
[2]乳脂支鏈脂肪酸的微量分離、結(jié)構(gòu)分布與抗炎作用[D]. 閆媛媛.江南大學(xué) 2018
[3]記憶性CD8+T細胞在同種器官移植急性排斥反應(yīng)中的作用及機制研究[D]. 杜剛.廣西醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]前列腺癌的PSA分子診斷及NFKBIA/SREBP2的表達與意義[D]. 江先漢.南方醫(yī)科大學(xué) 2011
[5]呋喃喹啉類生物堿白鮮堿體外抗真菌活性及作用機制研究[D]. 郭娜.吉林大學(xué) 2009

碩士論文
[1]基于轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的癌癥凋亡機理的研究[D]. 楊柏楠.吉林大學(xué) 2018
[2]芥子氣及其代謝產(chǎn)物對皮膚細胞DNA損傷效應(yīng)的研究[D]. 束玉磊.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2017
[3]FADS2基因在食管鱗狀細胞癌中的表達及其生物學(xué)功能的初步探究[D]. 王玲玲.鄭州大學(xué) 2017
[4]基于蛋白質(zhì)組學(xué)分析的良、惡性胸腔積液分子標志物搜尋[D]. 李志斌.安徽醫(yī)科大學(xué) 2017
[5]轉(zhuǎn)錄組學(xué)和藥物基因組學(xué)在人類復(fù)雜疾病研究中的應(yīng)用[D]. 呂文文.安徽大學(xué) 2016
[6]添加不同組合支鏈氨基酸對綿羊整體消化代謝及瘤胃微生物多樣性的影響[D]. 李晴.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]食品中氧化鋅納米顆粒與其他食品添加劑的復(fù)合毒性研究[D]. 袁露露.上海大學(xué) 2015
[8]2型糖尿病視網(wǎng)膜病變患者外周血miR-155與調(diào)節(jié)性T細胞的相關(guān)性研究[D]. 楊婷婷.濱州醫(yī)學(xué)院 2015
[9]紅景天苷抗肝癌作用及其機制的實驗研究[D]. 何小喜.廣西醫(yī)科大學(xué) 2014
[10]前哨淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測在早期非小細胞肺癌中的應(yīng)用研究[D]. 李廣旭.濟南大學(xué) 2014



本文編號：3238936