枇杷果實品質(zhì)形成的分子生理機制研究
發(fā)布時間:2021-03-09 02:14
枇杷(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.)是薔薇科蘋果亞科枇杷屬植物,其果肉含有類胡蘿卜素、維生素、礦物質(zhì)和苦杏仁甙等豐富的營養(yǎng)成分。枇杷具有祛痰止咳、生津潤肺、清熱健胃、促進食欲和幫助消化等保健功效,使之深受人們喜愛。本研究以著名的“解放鐘”枇杷品種為試驗材料,研究枇杷果肉不同發(fā)育時期(青果期、轉(zhuǎn)色期、成熟期)的生理代謝變化及果實品質(zhì)形成機制。采用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳及MALDI-TOF-TOF/MS技術(shù),成功鑒定出55個差異表達蛋白,這些差異表達蛋白按生理功能分類可分為:糖代謝相關(guān)蛋白(16%),三羧酸循環(huán)及能量代謝相關(guān)蛋白(9%),抗氧化(維生素C循環(huán))相關(guān)蛋白(14%),次級代謝(類胡蘿卜素合成及乙烯形成)相關(guān)蛋白(11%),蛋白質(zhì)代謝合成相關(guān)蛋白(13%),細胞結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白(8%),防御脅迫相關(guān)蛋白(9%),其它調(diào)控相關(guān)蛋白(13%)及未分類的蛋白(7%)。采用Real-Time PCR技術(shù)對果肉色素形成分析,發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育時期分別由不同基因控制其色素形成。同時結(jié)合生理生化分析,揭示枇杷果實品質(zhì)形成過程中的分子生理機制,結(jié)果如下:(1)α-淀粉...
【文章來源】:福建農(nóng)林大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮寫詞表
摘要
Abstract
1. 前言
1.1 果實風(fēng)味形成——糖、酸變化的相關(guān)研究
1.2 果實色澤形成——類胡蘿卜素代謝相關(guān)研究
1.3 果實發(fā)育與成熟過程中的蛋白質(zhì)組研究
1.4 枇杷果實品質(zhì)研究動態(tài)
1.5 本研究的目的、意義及內(nèi)容
1.5.1 本研究的目的與意義
1.5.2 本研究的主要內(nèi)容及技術(shù)路線
2 材料與方法
2.1 試驗材料
2.2 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的生理生化研究
2.2.1 可溶性糖、還原糖及蔗糖含量的測定
2.2.2 有機酸含量測定
2.2.3 總類胡蘿卜素含量測定
2.2.4 維生素C含量、脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)及抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性的測定
2.3 枇杷果實品質(zhì)形成過程中差異蛋白質(zhì)組研究
2.3.1 枇杷果肉蛋白質(zhì)的提取
2.3.2 蛋白質(zhì)的裂解
2.3.3 枇杷果肉蛋白質(zhì)的定量
2.3.4 蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳
2.3.4.1 第一向等電聚焦
2.3.4.2 膠條平衡
2.3.4.3 第二向SDS-PAGE電泳
2.3.5 染色與脫色
2.3.6 凝膠圖像的掃描即軟件分析
2.3.7 差異蛋白點的酶解
2.3.8 差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫檢索
2.4 枇杷品質(zhì)形成過程中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平研究
2.4.1 枇杷果實總RNA提取及完整性檢測
2.4.2 cDNA第一鏈合成
2.4.3 RT-PCR
2.4.4 Real-Time PCR
3. 結(jié)果與分析
3.1 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的生理生化變化
3.1.1 可溶性總糖、還原糖和蔗糖含量的變化
3.1.2 有機酸含量變化
3.1.3 類胡蘿卜素總含量變化
3.1.4 維生素C含量、抗壞血酸過氧化物酶(APX)及脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性變化
3.2 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的蛋白質(zhì)組分析
3.2.1 蛋白表達圖譜分析
3.2.2 枇杷品質(zhì)形成過程中果肉差異蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果及功能分析
3.3 枇杷果實品質(zhì)形成過程中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平研究
3.3.1 RNA質(zhì)量檢測及濃度測定
3.3.2 相關(guān)基因的RT-PCR分析
3.3.3 相關(guān)基因的Real-time PCR分析
4. 討論
