發(fā)布時間：2022-01-20 03:04

　　本研究以黑比諾不同組織及無核白、黑比諾不同發(fā)育時期胚珠以及黑比諾等9種有核葡萄和無核白等6種無核葡萄品種為材料,利用RT-PCR技術(shù)和病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù),進行VvABCG20基因的功能驗證以及活性GA代謝過程關(guān)鍵基因的表達分析,以期從基因水平上尋求與葡萄胚珠敗育的相關(guān)作用因子,探究活性赤霉素對葡萄胚珠敗育的影響,為無核葡萄育種提供依據(jù)。主要研究內(nèi)容如下:1、使用RT-PCR技術(shù)以黑比諾等9個有核品種及無核白等6個無核品種在胚珠發(fā)育的30d和60d的胚珠為材料,對胚珠特異性表達基因VvABCG20進行克隆和表達分析,結(jié)果顯示VvABCG20在有核葡萄和無核葡萄中的序列差異不大,氨基酸匹配率達到99.28%,SNP分析也顯示雖然存在9個單核苷酸變異位點,但僅有一個導(dǎo)致了相應(yīng)的氨基酸位點的變異,并且其表達存在明顯差異,在有核品種中的表達量明顯高于無核品種的表達量。2、以番茄Micro-Tom為材料,利用病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù),對VvABCG20基因在番茄中的直系同源基因LeABCG20的功能進行驗證,與野生型番茄和TRV2空載體侵染的番茄相比,TRV2-LeABCG20-1侵染的番茄果實的半... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 無核葡萄胚珠敗育機理及相關(guān)基因的研究進展
        1.1.1 無核葡萄的分類
        1.1.2 無核葡萄胚珠發(fā)育過程
        1.1.3 葡萄無核相關(guān)基因的研究進展
    1.2 ABCG20基因的研究進展
    1.3 赤霉素合成及失活相關(guān)基因研究進展
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 葡萄ABCG20基因的克隆與表達分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 VvABCG20基因在多品種中的克隆及序列比對分析
        2.2.2 VvABCG20基因在不同葡萄品種中的表達分析
    2.3 討論
第三章 利用病毒誘導(dǎo)基因沉默技術(shù)鑒定VvABCG20基因功能
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 試驗方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 番茄中同源基因LeABCG20的克隆
        3.2.2 番茄中同源基因LeABCG20病毒誘導(dǎo)基因沉默載體構(gòu)建
        3.2.3 轉(zhuǎn)基因番茄基因沉默結(jié)果檢測
    3.3 討論
第四章 葡萄活性赤霉素合成關(guān)鍵基因VvGA3ox家族的克隆與表達分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 試驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 葡萄GA3ox家族成員的克隆與染色體定位
        4.2.2 葡萄GA3ox基因家族基因結(jié)構(gòu)分析
        4.2.3 葡萄GA3ox基因家族多序列比對以及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        4.2.4 葡萄GA3ox家族基因的表達分析
    4.3 討論
第五章 葡萄活性赤霉素失活關(guān)鍵基因VvGA2ox家族的克隆與表達分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 試驗方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 葡萄GA2ox家族成員的克隆與染色體定位
        5.2.2 葡萄GA2ox基因家族基因結(jié)構(gòu)分析
        5.2.3 葡萄GA2ox基因家族多序列比對以及系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        5.2.4 葡萄GA2ox家族基因的表達分析
    5.3 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]無核葡萄胚珠發(fā)育進程中EST的分析及敗育相關(guān)基因的克隆[D]. 張朝紅.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007
[2]葡萄無核品種及其雜種胚敗育機理與胚挽救技術(shù)研究[D]. 王飛.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2002

碩士論文
[1]葡萄胚珠發(fā)育相關(guān)基因βVPE及metacaspase家族的克隆與分析[D]. 鞏培杰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]無核葡萄胚株敗育過程差異表達基因和VPE家族的克隆與分析[D]. 李樹秀.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012



本文編號：3598052