固體脂質(zhì)納米顆粒增強(qiáng)燕麥多肽在胃腸道中對(duì)二肽基肽酶Ⅳ的抑制作用
發(fā)布時(shí)間:2022-02-20 17:10
生物活性肽容易受到胃腸道蛋白酶和肽酶的降解,不能順利到達(dá)靶組織發(fā)揮作用。本研究通過(guò)納米包埋技術(shù)提高燕麥多肽在胃腸道中的穩(wěn)定性,抑制燕麥多肽在胃腸道中的二次水解。具體結(jié)果如下:1.提取燕麥球蛋白組分,胰蛋白酶水解14 h和堿性蛋白酶水解2 h后的水解產(chǎn)物對(duì)DPP4均有良好的抑制作用,且具有濃度依賴型關(guān)系。利用堿性蛋白酶進(jìn)行水解時(shí)能在較短時(shí)間內(nèi)釋放出更多的DPP4抑制肽,但切割位點(diǎn)不易控制,因此選擇胰蛋白酶對(duì)燕麥球蛋白進(jìn)行水解。2.對(duì)胰蛋白酶水解14 h后的水解產(chǎn)物進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)和水解度的測(cè)定。水解產(chǎn)物的分子量均在14 kDa以下,水解度為19.25%。對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行超濾,得到分子量小于3 kDa(Mw<3 kDa)的組分OGL和分子量在3 kDa-10 kDa之間的組分OGH(3 kDa<Mw<10 kDa)。研究了兩種不同分子量的燕麥多肽對(duì)DPP4的抑制作用,發(fā)現(xiàn)OGL對(duì)DPP4的抑制作用較強(qiáng),IC50值為0.12 mg/mL,OGH的IC50值為2.42 mg/mL。OGL和OGH的疏水性分別為40和79。3.利用固體脂質(zhì)納米顆粒(SLN)對(duì)兩部分燕麥多肽進(jìn)行包埋,并...
【文章來(lái)源】:北京林業(yè)大學(xué)北京市211工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
1.1 糖尿病及DPP4抑制劑
1.1.1 糖尿病介紹及并發(fā)癥
1.1.2 GLP-1和DPP4
1.1.3 藥物型DPP4抑制劑
1.1.4 天然DPP4抑制劑
1.1.5 天然DPP4抑制肽
1.2 生物活性肽
1.2.1 生物活性肽
1.2.2 生物活性肽生物利用度
1.2.3 提高生物活性肽生物利用度的方法
1.3 固體脂質(zhì)納米顆粒
1.3.1 固體脂質(zhì)納米顆粒介紹
1.3.2 SLN的優(yōu)點(diǎn)
1.3.3 SLN包埋研究進(jìn)展
1.4 燕麥DPP4抑制肽
1.4.1 燕麥的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
1.4.2 燕麥球蛋白DPP4抑制肽研究進(jìn)展
1.5 本研究的研究?jī)?nèi)容及意義
2 燕麥蛋白DPP4抑制肽的制備及篩選
2.1 材料與設(shè)備
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 燕麥脫脂粉制備
2.2.2 燕麥蛋白提取
2.2.3 考馬斯亮藍(lán)G-250測(cè)染色法定樣品蛋白質(zhì)含量
2.2.4 燕麥蛋白的水解實(shí)驗(yàn)
2.2.4.1 胰蛋白酶水解
2.2.4.2 堿性蛋白酶的水解
2.2.4.3 十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
2.2.4.4 水解度的測(cè)定
2.2.5 燕麥多肽的制備
2.2.6 DPP4抑制活性的測(cè)定
2.2.7 表面疏水性測(cè)定
2.2.8 氨基酸組成分析
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 燕麥中各組分的蛋白質(zhì)含量
2.3.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.3.1.2 燕麥蛋白質(zhì)提取率
2.3.2 燕麥球蛋白的水解度
2.3.3 燕麥球蛋白及其DPP4抑制肽的電泳圖譜
2.3.4 DPP4抑制肽的活性
2.3.5 DPP4抑制肽的疏水性及氨基酸分析
2.4 本章小結(jié)
3 SLN的制備特征及其穩(wěn)定性
3.1 材料與儀器設(shè)備
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 SLN的制備
3.2.2 包埋率(EE)的測(cè)定
3.2.3 SLN特征的測(cè)定
3.2.4 透射電鏡分析
3.2.5 穩(wěn)定性的評(píng)估
3.2.5.1 pH穩(wěn)定性
3.2.5.2 儲(chǔ)藏穩(wěn)定性
3.2.5.3 熱處理穩(wěn)定性
3.2.5.4 紫外光照穩(wěn)定性
