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青花菜鈣依賴蛋白激酶基因BoCDPK1的克隆與表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2021-07-03 01:17
  鈣依賴蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase,CDPK)為Ca2+傳感蛋白,在植物生長(zhǎng)發(fā)育和逆境響應(yīng)中起著重要作用。在克隆青花菜BoCDPK1基因的基礎(chǔ)上,開(kāi)展序列分析、系統(tǒng)發(fā)育分析和表達(dá)分析,為后續(xù)的基因功能鑒定和抗逆育種奠定基礎(chǔ)。該研究以青花菜為材料,利用PCR法克隆1個(gè)CDPK基因,利用生物信息學(xué)對(duì)序列進(jìn)行分析,并采用qRT-PCR研究該基因在霜霉菌和核盤菌侵染下的表達(dá)模式。測(cè)序結(jié)果表明,BoCDPK1的基因組DNA全長(zhǎng)為2 414 bp,具6個(gè)內(nèi)含子,編碼區(qū)全長(zhǎng)為1 647 bp,編碼548個(gè)氨基酸;BoCDPK1有1個(gè)STKc和4個(gè)EF手性結(jié)構(gòu)域。多序列比對(duì)結(jié)果表明,BoCDPK1與蕓薹屬植物同源序列的相似性最高,僅個(gè)別氨基酸殘基存在差異,它們?cè)谙到y(tǒng)發(fā)育樹(shù)上聚于一組。qRT-PCR結(jié)果表明,BoCDPK1的表達(dá)受霜霉菌和核盤菌的誘導(dǎo),表達(dá)量均呈現(xiàn)先上升后下降的規(guī)律。在霜霉菌的誘導(dǎo)下,BoCDPK1的表達(dá)量在72 h達(dá)最大值,為對(duì)照的3.4倍;而在核盤菌侵染下,BoCDPK1的表達(dá)量在36 h達(dá)最大... 

【文章來(lái)源】:浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,32(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【部分圖文】:

青花菜鈣依賴蛋白激酶基因BoCDPK1的克隆與表達(dá)


BoCDPK1基因的克隆

基因


BoCDPK1基因的結(jié)構(gòu)

序列,蛋白,支持率,序列


系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明,青花菜BoCDPK1與3種蕓薹屬植物的CDPK處于同一分支,支持率達(dá)100%,它們?cè)倥c山崳菜(Eutrema salsugineum, XP_024016164)聚于一組,支持率較小,僅為53%;3種棉屬植物聚于同一分支,支持率達(dá)100%,它們與大戟科(Euphorbiaceae)的麻風(fēng)樹(shù)(Jatropha curcas, XP_020535061)和蓖麻(Ricinus communis, NP_001310655)聚于一組;十字花科的亞麻薺(Camelina sativa, XP_010467489)和薺(Capsella rubella, XP_006297360)聚于一組,支持率為89%;而山柑科(Capparaceae)的醉蝶花(Tarenaya hassleriana, XP_010548179)與豆科(Leguminosae)的大豆(Glycine max, XP_003519696)單獨(dú)成組(圖5)。圖4 BoCDPK1部分序列及其同源蛋白的比較

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]鹽藻CDPK基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 張曉琳,柴曉杰,張婷,余祝君,薛飛.  核農(nóng)學(xué)報(bào). 2013(04)
[2]普通煙草CDPK基因家族的克隆及表達(dá)分析[J]. 太帥帥,劉貫山,孫玉合,陳珈.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(10)



本文編號(hào):3261565

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