發(fā)布時(shí)間：2021-05-18 02:45

　　中國水仙（Narcissus tazetta var.Chinensis Roem）為石蒜科（Amaryllidaceae）水仙花屬多年生球根花卉,是中國十大名花之一�；ò昵逍碌�,香氣濃郁。金魚藤（Asarina procumbens）是玄參科金魚藤屬多年生草本花卉,向左纏繞生長(zhǎng),是良好的垂直綠化的植物材料,原產(chǎn)于歐洲,花色豐富,花和葉都有一定的觀賞價(jià)值,但是其缺少香味�；ㄏ闶谴紊x產(chǎn)物的一種,由大量的揮發(fā)性物質(zhì)混合而成,以揮發(fā)的形式散布到環(huán)境中�；ㄏ憧梢蕴嵘龍@林植物的觀賞價(jià)值,另一方面可以吸引昆蟲授粉,通過雜交培育新品種。萜烯類化合物和苯丙酸類化合物/苯環(huán)型化合物的代謝途徑是目前主要研究的兩個(gè)花香代謝途徑。研究表明,通過引入外源花香物質(zhì)合成相關(guān)基因,使轉(zhuǎn)基因植株花香品質(zhì)改變是可行的。SAMT基因是苯丙氨酸代謝途徑中重要的催化酶,能夠調(diào)節(jié)花香成分中水楊酸甲酯的釋放。本研究利用分子遺傳手段,克隆中國水仙中調(diào)控花香合成的Nt SAMT基因,分析該基因的結(jié)構(gòu)和功能,用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將Nt SAMT基因轉(zhuǎn)化到金魚藤中,從而改良金魚藤花香品質(zhì);同時(shí)為觀賞植物進(jìn)行花香遺傳改良提供科學(xué)依據(jù)。本研究... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究的目的與意義
    1.2 國內(nèi)外研究動(dòng)態(tài)和趨勢(shì)
        1.2.1 植物花香生物合成關(guān)鍵酶及基因的研究進(jìn)展
        1.2.2 植物花香SABATH甲基轉(zhuǎn)移酶的研究進(jìn)展
        1.2.3 植物SAMT的研究進(jìn)展
        1.2.4 水仙花花香的研究進(jìn)展
        1.2.5 金魚藤的研究進(jìn)展
    1.3 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌種及載體
        2.1.3 試驗(yàn)試劑
        2.1.4 培養(yǎng)基
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 目的基因全長(zhǎng)cDNA的克隆
        2.2.2 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的金魚藤遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株再生
3 結(jié)果與分析
    3.1 提取植物總RNA
    3.2 RT-PCR法克隆Nt SAMT基因cDNA全長(zhǎng)
    3.3 中國水仙Nt SAMT基因的序列及其推導(dǎo)的蛋白同源性分析
        3.3.1 Nt SAMT基因cDNA全長(zhǎng)序列
        3.3.2 Nt SAMT基因同源性比對(duì)
        3.3.3 Nt SAMT編碼氨基酸序列進(jìn)化樹分析
    3.4 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
    3.5 金魚藤遺傳轉(zhuǎn)化體系建立
        3.5.1 卡那霉素（Km）篩選壓力的確定
        3.5.2 除菌劑濃度的確定
    3.6 外源基因轉(zhuǎn)化金魚藤
    3.7 抗性植株的PCR檢測(cè)
    3.8 擬轉(zhuǎn)基因金魚藤植株的RT-PCR檢測(cè)
4 討論
    4.1 花香基因分離方法的研究
        4.1.1 功能克隆
        4.1.2 同源克隆
        4.1.3 表型差異克隆
    4.2 花香基因的改良研究
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國水仙NtSAMT基因的克隆及轉(zhuǎn)化金魚藤[J]. 鄭清波,趙明明,鄭鑫,劉緒明,樊金萍.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(02)
[2]金魚藤中ApNAP基因的克隆和表達(dá)模式分析[J]. 樊金萍,趙然.  植物科學(xué)學(xué)報(bào). 2014(03)
[3]不同光照強(qiáng)度對(duì)‘金盞銀臺(tái)’水仙花香釋放的影響[J]. 竇雅君,翟娟,侯芳梅,冷平生,王文和,胡增輝.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]金魚藤的組織培養(yǎng)和快速繁殖體系的建立[J]. 張美恒,胡翠萍,樊金萍.  作物雜志. 2012(02)
[5]蠟梅花香基因SAMT的cDNA克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 馬蕾,李慧芬,彭忱晨,陳子柱,龍章富.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(03)
[6]植物SABATH甲基轉(zhuǎn)移酶研究進(jìn)展[J]. 黃銘坤,何杰玲,范燕萍.  植物生理學(xué)報(bào). 2011(09)
[7]茶樹咖啡酸氧甲基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及原核表達(dá)[J]. 李小霞,余有本.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2011(05)
[8]薇甘菊水楊酸羧甲基轉(zhuǎn)移酶基因的分離鑒定及表達(dá)分析[J]. 王文天,彭少麟,李冬梅,王冬梅,王瑞龍,田彩娟,趙厚本,戶桂敏.  熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 2009(05)
[9]花香的基因工程研究進(jìn)展[J]. 向林,陳龍清.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(06)
[10]月季功能基因研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 謝吉容,程再全,唐開學(xué),黃興奇,梁國魯.  北方園藝. 2007(08)

博士論文
[1]鈷-60Gamma射線輻照中國水仙的誘變效應(yīng)和機(jī)理研究[D]. 高健.中國林業(yè)科學(xué)研究院 2000

碩士論文
[1]基于cDNA-AFLP篩選茶樹被茶尺蠖取食誘導(dǎo)的相關(guān)差異基因及SAMT的克隆與表達(dá)分析[D]. 曹士先.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[2]cDNA-AFLP技術(shù)分離桂花香氣相關(guān)基因[D]. 張園.福建農(nóng)林大學(xué) 2009
[3]薰衣草芳樟醇合成酶的基因克隆、功能鑒定及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究[D]. 張雪榮.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
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