梨是我國主要水果之一,種質(zhì)資源十分豐富,其中紅皮梨因其色澤鮮艷而受到廣大消費者的喜愛,市場前景廣闊。紅皮梨的著色主要是果皮中花青苷合成與積累的結(jié)果,國內(nèi)外對于梨花青苷合成相關基因的研究相比較其他植物起步較晚,因此關于紅梨著色機理的研究還有待進一步深入。前期,課題組在從‘奧冠’果皮中分離基因PyMYB10時,得到另一花青苷調(diào)控MYB基因Py MYB10.1,本研究進一步鑒定了PyMYB10.1的基因功能。主要研究結(jié)果如下:1、PyMYB10.1序列分析,基因開放讀碼框共714 bp,編碼237個氨基酸,蛋白分子量27.4 kD,等電點8.78。2、氨基酸序列比對分析結(jié)果顯示,在序列N端具有保守的R2R3-MYB結(jié)構(gòu)域,而且R3-MYB結(jié)構(gòu)域中含有bHLH結(jié)合基序,與大多數(shù)花青苷調(diào)控MYB轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)相似。3、將氨基酸序列提交到NCBI上,Blast同源比對結(jié)果顯示,PyMYB10.1與植物中調(diào)控花青苷合成的MYB10類轉(zhuǎn)錄因子同源性很高,其中與蘋果MdMYB10的一致性為49%,與梨PyMYB10的一致性為51%。4、進化樹分析結(jié)果顯示,PyMYB10.1與蘋果中MdMYB10、梨中P... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

花青苷的基本結(jié)構(gòu)（Kongetal.,2003）

圖 2 花青苷生物合成途徑（冀曉昊，2015）Fig. 2 Anthocyanins biosynthesis pathway-苯丙氨酸解氨酶；C4H-肉桂酸羥化酶；4CL-對-香豆-CoA 連接酶 4；CHS-查爾酮合成酶；CHI-查爾酮異-黃烷酮-3-羥化酶；F3′H-黃烷酮-3′-羥化酶；F3′5′H-黃烷酮-3′5′-羥化酶；DFR -二氫黃酮醇還原酶；LDOX素合成酶；UFGT-尿苷二磷酸葡萄糖:類黃酮-3-O-糖基轉(zhuǎn)移酶-Phenylalanine ammonia-lyas; C4H-Cinnamate 4-hydroxylase; 4CL-4-Coumarate: CoA ligase; CHS-Chalcone sy-Chalcone isomerase; F3H-Flavanone 3-hydroxylase; F3′H-Flavanone 3′-hydroxylas; F3′5′H-Flavanone 3′5′-hydroDFR-dihydroflavonol-4-reducyase; ANS-Anthocyanidin synthase; UFGT-UGP glucose-flavonoid3-o- glucosyl.參與花青苷合成的基因從功能上主要分為兩類：一類是花青苷合成的結(jié)構(gòu)基直接參與合成反應的酶；另一類是花青苷合成的調(diào)控基因，這類基因不直接苷的合成，而是通過調(diào)控結(jié)構(gòu)基因的表達來間接調(diào)控花青苷的合成。.4 花青苷合成的結(jié)構(gòu)基因花青苷的合成需要有前體物質(zhì)的積累，結(jié)構(gòu)基因的表達可以直接促進相應前合成。目前，國內(nèi)外的研究人員已經(jīng)從擬南芥、矮牽牛、金魚草、玉米、葡

3 ‘奧冠’梨 PyMYB10.1 基因的 PCR 擴增結(jié)果。M：DL2000 DNA marker，1-2 為 2 個重 PCR amplification results of PyMYB10.1 from ‘Aoguan’ pear. M: DL2000 DNA marker, one to tPCR experiments.MYB10.1 基因序列分析測序后進行序列分析，PyMYB10.1 開放讀碼框 714 bp（圖 3），編碼論分子量為 27.4 kD，等電點為 8.78。同源基因氨基酸序列比對表明顯的 R2R3-MYB 結(jié)構(gòu)域，R3-MYB 區(qū)域含有 bHLH 結(jié)合基序（圖 3-MYB 轉(zhuǎn)錄因子。將基因的氨基酸序列提交到 NCBI 上，Blast 比對0.1 與植物已知調(diào)控花青苷合成的 MYB10 類轉(zhuǎn)錄因子同源性較高，YB10 的一致性為 49%，與梨 PyMYB10 的一致性為 51%，因.1 是 PyMYB10 的同源基因。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]紅肉蘋果愈傷組織誘導及紅色性狀發(fā)育機理研究[D]. 冀曉昊.山東農(nóng)業(yè)大學 2015
[2]MYB-bHLH-WD40對楊梅花青苷生物合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制[D]. 劉曉芬.浙江大學 2013
[3]紅梨著色機理的研究[D]. 馮守千.山東農(nóng)業(yè)大學 2011

碩士論文
[1]云南紅梨果皮轉(zhuǎn)錄因子MYB、bHLH和WD40互作及調(diào)控果皮著色機理研究[D]. 崔道雷.昆明理工大學 2013



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