【摘要】:本試驗利用自育高效授粉樹1379、1539、2119及3-21的花粉對富士和紅星進行授粉,以嘎啦的花粉作為對照,對果實發(fā)育期間抗壞血酸(AsA)、可溶性糖和可滴定酸組分、總類黃酮含量的變化進行研究,并對果實成熟時的外在及內在品質進行研究,如單果重、果形指數、果實硬度、揮發(fā)性物質、果皮花色苷含量等。采用轉錄組測序技術比較了 1379和嘎啦花粉授粉后的富士果實不同發(fā)育階段基因表達的差異,挖掘與AsA、類黃酮合成相關結構基因。主要結果如下:1.不同授粉樹的花粉對富士、紅星蘋果進行的授粉試驗結果表明,高效授粉樹的花粉對能夠有效地提高果實的單果重、果形指數、花色苷含量等外觀品質及硬度、可溶性固形物、揮發(fā)性氣體物質、可溶性糖、可滴定酸等內在品質,且均與對照存在顯著性差異。2.在果實發(fā)育過程中,果實中的AsA和類黃酮含量逐漸減少,幼果中的含量遠遠大于成熟果實,同一發(fā)育時期的果實中紅星的類黃酮含量大于富士,而AsA的含量相差不大。經過高效授粉樹授粉后的成熟果實中AsA、類黃酮含量明顯提高,富士經1379、1539、2119、3-21花粉授粉后的果實內類黃酮含量與對照相比分別增長13.80%、28.54%、19.65%、18.92%,紅星分別增長 4.69%、15.64%、14.59%、26.40%;富士經1379、1539、2119、3-21花粉授粉后的果實內AsA含量與對照相比分別增長 34.55%、28.18%、52.73%、57.27%,紅星分別增長 8.67%、20.23%、9.83%、24.86%且都 與對照都存在顯著性差異。3.將1379、嘎啦與富士授粉,對花后15、30、45、60天的果實利用Illumina雙末端測序(Hiseq 2500)平臺進行測序,共產生59047506條高質量的reads,通過混合拼接共13272條Unigenes得到了基因功能注釋,并有3339條Unigenes映射到Go數據庫中不同的節(jié)點,而通過KEGG代謝通路分析發(fā)現3636條Unigenes參與了 124個生物學途徑,其中25條被注釋到AsA代謝途徑中,24條被注釋到類黃酮生物合成途徑中。4.對花后15d、30d、45d、60d的果實進行轉錄組測序,利用測序結果對蘋果不同授粉組合AsA、類黃酮生物合成途徑相關基因的表達進行分析。結果表明,在果實發(fā)育過程中AsA合成相關基因GME、GGP、APX均有不同程度的下調,而AO基因呈上調表達模式,分別比較1379和嘎啦授粉后的果實,1379授粉果實中GME基因顯著上調表達。類黃酮合成相關基因CHI、DFR、LAR、ANR在果實發(fā)育過程中均下調表達,而1379授粉后的果實比和嘎啦授粉LAR基因顯著上調表達。這些基因的表達與果實中AsA、類黃酮的變化規(guī)律基本一致。采用qRT-PCR對這23個與AsA、類黃酮生物合成相關的基因進行了表達驗證,結果表明qRT-PCR與表達譜分析結果基本一致。
【學位授予單位】:山東農業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S661.1
【參考文獻】
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2627582
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