【摘要】：為了探究生物質熱解液及微生物發(fā)酵產物在綠色農產品貯藏與加工中的應用,減少化學農藥殘留,本文通過生長速率法分別測定了生物質熱解液和芽孢桿菌發(fā)酵產物對白菜菌核菌的抑菌率,并進行了復合處理試驗,通過HPLC和LC-MS-MS對芽孢桿菌發(fā)酵產物的抑菌物質進行了探究,并進行了生物質熱解液和類芽孢桿菌SP-17的活體抑菌試驗。抑菌試驗結果表明生物質熱解液對白菜菌核菌具有良好的抑制效果,EC50值為0.76%,最小抑菌濃度為1.82%,最小殺菌濃度為2.22%。枯草芽孢桿菌SP-7、甲基型芽孢桿菌SP-8、類芽孢桿菌SP-17、地衣形芽孢桿菌(15833)標3發(fā)酵產物對白菜菌核菌也具有一定的抑制作用,抑菌率分別為60.47%、59.30%、60.89%、67.57%。復合處理試驗結果表明生物質熱解液與SP-7、SP-8、SP-17、標3發(fā)酵產物分別復合使用時對白菜菌核菌的抑制均具有一定的增效作用。生物質熱解液和SP-7發(fā)酵產物最佳復合比例為3:1或2:1,抑菌率分別為59.35%、57.64%,兩者并無顯著性差異(p0.05),與生物質熱解液和SP-7發(fā)酵產物單獨處理相比,3:1復合處理組的抑菌率分別高出14.79個百分點和23.76個百分點,2:1復合處理組的抑菌率分別高出13.08個百分點和22.05個百分點。生物質熱解液和SP-8、SP-17、標3發(fā)酵產物最佳復合比例分別為1:2、1:1、3:1,抑菌率分別為60.68%、91.75%、64.63%,與生物質熱解液和發(fā)酵產物單獨處理時的抑菌率相比,分別高出9.17和35.10個百分點、49.22和62.81個百分點、26.78和40.41個百分點。HPLC和LC-MS-MS對芽孢桿菌發(fā)酵產物中抑菌物質分離鑒定結果表明,SP-7和SP-8發(fā)酵產物中可能含有C15IturinB同分異構體或構象異構體,分子量在1097.1～1097.4之間。SP-17發(fā)酵產物中含有3種Surfactin同系物,同時可能含有C15IturinB。其中A物質存在分子量為1008.5、1097.3的質譜峰,可能為C13SurfactinA 或 C14SurfactinB 和 C15IturinB。B 物質存在分子量為 1022.5、1097.0的質譜峰,C物質分子量為1022.7,B、C物質可能為C14SurfactinA或C15SurfactinB或C14SurfactinC,但B物質也可能為C15IturinB。D物質分子量為1036.8,可能為 C15SurfactinC�；铙w抑菌試驗結果表明生物質熱解液和SP-17復合使用對白菜菌核菌具有一定的防治效果,優(yōu)于生物質熱解液單獨處理組和對照組,處理5 d后,復合處理組病情指數(shù)為49.79%,防治效果為32.78%。
【圖文】：

６７．５７逡逑ＬＪＬＪＬＪ逡逑圖３．４芽孢桿菌發(fā)酵產物對白菜菌核菌抑菌率的測定逡逑Ｆｉｇ．３．４邋Ｔｈｅ邋ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ邋ｒａｔｅ邋ｏｆ邋ｂａｃｉｌｌｕｓ邋ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ邋ｐｒｏｄｕｃｔｓ邋ａｇａｉｎｓｔ邋Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ邋ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ逡逑１５逡逑

圖３．１３為Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ標準品的ＨＰＬＣ色譜圖，從圖可以看出標準品有多個色逡逑譜峰，主要的峰有５個，說明即使是標準品也不是單一的物質，而是由許多逡逑Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ同系物組成，主要色譜峰保留時間在４？１０邋ｍｉｎ之間。圖３．１４－３．１６分別逡逑為８？－７、３卩－８、５？－１７的冊１＾色譜圖，在４？１0１１１丨１１內，３個樣品均有色譜峰逡逑出現(xiàn)。具體保留時間和峰面積如表３．６所示，從表中可以看出３個樣品和標準品逡逑保留時間基本一致，個別峰保留時間不完全一致，但相差不超過３０邋ｓ。因此推測逡逑３個樣品粗提物中可能含有表面活性素物質，需要進一步采用液相質譜進行分逡逑析。收集粗提物洗脫液，經旋轉蒸發(fā)、冷凍干燥后用于質譜分析。逡逑１邋00■邐ｊＳ逡逑：！邐１邋ｇ邐逡逑４．０邐５．０邐６．０邐７．０邐６０邐９０邐１０．０邐１１０邐１２．０邐１３．０邐１４．０邐ｍｎ逡逑圖３．１３邋Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ標準品ＨＰＬＣ色譜圖逡逑Ｆｉｇ．３．１３邋ＨＰＬＣ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｓｕｒｆａｃｔｉｎ逡逑ｎｊＶＷＩＯ）＾逡逑＜ＢｎｒａＴＡ３ＴＯ５ｎ逡逑ｉ邋ｉｌ邋ｉ邋Ｉ逡逑４．０邐５．０邐６０邐７．０邐８．０邐９０邐１００邐１１．０邐１２０邐１３．０邐１４０邐ｍｒ逡逑圖３．１４樣品ＳＰ－７邋ＨＰＬＣ色譜圖逡逑Ｆｉｇ．３．１４邋ＨＰＬＣ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：TK6;TQ920.1

【參考文獻】

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本文編號：2615230