柑橘是全世界最重要的水果之一,果實營養(yǎng)豐富,口感好。柑橘類果實在采后貯藏期間容易發(fā)生一種嚴重的生理病害-果實汁胞的木質化。目前柑橘果實汁胞的木質化形成的分子機制仍不清楚,MYB家族轉錄因子參與植物木質素的代謝過程在模式植物和樹木上已有很多研究,但他們在柑橘果實木質化中的功能及調控機制尚不清楚。我們根據(jù)前期的miRNA及轉錄組測序,并結合實時熒光定量PCR分析發(fā)現(xiàn),隨著果實汁胞木質化的加重,CsMYB330、CsMYB308和CsMYB85轉錄因子的表達水平發(fā)生顯著變化,且汁胞木質素含量顯著升高。研究結果表明CsMYB330和CsMYB308可以識別并結合Cs4CL1基因啟動子中的AC元件并精細調控Cs4CL1基因的表達;在精細調控過程中,CsMYB330被鑒定為轉錄激活因子,而CsMYB308是轉錄抑制因子。此外,通過在果實汁胞中瞬時過表達這兩個轉錄因子,發(fā)現(xiàn)Cs4CL1基因的表達發(fā)生顯著的變化。另外,我們還分離并鑒定了CsMYB85轉錄因子,在果實汁胞木質化過程中,該基因的表達水平也發(fā)生顯著的變化。結果表明,CsMYB85轉錄因子可以結合CsMYB330的啟動子,調控其表達;在酵母和... 

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 研究背景
    1.1 國內(nèi)外研究進展
        1.1.1 柑橘汁胞粒化與木質化的關系
        1.1.2 木質素的組成及作用
        1.1.3 木質素生物合成的遺傳調控
        1.1.4 木質素在植物生長發(fā)育中的作用
        1.1.5 木質素在植物抗倒伏中的作用
        1.1.6 木質素生物合成與植物脅迫適應的關系
        1.1.7 果實木質素的生物合成及調控
    1.2 本項目的意義
2 材料和方法
    2.1 柑橘果實及擬南芥材料
    2.2 木質素含量測定
    2.3 基因和啟動子的分離和分析
    2.4 轉錄因子的亞細胞定位分析
    2.5 DNA、RNA提取,cDNA合成及熒光定量PCR
    2.6 酵母實驗
    2.7 轉錄活性測定
    2.8 雙分子熒光互補(BiFC)
    2.9 基因槍瞬時轉化果實汁胞
3 CsMYB330和CsMYB308轉錄因子協(xié)同調控汁胞木質化
    3.1 果實汁胞粒化的表型和木質素含量分析
    3.2 CsMYB330和CsMYB308基因的鑒定和分析
    3.3 �；麑嵵蠧sMYB330和CsMYB308基因表達的變化
    3.4 CsMYB330和CsMYB308的分子特征
    3.5 �；麑嵵心举|素生物合成相關基因表達的變化
    3.6 CsMYB330和CsMYB308與木質素合成相關基因的啟動子結合
    3.7 CsMYB330和CsMYB308通過與啟動子AC元件結合調節(jié)Cs4CL1基因的表達
    3.8 CsMYB330和CsMYB308調控Cs4CL1基因表達并影響汁胞木質素的合成
    3.9 小結
    3.10 討論
4 CsMYB85轉錄因子間接調控汁胞木質化
    4.1 CsMYB85轉錄因子的鑒定與分析
    4.2 CsMYB85基因在柑橘果實粒化過程中的表達
    4.3 CsMYB85的亞細胞定位及轉錄活性分析
    4.4 CsMYB85與木質素生物合成相關基因的啟動子結合
    4.5 CsMYB85通過與啟動子結合來調控CsMYB330基因的表達
    4.6 CsMYB85與CsMYB308轉錄因子之間的相互作用
    4.7 CsMYB85間接調控Cs4CL1基因的表達并影響汁胞木質素合成
    4.8 CsMYB85基因過表達可增加擬南芥中的木質素含量
    4.9 小結
    4.10 討論
5 全文總結
參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]琯溪蜜柚汁胞�；^程中生理變化與基因差異表達分析[D]. 佘文琴.福建農(nóng)林大學 2009

碩士論文
[1]柑橘貯藏過程中汁胞�；嚓PmiRNA的篩選及功能分析[D]. 張晶.中國農(nóng)業(yè)科學院 2016
[2]蜜柚木質素合成相關基因的克隆與表達研究[D]. 徐玉.福建農(nóng)林大學 2014
[3]琯溪蜜柚果實木質素代謝研究[D]. 朱學亮.福建農(nóng)林大學 2009



本文編號：3683687