4.1 糖代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.2 三羧酸循環(huán)及能量代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.3 類胡蘿卜素代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.4 維生素C循環(huán)代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.5 乙烯形成相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.6 枇杷果實品質(zhì)形成過程中其它蛋白的調(diào)控作用
5. 總結(jié)
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]獼猴桃果實發(fā)育過程中AsA代謝產(chǎn)物積累及相關(guān)酶活性的變化[J]. 侯長明,李明軍,馬鋒旺,梁東,杜國榮. 園藝學(xué)報. 2009(09)
[2]杏果實發(fā)育過程中有機酸積累與相關(guān)代謝酶的關(guān)系[J]. 陳美霞,趙從凱,陳學(xué)森,郝會軍,張憲省. 果樹學(xué)報. 2009(04)
[3]蘋果果實糖積累特性與品質(zhì)形成的關(guān)系[J]. 魏建梅,齊秀東,朱向秋,馬鋒旺. 西北植物學(xué)報. 2009(06)
[4]植物隱花色素結(jié)構(gòu)與功能研究進展[J]. 朱春利,張桂榮,蔡愛軍,杜金友. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2009(01)
[5]α淀粉酶家族的新成員——多功能淀粉酶[J]. 王陽,李樊,張應(yīng)玖. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2009(02)
[6]解放鐘和早鐘6號枇杷果實的貯藏性與采后生理變化比較[J]. 林建城,林河通,蔡少芬,陳秋,韓小紅,鐘建紅. 熱帶作物學(xué)報. 2008(05)
[7]茶樹鮮葉抗壞血酸過氧化物酶活性的變化規(guī)律及測定方法[J]. 孫云,江春柳,賴鐘雄,邵巍,王秀英. 熱帶作物學(xué)報. 2008(05)
[8]北緣地區(qū)枇杷果實生長過程的生理變化[J]. 曹雪丹,吳萬興,張忠良,魯周民. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2008(04)
[9]枇杷采后酚類物質(zhì)代謝與果肉木質(zhì)化的關(guān)系[J]. 劉國強,吳錦程,唐朝暉,張琳華,戴巧斌. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(01)
[10]桃果實發(fā)育過程中主要糖及有機酸含量的變化分析[J]. 沈志軍,馬瑞娟,俞明亮,蔡志翔,宋宏峰,李曉. 華北農(nóng)學(xué)報. 2007(06)
博士論文
[1]柑橘果實類胡蘿卜素形成及調(diào)控的生理機制研究[D]. 陶俊.浙江大學(xué) 2002
碩士論文
[1]臍橙果實發(fā)育過程中抗壞血酸含量及相關(guān)酶活性的研究[D]. 黃艷花.西南大學(xué) 2014
[2]枇杷文化與產(chǎn)業(yè)發(fā)展[D]. 鄭文爐.福建農(nóng)林大學(xué) 2010
[3]芒果果實色素與色澤變化規(guī)律及調(diào)控的研究[D]. 張金云.海南大學(xué) 2010
本文編號:3072072
【文章來源】:福建農(nóng)林大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮寫詞表
摘要
Abstract
1. 前言
1.1 果實風(fēng)味形成——糖、酸變化的相關(guān)研究
1.2 果實色澤形成——類胡蘿卜素代謝相關(guān)研究
1.3 果實發(fā)育與成熟過程中的蛋白質(zhì)組研究
1.4 枇杷果實品質(zhì)研究動態(tài)
1.5 本研究的目的、意義及內(nèi)容
1.5.1 本研究的目的與意義
1.5.2 本研究的主要內(nèi)容及技術(shù)路線
2 材料與方法
2.1 試驗材料
2.2 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的生理生化研究
2.2.1 可溶性糖、還原糖及蔗糖含量的測定
2.2.2 有機酸含量測定
2.2.3 總類胡蘿卜素含量測定
2.2.4 維生素C含量、脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)及抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性的測定
2.3 枇杷果實品質(zhì)形成過程中差異蛋白質(zhì)組研究
2.3.1 枇杷果肉蛋白質(zhì)的提取
2.3.2 蛋白質(zhì)的裂解
2.3.3 枇杷果肉蛋白質(zhì)的定量
2.3.4 蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳
2.3.4.1 第一向等電聚焦
2.3.4.2 膠條平衡
2.3.4.3 第二向SDS-PAGE電泳
2.3.5 染色與脫色
2.3.6 凝膠圖像的掃描即軟件分析
