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檸檬桉樹脂有效成分的提

發(fā)布時間:2020-08-04 07:58
【摘要】:檸檬桉是廣西重要林業(yè)樹種之一,具有很好的經(jīng)濟價值。本論文以檸檬桉樹脂為原料,開展了檸檬桉樹脂總黃酮、多酚、多糖及蛋白質(zhì)的提取、純化及抗氧化活性研究。主要研究內(nèi)容和取得結(jié)果如下:(1)檸檬桉樹脂中黃酮的提取純化和抗氧化活性。首先采用鹽酸-鋅粉、薄層層析等方法定性鑒別了檸檬桉樹脂含有總黃酮,進而以蘆丁為標準品構(gòu)建了紫外可見分光光度法測定黃酮的定量分析方法,黃酮濃度(C)與吸光度(A)的線性關(guān)系為:A=25.11c+0.08。采用該法測定檸檬桉樹脂總黃酮粗提液(A)含量,結(jié)果表明樹脂中含有4.64%總黃酮。然后分別采用氯仿-乙酸丁酯、氯仿-二甲基甲酰胺、二甲基甲酰胺-氯仿兩次超聲萃取后得到純化物B、C、D,它們的總黃酮質(zhì)量分數(shù)分別為10.39%、18.03%、44.15%。最后,進行了A、B、C、D抗氧化活性研究,結(jié)果表明,A、B、C、D清除2,2-二苯基-1-苦味基肼自由基(DPPH·)的活性分別為91.75%、74.22%、88.44%、91.56%,總抗氧化能力分別為19.99、1.75、4.39、3.79 μmol 蘆丁當量(RE).g-1,還原能力分別為1.16、0.36、0.39、0.45 μmol RE·g-1。(2)檸檬桉樹脂中多酚的提取純化和抗氧化活性。采用明膠溶液、三氯化鐵溶液等定性鑒別方法檢驗檸檬桉樹脂中含有多酚且屬于水解類多酚。以沒食子酸為標準品,用紫外分光光度法建立了多酚定量分析方法,給出了濃度(C)與吸光度(A)線性方程為:A=145.30c+0.16。用該法測定得到樹脂中多酚含量為13.40%。用乙酸乙酯、醇提水沉-正丁醇萃取純化得到質(zhì)量分數(shù)分別為28.01%和39.60%純化物。檸檬桉樹脂多酚粗提液、乙酸乙酯純化物、醇提水沉-正丁醇純化物和維生素(Vc)進行了抗氧化活性實驗,結(jié)果表明,它們清除DPPH·自由基活性分別為89.68%、86.45%、89.11%、91.12%,總抗氧化活性分別為13.44、12.68、15.46、14.89μmol.沒食子酸當量(GE)·g-1,還原能力活性分別為0.99、0.78、1.04、1.20 μmol.GE·g-1。(3)檸檬桉樹脂中多糖的提取純化及其抗氧化活性研究。采用3%α-萘酚乙醇溶液、斐林試劑定性鑒別了檸檬桉樹脂中含有多糖,以葡萄糖為標準品,建立了3,5-二硝基水楊酸吸光光度法測定總糖定量分析方法,給出總糖濃度(C)與吸光度(A)線性關(guān)系為:A=4.38c-0.47。用該法測得檸檬桉樹脂的總糖含量為18.21%。用苯酚-硫酸吸光光度法建立了多糖的定量分析方法,多糖濃度(C)與吸光度(A)線性關(guān)系為:A=12.34c+0.05。該法測得檸檬桉中多糖含量為16.78%。采用Sevage法、三氯乙酸法等多種手段進行檸檬桉多糖的純化,分別獲得質(zhì)量分數(shù)為22.14%、38.56%、51.66%純化多糖,并進行了它們抗氧化活性研究,結(jié)果表明不同質(zhì)量分數(shù)多糖的抗氧化活性順序為:80%純化多糖60%純化多糖30%純化多糖,即質(zhì)量分數(shù)增高,抗氧化活性增大。(4)檸檬桉樹脂中蛋白質(zhì)的提取純化及其抗氧化活性研究。以牛血清蛋白為標準品,采用紫外分光光度法建立了檸檬桉樹脂蛋白質(zhì)定量分析方法,給出蛋白質(zhì)濃度(C)與吸光度(A)線性關(guān)系為:A=5.70c+0.02。此法測得檸檬桉樹脂蛋白質(zhì)含量為7.47%。并考察了樹脂蛋白質(zhì)粗提液的抗氧化活性,結(jié)果表明蛋白質(zhì)粗提液的抗氧化能力隨濃度的增加,有所增強。
【學位授予單位】:廣西大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:TQ28
【圖文】:

