番茄（Solanum lycopersicum）營養(yǎng)價值豐富,風味獨特,深受各國人民喜愛。由于其生長周期短,基因組較小,基因信息豐富,便于遺傳轉化,已成為研究果實發(fā)育的模式植物。目前,我國市場上的番茄均存在耐儲藏性好但風味欠佳的問題,改善番茄果實的風味品質具有重要市場價值。影響番茄果實風味的主要因素是果實中糖分的含量。不過,通過傳統(tǒng)育種途徑提高番茄果實糖含量周期長,存在連鎖累贅。因此,定位并克隆控制果實糖含量的主效基因,進而通過分子標記輔助選擇或基因工程技術對番茄進行遺傳改良,是改善番茄風味品質的重要途徑。目前,人們對果實糖分累積的分子機理仍缺乏深入的認識,而栽培番茄中也缺乏高糖含量的育種資源。前期,我們通過全基因組關聯(lián)分析和集群分離法,在醋栗番茄中定位到了控制果實糖含量的染色體區(qū)段,并進行了基因候選,其中包括一個擴張蛋白基因和一個果糖激酶基因。本研究中,我們對番茄擴張蛋白基因家族和果糖激酶基因家族的表達模式進行了分析,并通過轉基因的方法對擴張蛋白基因SlEXPA3和果糖激酶基因SlFRK2進行了初步的功能分析。具體結果如下:1.根據(jù)番茄擴張蛋白基因家族的表達模式,確定對SlEXPA7... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．?ＥＸＰＡ與ＥＸＰＢ亞家族序列比較??Ｆｉｇ．?１?Ｓｅｑｕｅｎｃｅ?Ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ?Ｂｅｔｗｅｅｎ?ＥＸＰＡ?ａｎｄ?ＥＸＰＢ??

（Ｆｒｏｍ?Ｄｏｎｇｓｕ?Ｃｈｏｉ?２００５）??除ＥＸＰＡ和ＥＸＰＢ外，植物中還存在一些與擴張蛋白基因序列相似的基因，它們??在氨基酸序列上與ＥＸＰＡ和ＥＸＰＢ相似，但同源性較低（圖２）。盡管從進化角度看，??這些蛋白可能與擴張蛋白具有相同的祖先，不過，由于體外試驗從未報道這些蛋白??具有類似擴張蛋白的使細胞壁伸展及應力松弛功能，目前并未被納入擴張蛋白家族，??僅命名為ＥＸＰ類似（ＥＸＰＬ）或ＥＸＰ相關（ＥＸＰＲ）蛋白（Ｃｏｓｇｒｏｖｅｅｔａｌ?２００２）。??植物中還存在另一類蛋白，它們的氨基酸序列較短，僅與擴張蛋白的其中一個??結構域（Ｄｏｍａｉｎｌ或Ｄｏｍａｉｎ２）具有同源性。如在相橘中的Ｐ１２－ｌｉｋｅ蛋白，大小約１２??ＫＤ，與擴張蛋白的結構域１具有較遠的同源性，然而并沒有發(fā)現(xiàn)其細胞壁松弛活性??（Ｃｅｃｃａｒｄｉｅｔａｌ?１９９８）。Ｌｕｄｉｄｉｅｔａｌ?（２００２）推測，Ｐ１２－ｌｉｋｅ蛋白可能作為多肽類激素??在植物水分和溶質平衡的調節(jié)過程中發(fā)揮作用。也有報道發(fā)現(xiàn)Ｇ２Ａ，與ＥＸＰＢ的??Ｄｏｍａｉｎ?２氨基酸序列具有３５－４５％的同源性

的特異引物，以來自Ａ５７的ｃＤＮＡ為模板進行ＰＣＲ擴增，得到Ｓ／Ｉ基因完整ＯＲＦ??片段（圖４）。通過酶切連接反應以及ＢＰ反應，構建了見??別、和５７ＥＡ２５４的植物超量表達載體（圖５）。??１３??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]地黃擴展蛋白基因RgEXPA10的克隆與表達分析[J]. 王豐青,周艷,黃勇,李明杰,田云鶴,馮法節(jié),陳新建,張重義.  藥學學報. 2015(02)
[2]高等植物己糖激酶基因研究進展[J]. 張超,王彥杰,付建新,王曉慶,王瑋然,董麗.  生物技術通報. 2012(04)
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本文編號：3460510