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黃肉蘋果類胡蘿卜素合成相關(guān)基因的表達(dá)研究

發(fā)布時間:2021-05-10 19:46
  蘋果果實色澤是評價果實商品性的關(guān)鍵指標(biāo),也關(guān)系著果實的營養(yǎng)保健功能,果實最終色澤主要由類胡蘿卜素、葉綠素、花青素、類黃酮等色素的相對含量決定。蘋果中類胡蘿卜素研究時間短,研究基礎(chǔ)薄弱,但類胡蘿卜素對于蘋果品質(zhì)具有重要地位,因此對蘋果類胡蘿卜素合成相關(guān)基因表達(dá)的研究,將為高品質(zhì)育種提供重要的理論依據(jù)。本文采用色差計測定蘋果生長發(fā)育過程中色澤值,采用比色法測量類胡蘿卜素及其他果皮色素含量,分析果皮色素、色差的變化及其相關(guān)性;通過采用多種蘋果試材、選用多種方法進(jìn)行RNA提取并進(jìn)行質(zhì)量檢測,篩選出了適用于轉(zhuǎn)錄組測序的蘋果果實RNA提取方法;對‘東北黃海棠’轉(zhuǎn)色期前后果實進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序,對轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行驗證,并分析果實發(fā)育過程中果皮、果肉類胡蘿卜素合成相關(guān)基因表達(dá)量,結(jié)合類胡蘿卜素含量變化篩選與類胡蘿卜素代謝顯著相關(guān)基因。本文的主要結(jié)果和結(jié)論如下:黃色種質(zhì)‘東北黃海棠’、紅色種質(zhì)‘冬紅果’、白色種質(zhì)‘早白海棠’蘋果發(fā)育過程中果皮類胡蘿卜素、葉綠素、總酚和類黃酮整體呈降低趨勢,類胡蘿卜素、葉綠素在‘東北黃海棠’近成熟期含量略有上升;類胡蘿卜素與葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、花青素、類黃酮、總酚以及... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 類胡蘿卜素概述
        1.1.1 類胡蘿卜素的種類和結(jié)構(gòu)
        1.1.2 類胡蘿卜素的性質(zhì)和功能
        1.1.3 類胡蘿卜素的合成與代謝
        1.1.4 影響類胡蘿卜素合成及積累的因素
    1.2 蘋果中類胡蘿卜素含量的研究現(xiàn)狀
    1.3 轉(zhuǎn)錄組測序在果樹中的應(yīng)用
    1.4 研究目的和意義
第二章 試驗材料與方法
    2.1 試驗材料
    2.2 試驗方法
        2.2.1 果實發(fā)育期間果皮類胡蘿卜素及其他色素含量的測定
        2.2.2 果皮色澤測定
        2.2.3 蘋果果實RNA的提取
        2.2.4 轉(zhuǎn)錄組測序及數(shù)據(jù)驗證
        2.2.5 類胡蘿卜素合成相關(guān)基因表達(dá)量檢測
        2.2.6 MdCCD4基因克隆
        2.2.7 數(shù)據(jù)處理方法
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 果實發(fā)育期間果皮類胡蘿卜素的變化
        3.1.1 果實發(fā)育期間果皮色素、色澤變化
        3.1.2 果實發(fā)育期間果皮類胡蘿卜素與其他色素、色澤之間的關(guān)系
    3.2 蘋果果實RNA提取的方法篩選
        3.2.1 RNA電泳結(jié)果
        3.2.2 RNA濃度純度、測序質(zhì)量評估
    3.3 轉(zhuǎn)錄組分析
        3.3.1 轉(zhuǎn)錄組測序質(zhì)量控制
        3.3.2 果實轉(zhuǎn)色前后轉(zhuǎn)錄組顯著差異分析、Gene Ontology功能注釋
        3.3.3 果實轉(zhuǎn)色前后表達(dá)差異基因Pathway分析
        3.3.4 兩個發(fā)育時期差異轉(zhuǎn)錄因子分類與注釋
        3.3.5 兩個發(fā)育時期七個差異表達(dá)基因qRT-PCR分析
    3.4 ‘晚白海棠’‘東北黃海棠’類胡蘿卜素測定以及合成相關(guān)基因表達(dá)分析
    3.5 ‘晚白海棠’‘東北黃海棠’類胡蘿卜素降解基因表達(dá)分析
    3.6 PSY和CCD基因分析
        3.6.1 八氫番茄紅素合成酶基因(PSY)分析
        3.6.2 類胡蘿卜素雙加氧酶基因(CCD4)分析
第四章 討論
    4.1 類胡蘿卜素等色素在蘋果中的含量與相關(guān)關(guān)系
    4.2 適合轉(zhuǎn)錄組測序的蘋果果實RNA提取的方法
    4.3 類胡蘿卜素代謝相關(guān)基因及轉(zhuǎn)錄因子的分析
第五章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩種不同肉色枇杷果實類胡蘿卜素積累及合成相關(guān)基因的表達(dá)[J]. 張玲,鄭婷婷,魏偉淋,朱云美,高用順,楊向暉,林順權(quán).  園藝學(xué)報. 2015(11)
[2]黔中地區(qū)不同品種蘋果果皮色素類物質(zhì)的含量變化[J]. 袁啟鳳,盧星諭,仲偉敏,宋莎,馬玉華.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(08)
[3]新疆紅肉蘋果發(fā)育期間花青素代謝的研究[J]. 謝兵,周杰,朱樹華.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(08)
[4]桃果實花色素苷積累與ABP1、ARF6表達(dá)分析[J]. 焦云,馬瑞娟,沈志軍,嚴(yán)娟,俞明亮.  中國南方果樹. 2015(01)
[5]“魯加”系列蘋果果實發(fā)育期酚類和果皮色素含量變化研究[J]. 宋伊真,張玉剛,祝軍,戴洪義.  北方園藝. 2014(24)
[6]胡蘿卜中類胡蘿卜素積累與主要合成基因轉(zhuǎn)錄水平相關(guān)性分析[J]. 王慧,歐承剛,莊飛云,趙志偉,馬振國.  園藝學(xué)報. 2014(12)
[7]不同砧穗組合的蘋果果實總酚、類黃酮和果皮色素含量變化的研究[J]. 宋伊真,王芝云,沙廣利,張玉剛,祝軍,戴洪義.  青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(03)
[8]鉀肥對富士蘋果著色的影響及機理[J]. 姜學(xué)玲,徐維華,李延菊,張振英,唐美玲,劉美英.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)
[9]2012年全球主要水果生產(chǎn)變化簡析(一)[J]. 張放.  中國果業(yè)信息. 2014(02)
[10]RNA-Seq在果樹學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 馮超,朱長青,徐昌杰,陳昆松.  果樹學(xué)報. 2014(01)

博士論文
[1]柑橘類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)分析及構(gòu)效關(guān)系研究[D]. 傅虹飛.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]基于RNA-seq測序的梅花轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 石文芳.北京林業(yè)大學(xué) 2012



本文編號:3179953

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