3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 SLN的特征
3.3.2 OGL和OGH的包埋率(EE)
3.3.3 透射電鏡(TEM)
3.3.4 納米乳液的pH穩(wěn)定性
3.3.5 納米乳液的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性
3.3.6 納米乳液的熱處理穩(wěn)定性
3.3.7 納米乳液的紫外光照穩(wěn)定性
3.4 本章小結(jié)
4 OGB-SLN的模擬胃腸液穩(wěn)定性及其機(jī)理
4.1 材料與儀器設(shè)備
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 儀器設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 OGB和OGB-SLN的制備
4.2.2 體外釋放實(shí)驗(yàn)和DPP4抑制率的測(cè)定
4.2.3 傅立葉變換紅外光譜(FTIR)
4.2.4 熱重分析
4.2.5 X射線衍射
4.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 模擬胃腸液釋放和對(duì)DPP4的抑制率
4.3.2 FTIR分析
4.3.3 熱穩(wěn)定性
4.3.4 X射線衍射
4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論和展望
5.1 結(jié)論
5.1.1 制備燕麥球蛋白DPP4抑制肽
5.1.2 SLN特征
5.1.3 模擬胃腸液穩(wěn)定性研究
5.1.4 FTIR、TGA和XRD
5.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)治療2型糖尿病的臨床應(yīng)用研究[J]. 裴晶,暴梅佳. 衛(wèi)生職業(yè)教育. 2019(03)
[2]難溶性藥物與介孔二氧化硅納米粒載體的相互作用對(duì)于釋放速率的影響[J]. 劉曈,萬(wàn)龍,王可可,王曉帆,曲紅娥,姜明燕. 藥物評(píng)價(jià)研究. 2018(10)
[3]生物活性肽功能及制備技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 余楠楠,陳琛. 中國(guó)釀造. 2018(09)
[4]基于體外釋放的半固體制劑透皮吸收及其影響因素探討[J]. 侯迪旭,吳學(xué)萍,李樹(shù)英,梁林,何淑旺,王東凱. 中國(guó)新藥雜志. 2018(15)
[5]不同單硬脂酸甘油酯含量的大豆油油凝膠性能和微觀結(jié)構(gòu)分析[J]. 劉盼盼,許苗苗,祁文靜,陸兆新,呂鳳霞,別小妹,張充,趙海珍. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(03)
[6]人參果皂苷前體陽(yáng)離子脂質(zhì)體的制備及體外釋放研究[J]. 杜琳,劉知源,趙凌志. 吉林中醫(yī)藥. 2017(10)
[7]紅細(xì)胞膜包裹PLGA納米粒的制備和體外毒性及藥物釋放初探[J]. 孫雅楠,張秀梅,馬欣,闕曉,蘇靖,邱明豐. 中國(guó)新藥雜志. 2017(19)
[8]姜黃素固體脂質(zhì)納米粒制備及體外釋放的研究[J]. 李春華,劉志東,丁伶伶,黃瑞,王舒雅. 天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[9]載美洲大蠊提取物納米粒的表征及體外釋放研究[J]. 黃丫丫,楊杭,林家莉,楊建香,甘昌敏,劉光明,李婧煒. 中草藥. 2016(19)
[10]楊梅素脂質(zhì)體的體外釋放及體內(nèi)吸收實(shí)驗(yàn)研究[J]. 錢俊青,黃琪,竺少敏. 浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(04)
博士論文
[1]固體脂質(zhì)納米粒的小腸上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究及其載體構(gòu)建[D]. 柴桂宏.浙江大學(xué) 2016
[2]白藜蘆醇納米混懸劑改善口服生物利用度及經(jīng)鼻腦靶向遞藥系統(tǒng)研究[D]. 郝吉福.山東大學(xué) 2015
[3]基于LyP-1介導(dǎo)淋巴轉(zhuǎn)移腫瘤靶向的脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)研究[D]. 閆志強(qiáng).復(fù)旦大學(xué) 2011
[4]固體脂質(zhì)納米粒的制備和性能研究[D]. 侯冬枝.華中科技大學(xué) 2004
碩士論文
[1]固體脂質(zhì)納米顆粒包覆防曬劑的規(guī)律性研究[D]. 繆玉蓮.上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué) 2016
