鹽霉素(salinomycin)屬于典型的聚醚類抗生素,由白色鏈霉菌(Streptomyces albus)合成,在農(nóng)業(yè)上主要用于治療雞球蟲病,在醫(yī)藥上具有抗腫瘤細胞活性,是一種潛在的抗腫瘤藥物。本論文主要開展了白色鏈霉菌誘變育種篩選技術(shù)研究和雙組份系統(tǒng)RspA1/A2對白色鏈霉菌基礎代謝及鹽霉素合成等次級代謝全局調(diào)控研究。首先,以工業(yè)白色鏈霉菌(S.albus)S12為出發(fā)菌,建立菌種高效誘變篩選平臺,通過高通量篩選獲得高產(chǎn)菌,同時在轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)基礎上分析誘變育種提高鹽霉素生物合成能力的可能作用機制;其次,研究白色鏈霉菌(S.albus)雙組份系統(tǒng)RspA1/A2對細胞生長相關(guān)的初級代謝(如葡萄糖中心代謝途徑、氮源代謝和磷源攝入等途徑)和鹽霉素生物合成等次級代謝的全局調(diào)控機理,理解細胞生長和鹽霉素合成等次級代謝之間關(guān)系。具體結(jié)果如下:1.鹽霉素工業(yè)菌菌種誘變及高產(chǎn)菌株高效合成鹽霉素機理研究本研究在已建立的菌種誘變篩選方法基礎上,采用瓊脂糖擴散法替代原來的24孔板發(fā)酵方法來表征鹽霉素效價,最后使篩選周期縮短了 18天,篩選效率明顯提高。在高產(chǎn)菌株篩選方面,采用常溫等離子(atmosphe...

【文章頁數(shù)】：152 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２鏈霉菌芽孢萌發(fā)和菌絲生長１７１??Ｆｉｇ?１．２?Ｓｐｏｒｅ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｈｙｐｈａｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ．??

等。??Ｓｐｏｒｅ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?Ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ?ｏｆ?ｇｅｒｍ?ｔｕｂｅ??ＣＡＭＰ??ｃ－ｄｉ－ＡＭＰ?－＞?Ｒｐｆ??ｐｐＧｐｐ??」?Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－ｌｉｋｅ??ｇｌｙｃａｎ??Ｈｙｐｈａｌ?｜??ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ??????Ｃｓ?丨?Ａ?ＧｌｘＡ?....

圖１．３鏈霉菌細胞后期產(chǎn)孢機制１１８１??

第４頁?華東理工大學博士學位論文??８ｌｄＤ：ｃ－ｄｉ－ＧＭＰ?Ｓｐｏｒｅ?ｗａｌｌ?￣??Ｉ?｜??ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ?ｒｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇ?Ｐ?Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?ｂｙ??５ｌｕｉＬＳ??畫??ＮＯ—＞ＷｈｉＯ??Ａｅｒｉａｌ?ｆｖｙｐｈａ?ａｂｏｕｔ?ｔ....

圖１．４天藍色鏈霉菌氮源代謝１２７１??Ｆｉ１．４?Ｎｉｔｒｏｅｎ?ｓｏｕｒｃｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ?ｉｎ?Ｓ．?ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ??

變化，微生物進化出復雜的調(diào)控網(wǎng)絡??去調(diào)控跟氮源代謝相關(guān)基因的表達水平。例如在腸道桿菌中，雙組份系統(tǒng)??ＮｔｒＢ／ＮｔｒＣ參與了氮源代謝調(diào)控，當?shù)聪拗茣r，感應蛋白ＮｔｒＢ磷酸化ＮｔｒＣ，??反應蛋白ＮｔｒＣ被激活并進一步直接調(diào)控下游的靶基因的轉(zhuǎn)錄水平［２８｜３在枯草芽??孢桿菌....

圖１．９鹽霉素合成基因簇結(jié)構(gòu)圖??Ｆｉｇ?１．９?Ｇｅｎｅ?ｃｌｕｓｔｅｒ?ｏｆ?ｓａｌｉｎｏｍｙｃｉｎ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ??

第１４頁?華東理工大學博士學位論文??鏈霉菌合成基因簇才一步一步被發(fā)現(xiàn)，２００３年，Ｉｓａｏ?Ｆｕｊｉｉ實驗室利用Ｉ型ＰＫＳ??中保守區(qū)域序列設計兼并引物，擴增得到一個４．５ｋｂ的片段。進一步經(jīng)過測序之??后發(fā)現(xiàn)其序列屬于Ｉ型ＰＫＳ基因簇，通過同源雙交換缺失４．５ｋｂ片段中的部分....

本文編號：3981130