2.3.7 差異蛋白點的酶解
2.3.8 差異蛋白點的質(zhì)譜鑒定及數(shù)據(jù)庫檢索
2.4 枇杷品質(zhì)形成過程中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平研究
2.4.1 枇杷果實總RNA提取及完整性檢測
2.4.2 cDNA第一鏈合成
2.4.3 RT-PCR
2.4.4 Real-Time PCR
3. 結(jié)果與分析
3.1 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的生理生化變化
3.1.1 可溶性總糖、還原糖和蔗糖含量的變化
3.1.2 有機酸含量變化
3.1.3 類胡蘿卜素總含量變化
3.1.4 維生素C含量、抗壞血酸過氧化物酶(APX)及脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性變化
3.2 枇杷果實品質(zhì)形成過程中的蛋白質(zhì)組分析
3.2.1 蛋白表達圖譜分析
3.2.2 枇杷品質(zhì)形成過程中果肉差異蛋白質(zhì)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果及功能分析
3.3 枇杷果實品質(zhì)形成過程中相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平研究
3.3.1 RNA質(zhì)量檢測及濃度測定
3.3.2 相關(guān)基因的RT-PCR分析
3.3.3 相關(guān)基因的Real-time PCR分析
4. 討論
4.1 糖代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.2 三羧酸循環(huán)及能量代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.3 類胡蘿卜素代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.4 維生素C循環(huán)代謝相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.5 乙烯形成相關(guān)蛋白與枇杷果實品質(zhì)形成的關(guān)系
4.6 枇杷果實品質(zhì)形成過程中其它蛋白的調(diào)控作用
5. 總結(jié)
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]獼猴桃果實發(fā)育過程中AsA代謝產(chǎn)物積累及相關(guān)酶活性的變化[J]. 侯長明,李明軍,馬鋒旺,梁東,杜國榮. 園藝學(xué)報. 2009(09)
[2]杏果實發(fā)育過程中有機酸積累與相關(guān)代謝酶的關(guān)系[J]. 陳美霞,趙從凱,陳學(xué)森,郝會軍,張憲省. 果樹學(xué)報. 2009(04)
[3]蘋果果實糖積累特性與品質(zhì)形成的關(guān)系[J]. 魏建梅,齊秀東,朱向秋,馬鋒旺. 西北植物學(xué)報. 2009(06)
[4]植物隱花色素結(jié)構(gòu)與功能研究進展[J]. 朱春利,張桂榮,蔡愛軍,杜金友. 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2009(01)
[5]α淀粉酶家族的新成員——多功能淀粉酶[J]. 王陽,李樊,張應(yīng)玖. 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2009(02)
[6]解放鐘和早鐘6號枇杷果實的貯藏性與采后生理變化比較[J]. 林建城,林河通,蔡少芬,陳秋,韓小紅,鐘建紅. 熱帶作物學(xué)報. 2008(05)
[7]茶樹鮮葉抗壞血酸過氧化物酶活性的變化規(guī)律及測定方法[J]. 孫云,江春柳,賴鐘雄,邵巍,王秀英. 熱帶作物學(xué)報. 2008(05)
[8]北緣地區(qū)枇杷果實生長過程的生理變化[J]. 曹雪丹,吳萬興,張忠良,魯周民. 西北林學(xué)院學(xué)報. 2008(04)
[9]枇杷采后酚類物質(zhì)代謝與果肉木質(zhì)化的關(guān)系[J]. 劉國強,吳錦程,唐朝暉,張琳華,戴巧斌. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2008(01)
[10]桃果實發(fā)育過程中主要糖及有機酸含量的變化分析[J]. 沈志軍,馬瑞娟,俞明亮,蔡志翔,宋宏峰,李曉. 華北農(nóng)學(xué)報. 2007(06)
博士論文
[1]柑橘果實類胡蘿卜素形成及調(diào)控的生理機制研究[D]. 陶俊.浙江大學(xué) 2002
碩士論文
[1]臍橙果實發(fā)育過程中抗壞血酸含量及相關(guān)酶活性的研究[D]. 黃艷花.西南大學(xué) 2014
[2]枇杷文化與產(chǎn)業(yè)發(fā)展[D]. 鄭文爐.福建農(nóng)林大學(xué) 2010
[3]芒果果實色素與色澤變化規(guī)律及調(diào)控的研究[D]. 張金云.海南大學(xué) 2010
本文編號:3072072
本文鏈接:http://www.sikaile.net/nykjlw/yylw/3072072.html
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