檸檬桉,樹脂,工藝路線,抗氧化活性


1.9.1研究方案逡逑本文以檸檬桉樹脂為原料,開展其有效成分的提取、純化及抗氧化活性研究。研究逡逑方案如圖1-1所示。逡逑檸檬桉樹脂逡逑提取、純化逡逑1邐1邐 ̄ ̄邐I邐1逡逑邐邋邋邋邋I邐邋邋I邐邋邋I邐逡逑總黃酮邐多酚邐多糖邐蛋u6質(zhì)逡逑邐I邐J邐±邐1邐逡逑邐抗氧化活性研宄邐逡逑圖1-1檸檬桉樹脂研究的工藝路線逡逑Fig.邋1-1邋The邋technological邋route邋of邋eucalyptus邋citriodora邋resin邋research逡逑1.9.2研究內(nèi)容逡逑針對上述研宄方案,主要研宄內(nèi)容如下:逡逑(1)

總黃酮,原料預(yù)處理,工藝路線,檸檬桉


2.2實驗方法逡逑2.2.1研究的工藝路線逡逑本章按圖2-1所示的工藝路線圖對檸檬桉樹脂總黃酮進行提取、純化,并對檸檬桉逡逑樹脂總黃酮粗提物及各純化物的抗氧化活性進行研宄。逡逑檸檬桉樹脂逡逑1邐逡逑預(yù)處理逡逑邐X邐逡逑總黃酮提取逡逑T逡逑邐i邐逡逑定性分析逡逑定置分析逡逑1逡逑分離純化逡逑1邐■邐 ̄ ̄—I逡逑純化物B邋|邐|純化物C邋|邐|純化物D逡逑"I邐1逡逑邐抗氧化活性邐逡逑圖2-1總黃酮研究的工藝路線逡逑Fig.2-1邋The邋technological邋route邋of邋total邋flavonoids邋research逡逑2.2.2實驗原料預(yù)處理逡逑將采得的固體檸檬桉樹脂除去樹皮、樹葉等大塊雜質(zhì),用研缽搗碎gq粉末狀,待用逡逑[98]逡逑O逡逑15逡逑

蘆丁,薄層層析,標準品,總黃酮


Fig.2-2邋The邋result邋of邋thin邋layer邋of邋crude,邋rutin逡逑a-檸檬桉樹脂粗提液;b-蘆丁標準品逡逑由表2-4、圖2-2可知:以氯仿:乙酸乙酯:冰醋酸=6:邋4:邋0.5為最佳展開劑在薄層板上逡逑展開,254nm紫外燈下觀察,粗提液薄層板a出現(xiàn)8個斑點,念珠狀拖尾分離較好,比逡逑移值在0.2 ̄0.8之間,符合薄層層析要求。其中兩個斑點與蘆丁標準品b位置相近。證逡逑明檸檬桉樹脂中有總黃酮的存在。逡逑2.3.2總黃酮定量分析方法的構(gòu)建逡逑2.3.2.1總黃酮標準曲線繪制逡逑將一系列蘆丁標準溶液,經(jīng)三氯化鋁-乙酸鈉顯色后,測定各濃度對應(yīng)對的吸光度逡逑

【參考文獻】

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本文編號:2780268

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