[2]燕麥多肽的結(jié)構(gòu)特征及DPP4抑制作用[D]. 王鳳.北京林業(yè)大學(xué) 2016
[3]纈沙坦固體脂質(zhì)納米粒的研究[D]. 李先俊.浙江大學(xué) 2014
[4]納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備、表征及相關(guān)性質(zhì)研究[D]. 王佳麗.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
本文編號(hào):3635484
【文章來(lái)源】:北京林業(yè)大學(xué)北京市211工程院校教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
1.1 糖尿病及DPP4抑制劑
1.1.1 糖尿病介紹及并發(fā)癥
1.1.2 GLP-1和DPP4
1.1.3 藥物型DPP4抑制劑
1.1.4 天然DPP4抑制劑
1.1.5 天然DPP4抑制肽
1.2 生物活性肽
1.2.1 生物活性肽
1.2.2 生物活性肽生物利用度
1.2.3 提高生物活性肽生物利用度的方法
1.3 固體脂質(zhì)納米顆粒
1.3.1 固體脂質(zhì)納米顆粒介紹
1.3.2 SLN的優(yōu)點(diǎn)
1.3.3 SLN包埋研究進(jìn)展
1.4 燕麥DPP4抑制肽
1.4.1 燕麥的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
1.4.2 燕麥球蛋白DPP4抑制肽研究進(jìn)展
1.5 本研究的研究?jī)?nèi)容及意義
2 燕麥蛋白DPP4抑制肽的制備及篩選
2.1 材料與設(shè)備
2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.2 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 燕麥脫脂粉制備
2.2.2 燕麥蛋白提取
2.2.3 考馬斯亮藍(lán)G-250測(cè)染色法定樣品蛋白質(zhì)含量
2.2.4 燕麥蛋白的水解實(shí)驗(yàn)
2.2.4.1 胰蛋白酶水解
2.2.4.2 堿性蛋白酶的水解
2.2.4.3 十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
2.2.4.4 水解度的測(cè)定
2.2.5 燕麥多肽的制備
2.2.6 DPP4抑制活性的測(cè)定
2.2.7 表面疏水性測(cè)定
2.2.8 氨基酸組成分析
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 燕麥中各組分的蛋白質(zhì)含量
2.3.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.3.1.2 燕麥蛋白質(zhì)提取率
2.3.2 燕麥球蛋白的水解度
2.3.3 燕麥球蛋白及其DPP4抑制肽的電泳圖譜
2.3.4 DPP4抑制肽的活性
2.3.5 DPP4抑制肽的疏水性及氨基酸分析
2.4 本章小結(jié)
3 SLN的制備特征及其穩(wěn)定性
3.1 材料與儀器設(shè)備
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 儀器設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 SLN的制備
3.2.2 包埋率(EE)的測(cè)定
3.2.3 SLN特征的測(cè)定
3.2.4 透射電鏡分析
3.2.5 穩(wěn)定性的評(píng)估
3.2.5.1 pH穩(wěn)定性
3.2.5.2 儲(chǔ)藏穩(wěn)定性
3.2.5.3 熱處理穩(wěn)定性
3.2.5.4 紫外光照穩(wěn)定性
3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 SLN的特征
3.3.2 OGL和OGH的包埋率(EE)
3.3.3 透射電鏡(TEM)
3.3.4 納米乳液的pH穩(wěn)定性
3.3.5 納米乳液的儲(chǔ)藏穩(wěn)定性
3.3.6 納米乳液的熱處理穩(wěn)定性
3.3.7 納米乳液的紫外光照穩(wěn)定性
3.4 本章小結(jié)
4 OGB-SLN的模擬胃腸液穩(wěn)定性及其機(jī)理
4.1 材料與儀器設(shè)備
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 儀器設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 OGB和OGB-SLN的制備
