【摘要】：青稞屬于禾本科大麥屬作物,一直以來作為糧食、食品原料、釀造原料、飼料廣泛應(yīng)用于高原地區(qū),并且在全世界范圍內(nèi),大麥其他變種也有廣泛的栽培和應(yīng)用。目前,青稞主要分布在我國西藏、青海、云南、四川、貴州等地,是高原地區(qū)特色的營養(yǎng)食品,而不同產(chǎn)地不同粒色也有不同的營養(yǎng)品質(zhì)。由于青稞主要作為全谷物食品,在精深加工利用方面研究較少,本研究主要利用不同提取方法對不同產(chǎn)地青稞中的維生素E含量和主要功能進(jìn)行研究,并通過熒光標(biāo)記微衛(wèi)星技術(shù)對不同產(chǎn)地青稞親緣關(guān)系進(jìn)行比較研究,為將來進(jìn)行的進(jìn)一步研究提供參考。主要研究結(jié)果概括為以下幾個(gè)方面:1、試驗(yàn)采用正向Venusil XBP Silica柱,優(yōu)化了維生素E高效液相色譜測定方法,得到最佳條件為測定波長265nm,流速1.0mL/min,正己烷:異丙醇=95:5(v/v),柱溫30℃,進(jìn)樣量10μL。同時(shí)通過單因素實(shí)驗(yàn),以KOH添加量、皂化時(shí)間、皂化溫度、抗氧化劑添加量為指標(biāo),并在單因素基礎(chǔ)上,采用Box-Benhnken響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)因素水平,分析得到皂化法提取青稞維生素E的最佳條件為,KOH添加量1.98ml,皂化時(shí)間34.15min,皂化溫度87.3℃,抗氧化劑添加量5.25ml,在此條件下可得到維生素E最大提取含量370.236μg/g。采用超聲法對不同產(chǎn)地青稞進(jìn)行提取,通過單因素實(shí)驗(yàn),以液固比、超聲時(shí)間、超聲溫度為考察因素,研究了各因素對不同產(chǎn)地青稞維生素E提取含量的影響。同時(shí)采用Box-Benhnken響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)因素水平,綜合分析得到超聲提取的最佳工藝條件為:液固比17.27:1,超聲溫度59.33℃,超聲時(shí)間56.24min,在此條件下得到最大維生素E提取含量為1982.74μg/g。采用亞臨界萃取法對不同產(chǎn)地青稞進(jìn)行提取,通過單因素實(shí)驗(yàn),考察了萃取溫度、液料比、萃取時(shí)間三個(gè)因素對亞臨界萃取不同產(chǎn)地青稞維生素E的影響,通過Box-Benhnken響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對亞臨界萃取進(jìn)行工藝優(yōu)化,綜合分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到亞臨界萃取的最佳工藝條件為:萃取溫度62.33℃,液料比25.92:1,萃取時(shí)間67.19min,在此條件下得到總維生素E提取含量為2213.72μg/g。驗(yàn)證比較不同提取方式,皂化法提取青稞維生素E的實(shí)際值與理論值相比誤差范圍在2%以內(nèi);超聲提取法和亞臨界萃取法得到的青稞維生素E實(shí)際值與理論值相比誤差范圍在1%以內(nèi)。同時(shí)對比不同產(chǎn)地青稞維生素E提取含量,超聲提取法得到的維生素E提取量是皂化法的5倍。2、采用TBARS法探究不同青稞維生素E提取物添加量對脂質(zhì)過氧化抑制率的影響,結(jié)果表明,脂質(zhì)過氧化抑制率隨著添加青稞維生素E提取物質(zhì)量濃度的增加而增加,當(dāng)質(zhì)量濃度為350μg/mL時(shí),各產(chǎn)地的抑制曲線都達(dá)到頂點(diǎn),并且云南青稞四川青稞青海青稞西藏青稞。采用POV值測定法探究不同青稞維生素E提取物對棕櫚油的抗氧化活性,結(jié)果表明,云南青稞維生素E提取物相較于其他三個(gè)產(chǎn)地活性更高,尤其是在第6-8天期間,POV值分別為32.95-0.15meq/kg和39.91-0.21meq/kg,相較于其他三個(gè)產(chǎn)地顯著更低。實(shí)驗(yàn)得到對棕櫚油抗氧化活性最適宜青稞維生素E提取物添加量為實(shí)驗(yàn)時(shí)最大值36μg/g。3、對隨機(jī)分布于青稞7條染色體上的21對微衛(wèi)星引物進(jìn)行熒光標(biāo)記,然后對前文研究采用的4個(gè)農(nóng)家品種和已鑒定的9個(gè)青稞品種進(jìn)行親緣關(guān)系比較分析并繪制得到了11個(gè)不用品種青稞的指紋圖譜。結(jié)果表明有17對引物檢測到了多態(tài)性位點(diǎn),占所篩選引物的80.95%,17對引物一共檢測到了82個(gè)等位基因,平均每個(gè)位點(diǎn)4.82個(gè),片段長度在143-388bp之間。其中位于染色體7H上的Bmag206引物檢測到的等位基因最多,有13個(gè)。Shannon’s指數(shù)在0.5481-2.3593之間,多態(tài)信息含量變化范圍在0.2389-0.8702之間,17個(gè)標(biāo)記當(dāng)中有9個(gè)高度多態(tài)性位點(diǎn),占標(biāo)記總量的52.94%,對不同產(chǎn)地青稞進(jìn)行聚類分析結(jié)果顯示,遺傳相似系數(shù)在0.6206-0.9706之間,在遺傳相似系數(shù)為0.6206時(shí),材料被分成了2大類,產(chǎn)地為云南昆明的農(nóng)家種Y1單獨(dú)被分成了一類,其余材料歸為另一類。17對微衛(wèi)星標(biāo)記引物能很好的將11個(gè)不同產(chǎn)地青稞品種分別開來,且不同來源的品種親緣關(guān)系遠(yuǎn)近不一,來源于不同產(chǎn)地的青稞品種也可能具有更近的親緣關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：西華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS210.1
【圖文】：

