【摘要】：油梨(Persea Americana.Mill)營養(yǎng)價值豐富,是熱帶亞熱帶水果。建立和形成高效穩(wěn)定的離體再生體系是進行遺傳轉化和培育優(yōu)良品種的前提和基礎。油梨的離體再生較為艱難,在一定程度上妨礙了油梨現代生物技術育種的進程。通過離體培養(yǎng),可為油梨建立快速、不受季節(jié)限制的繁殖方式。本試驗以“哈斯”油梨為試材,利用莖段、葉片等為外植體,通過對激素種類及其濃度配比、基本培養(yǎng)基類型和外植體類型等一系列因素的研究,初步建立了“哈斯”油梨(Persea Americana.Mill‘Hass’)離體培養(yǎng)體系,為后期“哈斯”及其它品種系油梨離體再生體系研究和優(yōu)良品種育種工作提供理論借鑒意義。通過試驗得出以下研究結果:利用誘導形成愈傷組織建立分化不定芽體系:(1)適宜消毒滅菌方法:選取生長期(3~8月)的外植體(葉片、葉柄、帶芽/不帶芽莖段),75%酒精處理20~30 s+無菌水沖洗2次+0.1%HgCl_2處理5~6mins+無菌水沖洗4~5次;(2)適宜誘導愈傷組織的培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~-11 6-BA+1.0 mg·L~-11 NAA+30g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)瓊脂(84%),pH=5.8±0.1,黑暗處理;(3)愈傷組織誘導最佳的外植體類型:莖段最佳(72.7%),葉柄次之(66.3%),葉片和莖尖較差(30~33.4%);(4)愈傷組織誘導最佳的基本培養(yǎng)基類型:H培養(yǎng)基誘導效果最佳(72.1%),N_6和MS培養(yǎng)基次之(分別為61.4%和39.5%),WPM和B_(5改)較差(分別為27.6%和16.2%),1/2MS誘導率最低(11.6%);(5)葉片直接出芽:光照條件下,在H養(yǎng)基中(附加不同濃度6-BA和NAA)葉片外植體難以直接誘導不定芽,但可誘導愈傷組織;(6)愈傷組織分化不定芽:在MS分化培養(yǎng)基中(含有6-BA和NAA),愈傷組織難以分化不定芽;(7)油梨花藥愈傷組織誘導:冷處理后的“哈斯”油梨花藥在愈傷組織誘導培養(yǎng)基中(以MS、N_6、H、WPM和B_(5改)為基本培養(yǎng)基,添加1.0 mg·L~-11 6-BA、2.0 mg·L~(-1) 2,4-D、0.2 mg·L~(-1) NAA、5 g·L~(-1) CH、30 g·L~(-1)蔗糖和7 g·L~(-1)瓊脂)難以誘導形成愈傷組織。利用帶芽莖段(半木質化)進行快速繁殖:(1)適宜消毒滅菌方法:選取生長期(3~8月)的外植體,75%酒精處理30~40s+無菌水沖洗2次+0.1%HgCl_2處理6~8 mins+無菌水沖洗4~5次;(2)適宜誘導側芽的基本培養(yǎng)基:MS基本培養(yǎng)基(73.7%),H基本培養(yǎng)基次之(66.6%);(3)適宜誘導側芽的培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1)IBA+30 g·L~(-1)蔗糖+7 g·L~(-1)瓊脂,pH=5.8±0.1;(4)適宜增殖培養(yǎng)基:MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)瓊脂,pH=5.8±0.1;(5)“哈斯”油梨試管苗生根有困難,后期需作進一步的研究探討。
【圖文】：

不同濃度2,4-D/NAA對葉片愈傷組織誘導的影響

圖 3-2 不同濃度 2,4-D/NAA 下“哈斯”油梨葉片愈傷組織干鮮重Figure 3-2 Dry and fresh weight of callusi nduced by different concentration of 2,4-D/NAA via leexplant from avocado 'Hass'注：同一列數據后的不同字母表示差異顯著(p<0.05)，下圖同。
【學位授予單位】：仲愷農業(yè)工程學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S667.9

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 杜兆偉;鄭唐春;李爽;臧麗娜;曲冠證;由香玲;;小黑楊快繁與再生體系的優(yōu)化[J];植物研究;2015年06期

2 李峰卿;姚甲寶;曾滿生;厲月橋;袁雅琪;周新華;;TDZ對杏香兔耳風組培苗復壯的影響[J];經濟林研究;2015年03期

3 秦璐;陳泉;梁志強;祝建波;;庫爾勒香梨葉片不定芽再生誘導的研究[J];北方園藝;2015年09期

4 唐佳佳;尚旭嵐;m香香;;黑荊樹愈傷組織誘導、增殖與分化[J];中南林業(yè)科技大學學報;2014年09期

5 金琪;王巖;史良;王歡;張智勇;李穎岳;;‘冬棗’子代種子萌發(fā)及下胚軸誘導愈傷組織研究[J];中國農學通報;2014年13期

6 于艷;郎慶龍;夏興宏;孫娟;王連珍;高偉;李立峰;姜欣雨;;以多年生麻櫟莖段為外植體的組織培養(yǎng)條件優(yōu)化[J];蠶業(yè)科學;2014年02期

7 王旭煒;付杰;王青;陳鴻宇;曾其偉;何寧佳;;TDZ在木本植物再生中的應用趨勢及桑樹中的前景[J];蠶學通訊;2014年01期

8 李素紅;宮慶濤;蔣恩順;李泉勝;于蘭嶺;;組織培養(yǎng)在果樹中的應用[J];山西農業(yè)科學;2013年11期

9 白芝蘭;李果果;吳曉冉;李國懷;;野生毛桃葉片愈傷組織誘導及不定芽再生[J];果樹學報;2012年05期

10 陳珍;孫駿威;許海丹;錢寶英;鮑思偉;;天臺烏藥的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J];浙江農業(yè)學報;2012年02期

相關碩士學位論文 前5條

1 陳佳;無患子組織培養(yǎng)再生體系研究[D];福建農林大學;2014年

2 白芝蘭;桃砧木毛桃離體培養(yǎng)和植株再生的研究[D];華中農業(yè)大學;2012年

3 李果果;桃砧木GF677葉片離體再生和愈傷組織誘導保存[D];華中農業(yè)大學;2011年

4 王盼盼;黑木相思不同優(yōu)良無性系組培快繁技術比較研究[D];福建農林大學;2011年

5 侯競薇;板栗組織培養(yǎng)及其不定根發(fā)生蛋白質組學探討[D];北京林業(yè)大學;2010年

，

本文編號：2694932