【摘要】：酶法脫膠是一種新興的脫膠工藝,具有反應條件溫和、脫膠完全、油脂得率高、能耗低和污染小等優(yōu)點。國內(nèi)外有大量學者將磷脂酶用于植物油脫膠研究,均取得了良好的脫膠效果,但游離磷脂酶容易失活且難以循環(huán)利用,導致成本增加,限制了工業(yè)化應用。磷脂酶的固定化能改進這些不足。選擇一種合適的酶固定化材料是實現(xiàn)高酶活力和高穩(wěn)定性的關(guān)鍵。磁性納米粒子(MNPs)由于具備超順磁性、高比表面積和低毒性等特點而成為酶固定化材料的研究熱點。本文合成環(huán)氧基修飾MNPs,并使用該粒子分別固定化磷脂酶A_1(PLA_1)、磷脂酶A_2(PLA_2),研究固定化條件對相對酶活和固定化率的影響,探究固定化PLA_1、PLA_2的酶學性質(zhì),并將固定化PLA_1、PLA_2應用于菜籽油脫膠,通過單因素和響應面試驗優(yōu)化脫膠條件,為固定化酶脫膠在工業(yè)化應用提供支持。具體研究結(jié)果如下:(1)采用傳統(tǒng)共沉淀法制備MNPs,利用3-(2,3-環(huán)氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷(GPTMS)改性MNPs,得到環(huán)氧基修飾磁性納米粒子(MNPs-GPTMS)。通過滴定法測得MNPs-GPTMS表面環(huán)氧基含量為0.0125 mmol/g,X-射線衍射(XRD)、掃描電鏡(SEM)等表征顯示環(huán)氧基修飾在MNPs表面,因此,MNPs-GPTMS具有固定化酶的潛力。(2)通過測定三種游離磷脂酶(PLA_1、PLA_2和磷脂酶B(PLB))在不同pH值和溫度條件下的酶活力變化曲線,獲得溫度、pH值變化對游離磷脂酶酶活力的影響。選擇以酶活力更高、pH值和溫度耐受性更好的PLA_1、PLA_2作為后續(xù)固定化酶及其用于菜籽油脫膠的研究對象。(3)通過單因素試驗,得到PLA_1固定化制備的較佳工藝條件:緩沖液pH 4.0、反應時間2.0 h、反應溫度20℃、酶液添加量3.0 mL/g,在此條件下,固定化PLA_1的酶活力為3 600 U/g,固定化率為61.1%。與游離PLA_1相比,固定化PLA_1在熱、儲藏穩(wěn)定性方面具有更好的效果。將固定化PLA_1用于菜籽油脫膠,根據(jù)單因素和響應面試驗得到最佳脫膠反應條件:固定化PLA_1添加量90.00 mg/kg、反應pH 6.0、反應溫度54℃、脫膠時間4.5 h,在此條件下,脫膠油磷含量降至1.450 mg/kg。固定化PLA_1具有較好的可重復使用性,在最佳脫膠條件下脫膠,重復使用10個批次后,仍保留54.1%的酶活力。(4)通過單因素試驗,得到PLA_2固定化制備的較佳工藝條件:緩沖液pH 2.5、反應時間2.0 h、反應溫度20℃、酶液添加量4.0 mL/g,在此條件下,固定化PLA_2的酶活力為2 850 U/g,固定化率為73.1%。與游離PLA_2相比,固定化PLA_2在儲藏穩(wěn)定性方面表現(xiàn)出更好的效果。將固定化PLA_2用于菜籽油脫膠,根據(jù)單因素和響應面試驗得到最佳脫膠反應條件:固定化PLA_2添加量100.00 mg/kg、反應pH 5.6、反應溫度55℃、脫膠時間4.5 h,在此條件下,脫膠油磷含量為2.520 mg/kg。固定化PLA_2還具有可重復利用的優(yōu)點,脫膠10次后,仍保留其初始活性的51.1%。
【圖文】：

第一章 緒論第一章 緒論簡介是生物體內(nèi)對磷脂的代謝和生物合成起重要作用的一類酶藥產(chǎn)業(yè)和食品工業(yè)等領(lǐng)域被廣泛應用[1]。兩個羧酸酯鍵和兩個磷酸酯鍵，依據(jù)磷脂酶對甘油磷脂分將磷脂酶分為酰基水解酶和磷酸二酯酶，�；饷赴字� B，磷酸二酯酶包括磷脂酶 C 和磷脂酶 D，如圖 1

圖 2.1 GPTMS 與 MNPs 反應示意圖Fig 2.1 Schematic diagram of GPTMS and MNPs reaction2.2.5 MNPs-GPTMS 表面環(huán)氧基含量的測定參考文獻[102]，并稍作改動。用電子天平準確稱取 200 mg MNPs-GPTMS，，加
【學位授予單位】：合肥工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS224;Q814.2

【參考文獻】

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