4.2.2 體外釋放實(shí)驗(yàn)和DPP4抑制率的測(cè)定
4.2.3 傅立葉變換紅外光譜(FTIR)
4.2.4 熱重分析
4.2.5 X射線衍射
4.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 模擬胃腸液釋放和對(duì)DPP4的抑制率
4.3.2 FTIR分析
4.3.3 熱穩(wěn)定性
4.3.4 X射線衍射
4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論和展望
5.1 結(jié)論
5.1.1 制備燕麥球蛋白DPP4抑制肽
5.1.2 SLN特征
5.1.3 模擬胃腸液穩(wěn)定性研究
5.1.4 FTIR、TGA和XRD
5.2 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)治療2型糖尿病的臨床應(yīng)用研究[J]. 裴晶,暴梅佳. 衛(wèi)生職業(yè)教育. 2019(03)
[2]難溶性藥物與介孔二氧化硅納米粒載體的相互作用對(duì)于釋放速率的影響[J]. 劉曈,萬(wàn)龍,王可可,王曉帆,曲紅娥,姜明燕. 藥物評(píng)價(jià)研究. 2018(10)
[3]生物活性肽功能及制備技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 余楠楠,陳琛. 中國(guó)釀造. 2018(09)
[4]基于體外釋放的半固體制劑透皮吸收及其影響因素探討[J]. 侯迪旭,吳學(xué)萍,李樹(shù)英,梁林,何淑旺,王東凱. 中國(guó)新藥雜志. 2018(15)
[5]不同單硬脂酸甘油酯含量的大豆油油凝膠性能和微觀結(jié)構(gòu)分析[J]. 劉盼盼,許苗苗,祁文靜,陸兆新,呂鳳霞,別小妹,張充,趙海珍. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(03)
[6]人參果皂苷前體陽(yáng)離子脂質(zhì)體的制備及體外釋放研究[J]. 杜琳,劉知源,趙凌志. 吉林中醫(yī)藥. 2017(10)
[7]紅細(xì)胞膜包裹PLGA納米粒的制備和體外毒性及藥物釋放初探[J]. 孫雅楠,張秀梅,馬欣,闕曉,蘇靖,邱明豐. 中國(guó)新藥雜志. 2017(19)
[8]姜黃素固體脂質(zhì)納米粒制備及體外釋放的研究[J]. 李春華,劉志東,丁伶伶,黃瑞,王舒雅. 天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[9]載美洲大蠊提取物納米粒的表征及體外釋放研究[J]. 黃丫丫,楊杭,林家莉,楊建香,甘昌敏,劉光明,李婧煒. 中草藥. 2016(19)
[10]楊梅素脂質(zhì)體的體外釋放及體內(nèi)吸收實(shí)驗(yàn)研究[J]. 錢俊青,黃琪,竺少敏. 浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(04)
博士論文
[1]固體脂質(zhì)納米粒的小腸上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制研究及其載體構(gòu)建[D]. 柴桂宏.浙江大學(xué) 2016
[2]白藜蘆醇納米混懸劑改善口服生物利用度及經(jīng)鼻腦靶向遞藥系統(tǒng)研究[D]. 郝吉福.山東大學(xué) 2015
[3]基于LyP-1介導(dǎo)淋巴轉(zhuǎn)移腫瘤靶向的脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)研究[D]. 閆志強(qiáng).復(fù)旦大學(xué) 2011
[4]固體脂質(zhì)納米粒的制備和性能研究[D]. 侯冬枝.華中科技大學(xué) 2004
碩士論文
[1]固體脂質(zhì)納米顆粒包覆防曬劑的規(guī)律性研究[D]. 繆玉蓮.上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué) 2016
[2]燕麥多肽的結(jié)構(gòu)特征及DPP4抑制作用[D]. 王鳳.北京林業(yè)大學(xué) 2016
[3]纈沙坦固體脂質(zhì)納米粒的研究[D]. 李先俊.浙江大學(xué) 2014
[4]納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備、表征及相關(guān)性質(zhì)研究[D]. 王佳麗.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
本文編號(hào):3635484
本文鏈接:http://www.sikaile.net/projectlw/hxgylw/3635484.html
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