發(fā)布時間：2021-05-25 11:02

　　茭白植株與莖部菰黑粉菌的互作共生是茭白肉質莖形成的必要條件,菰黑粉菌以活體營養(yǎng)寄生的方式存在于茭白莖部,膨大肉質莖實質上是茭白植株的感病現(xiàn)象。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn):茭白莖部膨大期間抗病蛋白的表達變化與莖部菰黑粉菌的生長分布有關。NPR1基因是植物防御病原菌侵染的關鍵基因之一,與活體營養(yǎng)型寄生病原菌的侵染密切相關。本實驗克隆獲得茭白Zl-NPR1、Zl-TGA和Zl-PR1基因,比較分析Zl-NPR1與Zl-TGA的互作關系,闡明Zl-NPR1、Zl-TGA和Zl-PR1基因在茭白孕茭表型及膨大發(fā)育期間的表達模式,探討了莖部菰黑粉菌侵染分布對相關基因表達變化的調節(jié),為茭白與菰黑粉菌互作孕茭機理的研究提供了理論依據(jù)。結果如下:一、茭白Zl-NPR1、Zl-TGA及Zl-PR1基因全長克隆克隆獲得了茭白Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR1基因的全長序列。Zl-NPR1 cDNA全長為1731bp,編碼576個氨基酸。基因組DNA全長4310bp,含有4個外顯子和3個內(nèi)含子;CDD預測發(fā)現(xiàn)Zl-NPR1基因含有BTB結構域、ANK repeat結構域和NP... 

【文章來源】：中國計量大學浙江省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
abstract
1 緒論
    1.1 茭白及菰黑粉菌研究進展
        1.1.1 茭白研究進展
        1.1.2 菰黑粉菌研究進展
        1.1.3 茭白植株與菰黑粉菌互作研究
    1.2 植物抗病分子機制
        1.2.1 植物抗病基因研究
        1.2.2 植物防御反應
        1.2.3 植物激素與植物防御反應
        1.2.4 植物系統(tǒng)獲得性抗性
        1.2.5 植物誘導系統(tǒng)抗性
        1.2.6 植物PR蛋白簡介
    1.3 NPR1基因在植物抗病中的研究進展
        1.3.1 NPR1基因
        1.3.2 NPR1作用機理
        1.3.3 NPR1在植物抗病中的地位
        1.3.4 NPR1與TGA轉錄因子互作的研究
    1.4 研究內(nèi)容及意義
2 茭白NPR1、TGA、PR1基因全長克隆
    2.1 試驗材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 Zl-NPR1、Zl-TGA、Zl-PR1基因cDNA的克隆
        2.1.3 Zl-NPR1基因DNA的克隆
        2.1.4 生物信息學分析
    2.2 結果分析
        2.2.1 Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR-1 基因的克隆
        2.2.2 Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR-1 基因的序列比對分析
    2.3 討論
3 Zl-NPR1與Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6的酵母雙雜交
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 PCR擴增
        3.1.3 質粒重組
        3.1.4 Yeast2Hybriy實驗
    3.2 結果
        3.2.1 Zl-NPR1與Zl-TGA2、TGA4、TGA6的酶切
        3.2.2 重組質粒的酶切
        3.2.3 Zl-NPR1與Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6的蛋白互作
    3.3 討論
4 Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR1基因在茭白中表達模式分析
    4.1 材料方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 主要儀器及試劑
        4.1.3 方法
    4.2 實驗結果
        4.2.1 不同孕茭表型茭白膨大前期Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR1的基因表達變化
        4.2.2 Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、Zl-TGA6和Zl-PR1的基因在不同孕茭表型茭白膨大期表達變化
        4.2.3 正常茭白莖部膨大調節(jié)期間Zl-NPR1、Zl-TGA2、Zl-TGA4、TGA6和Zl-PR1基因的表達模式變化
    4.3 討論
        4.3.1 NPR1介導的免疫防御反應參與了茭白孕茭并在植株發(fā)育早期啟動
        4.3.2 Zl-NPR1與Zl-PR1基因表達與茭白莖部孕茭表型相關
        4.3.3 Zl-NPR1和Zl-PR1基因表達受茭白莖部菰黑粉菌的活體寄生侵染調節(jié)
        4.3.4 Zl-NPR1與轉錄因子Zl-TGA2和Zl-TGA6的表達互作
5 總結、創(chuàng)新與展望
    5.1 研究總結
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 展望
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]菰黑粉菌的研究進展[J]. 曹乾超,張雅芬,崔海峰,葉子弘.  長江蔬菜. 2016(06)
[2]植物TGA轉錄因子研究進展[J]. 田義,張彩霞,康國棟,李武興,張利益,叢佩華.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2016(04)
[3]外源MeJA誘導煙草葉面防御反應[J]. 馮琦,王永,武東玲,魏躍偉,崔紅.  中國煙草科學. 2013(05)
[4]茭白“雄茭”和“灰茭”的形成及遺傳特性[J]. 閆寧,薛惠民,石林豫,范菁,徐曉峰,王志丹,郭得平.  中國蔬菜. 2013(16)
[5]茭白肉質莖膨大過程中3種保護酶的活性變化[J]. 陳淑玲,張雷,王凌云,鄭寨生,張尚法,壽森炎.  長江蔬菜. 2012(16)
[6]江南名蔬——茭白[J]. 林蒲田.  湖南農(nóng)業(yè). 2012(01)
[7]雄茭、灰茭、正常茭形態(tài)指標及光合特性研究[J]. 徐曉峰,閆寧,張敬澤,黃建中,郭得平.  長江蔬菜. 2011(16)
[8]茭白肉質莖膨大期間的氧化脅迫[J]. 劉偉,黃建中,郭得平,陳子元.  核農(nóng)學報. 2011(04)
[9]水楊酸誘導馬鈴薯瘡痂病抗性的生理機制研究[J]. 湯曉莉,薛紅芬,鄧國賓,楊明摯,王燕云,陳小蘭.  西南農(nóng)業(yè)學報. 2010(06)
[10]浙江省茭白高效安全生產(chǎn)技術研究與應用現(xiàn)狀[J]. 陳建明,俞曉平,陳列忠,何月平,張玨鋒,沈學根,符長煥.  長江蔬菜. 2010(14)

碩士論文
[1]茭白抗病基因Zl-RPM1和Zl-ADR的克隆及表達分析[D]. 李帥.中國計量大學 2016
[2]菰黑粉菌α基因的克隆及功能研究[D]. 余佳佳.中國計量大學 2016
[3]茭白莖部膨大前后應激響應的蛋白質組分析[D]. 金曄.中國計量學院 2015
[4]茭白黑粉菌二型態(tài)轉換的影響因素分析及乙醛酸循環(huán)關鍵基因功能初探[D]. 劉俊平.中國計量學院 2014
[5]美味黑粉菌與菰草互作的細胞學研究[D]. 褚福強.浙江大學 2012



本文編號：3205222