其中土耳其的產(chǎn)量為 475 萬噸[8]。大麥的種植面積近年來趨于穩(wěn)定，但我國的大麥自給率趨于 50%，每年從其他國家的進(jìn)口量約 200 萬噸，其中 90％以上來自澳大利亞、加拿大和法國[9]。我國現(xiàn)種植的青稞變種主要有兩種，一種是青稞（又稱裸麥），在我國西北、西南各省常栽培，適宜高原清涼氣候，模式標(biāo)本采自亞洲；另一種是藏青稞（又稱三又大麥），我國青海、西藏、四川、甘肅等省區(qū)常栽培，華北等地區(qū)也有種植，其種子來源于法國，模式標(biāo)本則采于德國[10]。事實(shí)上，青稞在我國各地都有分布，自 1978 年以來，青稞的主要栽培地區(qū)還是集中在海拔較高的西藏、青海、四川等地，單產(chǎn)呈增長態(tài)勢，基本在每公頃 5-5.3 噸之間；產(chǎn)量總體上看也平穩(wěn)增長，2010 年青稞總產(chǎn)量為 60 萬噸[11]。根據(jù)大麥主產(chǎn)區(qū)的數(shù)據(jù)，2002-2012 年間，江蘇省、安徽省、甘肅省、云南省、內(nèi)蒙古自治區(qū)、湖北省、浙江省、四川省、河南省、新疆維吾爾自治區(qū)和黑龍江省這 11 個(gè)主產(chǎn)區(qū)的大麥播種面積占全國 95%以上[12]。

圖 2.1 不同波長條件的維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig.2.1 Chromatogram of vitamin E standard at different wavelengths由不同試驗(yàn)條件得到的圖譜分析，在流速為 1.0mL/min，正己烷：異丙醇=95:5（v/v的條件下，標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間為 2.711±0.003min，誤差范圍<1%。并且在同樣條件下，波長最大的標(biāo)準(zhǔn)品峰對稱性不佳，在 265nm 波長下所得圖譜色譜峰對稱性更好，沒有雜峰，可以作為測定青稞生育酚的最佳條件。并且在此條件下以維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，得到生育酚標(biāo)準(zhǔn)品曲線 y = 20322x - 39505，R2= 0.9992，線性良好。2.1.2.2 精密度實(shí)驗(yàn)與加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)向已知維生素 E 含量的樣品中添加相同含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照 1.4.3 中方式處理青稞樣品(n=6)，分別進(jìn)樣，然后根據(jù)測得樣品中維生素 E 的質(zhì)量濃度來分別計(jì)算相應(yīng)的精密度和加標(biāo)回收率，結(jié)果見表 2.2 和表 2.3，精密度為 1.72%，加標(biāo)回收率在97.10%-102.20%之間，說明實(shí)驗(yàn)條件具有良好的重現(xiàn)性。表 2.2 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

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本文編號(hào)：2730370