番茄（Solanum lycopersicum）是世界上廣泛種植的蔬菜之一,是研究呼吸躍變型果實的模式植物。各種植物激素參與調(diào)控番茄果實的生長發(fā)育過程。細胞分裂素能夠促進果實的細胞分裂,使果實增大、增加果實重量、延緩果實衰老、提高果實產(chǎn)量等。為了研究內(nèi)源細胞分裂素對番茄果實的影響,本實驗構(gòu)建了番茄果實特異性啟動子Tfm7驅(qū)動擬南芥（Arabidopsis thaliana）細胞分裂素氧化酶2基因（cytokinin oxidase, AtCKX2）的表達載體,通過農(nóng)桿菌（Agrobacterium tumefaciens）轉(zhuǎn)化的方法獲得轉(zhuǎn)基因植株。利用啟動子Tfm7和目的基因AtCKX2的特異性引物,對轉(zhuǎn)基因植株進行驗證,PCR結(jié)果表明啟動子Tfm7和目的基因AtCKX2已經(jīng)轉(zhuǎn)進番茄植株內(nèi)。qRT-PCR結(jié)果顯示:AtCKX2基因在番茄植株的葉片內(nèi)不表達,在授粉后的花中表達。AtCKX2基因在授粉花后5 d的果實中表達量最高,隨著果實的發(fā)育,AtCKX2基因的表達量逐漸下降,在果實發(fā)育后期表達量最低。對番茄果實進行研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因番茄果實中內(nèi)源細胞分裂素玉米素（zeatin, ZT）、... 

【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2020,28(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

番茄植株的表型與基因鑒定

可溶性糖和可溶性蛋白是果實品質(zhì)的重要指標。野生型和轉(zhuǎn)基因番茄果實中可溶性糖含量分別為64.02和54.32 mg/g(圖5A)，轉(zhuǎn)基因番茄果實內(nèi)可溶性糖含量顯著性降低了15.2%(P<0.05)。野生型和轉(zhuǎn)基因番茄果實中的可溶性蛋白含量分別為36.78和24.60 mg/g(圖5B)，轉(zhuǎn)基因果實可溶性蛋白的含量顯著性減少了33.12%(P<0.05)。可滴定酸度是番茄果實風味的重要指標，轉(zhuǎn)基因番茄果實中可滴定酸的含量顯著性高于野生型，可滴定酸的含量提高了72.9%(P<0.05)(圖5C)。簡單地測量果實的糖和酸含量并不能真正體現(xiàn)果實的口感和風味，還需要進行糖酸度的比較，才能體現(xiàn)果實口感和風味的變化。在本研究中，番茄果實的糖酸比為可溶性糖含量與可滴定酸含量的比值，可溶性糖含量/可滴定酸含量比值越大，說明果實內(nèi)糖含量多，口感越偏甜。野生型植株果實糖酸比是轉(zhuǎn)基因植株果實糖酸比的2.04倍(P<0.05)(圖5D)，表明內(nèi)源細胞分裂素水平降低的轉(zhuǎn)基因番茄果實的糖酸比下降。結(jié)果顯示內(nèi)源細胞分裂素的降低影響了番茄果實的品質(zhì)。圖3 番茄果實中內(nèi)源細胞分裂素的含量

番茄果實中內(nèi)源細胞分裂素的含量

【參考文獻】：
期刊論文
[1]番茄果實不同成熟期及貯藏時間對硝酸鹽含量的影響[J]. 崔璨,王蓉,劉鑫,張喜春.  北京農(nóng)學院學報. 2019(03)
[2]赤霉素與細胞分裂素對葡萄果實鄰近葉光合特性及果實品質(zhì)的影響[J]. 辛守鵬,劉帥,余陽,聶松青,高志紅,陶建敏.  應用生態(tài)學報. 2015(06)
[3]細胞分裂素對番茄子房和果實表面光系統(tǒng)Ⅱ光能吸收利用的影響[J]. 李曉晶,高志奎,王梅,劉傳斌,李梅.  園藝學報. 2010(05)
[4]CPPU對無核黃皮果實生長和風味品質(zhì)的影響[J]. 馮莉.  華南熱帶農(nóng)業(yè)大學學報. 2007(03)
[5]不同濃度CPPU處理對中華獼猴桃生長與營養(yǎng)品質(zhì)的影響[J]. 費學謙,方學智,丁明,姚小華,謝義福.  農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報. 2005(S1)
[6]CPPU對獼猴桃果實發(fā)育過程中糖、酸含量變化的影響[J]. 方金豹,黃宏文,李紹華.  果樹學報. 2002(04)
[7]CPPU對溫州蜜柑著果和果實品質(zhì)的影響[J]. 陳建中,張谷雄,章鎮(zhèn).  果樹學報. 2002(02)
[8]果實專一性啟動子驅(qū)動ipt基因在番茄中的表達及其對番茄果實發(fā)育的影響[J]. 毛自朝,于秋菊,甄偉,郭俊毅,胡鳶雷,高音,林忠平.  科學通報. 2002(06)
[9]細胞分裂素和防落素復合劑對番茄產(chǎn)量的影響[J]. 郝建軍,陳鳳玉,康宗利,付淑杰,劉立崗,周慧娜,趙志剛.  遼寧農(nóng)業(yè)科學. 2001(06)
[10]細胞分裂素處理對獼猴桃果實成分的影響[J]. 石進校,劉應迪.  吉首大學學報(自然科學版). 2000(02)

碩士論文
[1]CPPU對梨果實生長發(fā)育及生理生化特性的影響[D]. 程云.南京農(nóng)業(yè)大學 2007
[2]種子特異啟動子調(diào)控ipt基因表達對煙草種子發(fā)育的影響[D]. 王興美.中國科學院研究生院（植物研究所） 2005



本文編號：3414998