藍莓（Vaccinium spp.）對土質(zhì)的要求極為嚴格,其鐵營養(yǎng)具有明顯的低效性。為改善這一現(xiàn)象,生產(chǎn)上常采用降低土壤的pH以增加土壤中有效Fe的濃度。但與此同時,酸性土壤使根際重金屬活化,易引發(fā)毒害作用。目前藍莓中金屬離子的吸收、轉(zhuǎn)運等相關(guān)機理尚不明確。ZIP轉(zhuǎn)運蛋白能夠轉(zhuǎn)運鋅、Fe、錳、銅、鎘、鎳、砷、鈷等金屬元素,其在植物根系吸收金屬元素、長距離運輸及地上部穩(wěn)態(tài)維持等發(fā)揮重要功能,但對于藍莓中ZIP轉(zhuǎn)運蛋白的研究甚少。本研究基于對藍莓轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫分析,在克隆得到藍莓ZIP轉(zhuǎn)運子家族基因cDNA全長基礎(chǔ)上,對其進行生物信息學(xué)分析,利用酵母功能互補與異源表達實驗和擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化實驗,對藍莓ZIP轉(zhuǎn)運蛋白的功能進行鑒定。并通過水培試驗分析藍莓在不同金屬元素處理條件下的生理響應(yīng),以期揭示藍莓ZIP轉(zhuǎn)運蛋白的生物學(xué)功能,并進一步闡明藍莓中金屬元素的吸收、轉(zhuǎn)運機制,有利于改善藍莓的礦質(zhì)元素吸收低效性和緩解重金屬污染對藍莓的脅迫作用。具體研究結(jié)果如下:克隆得到了6個藍莓ZIP家族基因,將其命名為VcZIP1、VcZIP2、VcZIP6、VcZIP7、VcZIP8、VcZIP11,其序列長度為... 

【文章來源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)運蛋白參與金屬吸收、轉(zhuǎn)運、區(qū)隔示意圖

A 經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳得到 3 條清晰的條 rRNA 和小亞基 18S rRNA。各條帶均無的質(zhì)量較好。此外，RNA 的濃度在 1500 n260/OD230大于 2.0，表明該 RNA 無蛋白RNA 的純度較高，質(zhì)量較好可以用于后續(xù)莓內(nèi)參基因 GAPDH 引物進行 PCR 擴增該 RNA 可作為擴增藍莓 ZIP 家族基因的

VcZIP6（Kpn I）GGGGTACCCCATGCCGGTGTGCGCGACCGATAC（Xba I）GCTCTAGAGCTCAGGCCCAAAGGGCAAGGATAGACVcZIP7（BamH I）CGCGGATCCATGGATTCGATGGTGGTGAAGAG（Sal I）GCCGACGTCGACTCACCAGTTGAAACTAAGGGACTCAVcZIP8（Kpn I）GGGGTACCCCCGAATGGGCTCGTTAC（Xba I）GCTCTAGAGCTTAAGCCCATTTAGCTATGAGAGVcZIP11（BamH I）CGCGGATCCGCGTCTCCTTTACCTCTCCCTCC（Xba I）GCTCTAGAGCTTAAGTGTCCCAAATCATC以藍莓葉片和根部混合 cDNA 為模板，高保真酶選擇 PrimerSTAR Max DNAPolymerase，最終擴增得到 VcZIP1、VcZIP2、VcZIP6、VcZIP7、VcZIP8、VcZIP11，其序列長度分別為 1183 bp、1039 bp、1039 bp、1111 bp、1137 bp、765 bp。6 個基因電泳圖如圖 2.2 所示。

【參考文獻】：
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本文編號：3392016