【摘要】：黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)是我國荒漠地區(qū)中一種極其重要的藥食同源類植物,屬于茄科枸杞屬落葉多棘刺灌木。黑果枸杞葉中含有一定量的黃酮類物質(zhì),抗氧化性質(zhì)顯著,是研制抗心腦血管疾病等藥物的主要活性成分。本課題主要對黑果枸杞葉進(jìn)行研究,分別進(jìn)行了黑果枸杞葉總黃酮的提取、精制、分離純化的工藝優(yōu)化,以及探究不同黃酮類化合物體在體外的抗氧化活性強(qiáng)弱程度,揭示其中的構(gòu)效關(guān)系,得出如下結(jié)論:(1)對黑果枸杞葉總黃酮采用超聲波-微波協(xié)同提取,并用響應(yīng)面優(yōu)化提取工藝,通過對微波功率、液料比、提取時間和乙醇濃度四個因素的考察,主次關(guān)系依次為:液料比乙醇濃度提取時間微波功率。最佳提取工藝為:微波功率175 W,超聲功率為200 W,液料比18.9(mL/g),提取時間9.9 min,乙醇濃度69%。在此條件下提取得到的黑果枸杞葉總黃酮提取率為(0.997±0.015)%。(2)對提取的黑果枸杞葉粗總黃酮在AB-8型大孔樹脂環(huán)境中進(jìn)行進(jìn)一步純化。通過對上樣濃度、上樣液PH值和上樣液流速三個因素的考察,各因素對黑果枸杞葉總黃酮吸附率的影響程度為:上樣濃度上樣液pH上樣液流速,最佳吸附條件為上樣濃度為1.0 mg/mL,上樣液pH值為5.0,上樣液流速為1 mL/min;通過對乙醇濃度、洗脫液流速和洗脫液體積三個因素的考察,各因素對黑果枸杞葉總黃酮解吸率的影響程度為:洗脫液濃度洗脫液體積洗脫液流速,最佳解吸條件為洗脫液濃度為90%濃度乙醇,洗脫液流速為1 mL/min,洗脫液體積為6 BV。該工藝的平均回收率是(76.74±1.47)%。(3)采用Sephadex LH-20型葡聚糖凝膠色譜柱,分離純化精制后的黑果枸杞葉總黃酮,共獲得4種黃酮類化合物。通過紫外檢測和UPLC定性分析,鑒定出4種黃酮類化合物分別為蘆丁、槲皮素、木犀草素和異鼠李素,含量分別為蘆丁0.92%,槲皮素0.08%,木犀草素0.79%,異鼠李素0.84%。(4)通過體外抗氧化實(shí)驗(yàn),對不同黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與抗氧化性之間的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行分析,揭示黑果枸杞葉黃酮抗氧化活性的作用特點(diǎn)。總體來說,在5種評價體系中,各物質(zhì)的濃度與抗氧化性質(zhì)均表現(xiàn)出一定的線性關(guān)系,且抗氧化能力隨濃度的增大有不同程度的增大。槲皮素和蘆丁在5種評價體系中表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化性質(zhì),究其原因可能與其結(jié)構(gòu)中的酚羥基數(shù)量和取代位置有關(guān)。
【圖文】：

第二章 黑果枸杞葉總黃酮提取工藝優(yōu)化液料比與乙醇濃度為極顯著因素（P<0.01），BD 交互極為顯著（P<0.01），BC 交顯著（0.01<P<0.05）。失擬項(xiàng)不顯著（P>0.05），表明模型與實(shí)際情況擬合較好，用該方程進(jìn)行試驗(yàn)分析是可行的。2.3.3.3 響應(yīng)面圖分析為進(jìn)一步研究各因素之間交互作用的影響，通過 Design-Expert 繪制的黑果枸杞總黃酮提取率三維響應(yīng)面進(jìn)行分析。響應(yīng)面曲面角度較小，說明能夠適應(yīng)一定程度條件的變化。等高線圖中同一橢圓型區(qū)域內(nèi)表示提取率相同，中心最高，越向邊緣散越低，且橢圓曲線排列越密表明該因素對總黃酮提取率影響越大。同時等高線越近圓型，，說明兩因素交互作用越弱，越接近橢圓型，說明交互作用越顯著[87]。液料和提取時間、乙醇濃度兩個因素之間的交互作用顯著（圖 2-6、圖 2-7），提取時間微波功率之間交互作用較弱（圖 2-8）。

（a） （b）圖 2-7 液料比和乙醇濃度對總黃酮提取率的交互作用Fig.2-7 Effect of interaction between liquid-soild ratio and ethanol concentration on the extraction rateof total flavonoids（a） （b）
【學(xué)位授予單位】：天津商業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TQ464

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本文編號：2700764