氧是需氧生物正常生命活動的必要條件,動物可通過調(diào)節(jié)自身代謝適應(yīng)短期的低氧或高氧環(huán)境。氧濃度變化會影響動物的生長發(fā)育和繁殖,尤其在心血管方面表現(xiàn)明顯。水中溶解氧容易發(fā)生改變,對水生動物的代謝影響顯著。魚類受高氧或低氧脅迫后會引發(fā)各種生理應(yīng)答,脅迫消除后機體會產(chǎn)生補償現(xiàn)象,但生長發(fā)育仍受影響,嚴重時誘發(fā)疾病并影響生存。目前溶氧對魚類影響的研究集中在成魚的生理響應(yīng),對于胚胎發(fā)育時期的影響較少涉及。高氧和低氧條件下對胚胎生長發(fā)育、心血管發(fā)育情況及調(diào)控機制尚不清楚。本研究以斑馬魚（Danio rerio）作為實驗?zāi)Ｐ?選擇心臟、血管熒光標記的兩個品系斑馬魚為實驗材料,設(shè)定低氧（2.0±0.5mg/L）、常氧（6.0±0.5mg/L）和高氧（15.5±0.5mg/L）三種溶氧條件,用熒光顯微鏡觀測24-72hpf胚胎形態(tài)結(jié)構(gòu),心臟和血管外部形態(tài),心率,胚胎軀干部主要血管背主動脈（DA）和后主靜脈（PCV）直徑,背部縱向血管（DLAV）到PCV的距離,相鄰體節(jié)間血管（ISV）距離,脊索旁血管（PAV）的形成情況。結(jié)果顯示,常氧條件下胚胎存活率為74.18±4.23%,高氧下存活率為76±4.09%,... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
第1章 文獻綜述
    1.1 低氧對人和陸生動物的影響
    1.2 高氧對人和陸生動物的影響
    1.3 氧對魚類的影響
        1.3.1 溶解氧的功能
        1.3.2 溶解氧對魚類心血管機能的影響
        1.3.3 溶解氧對魚類其他器官機能的影響
    1.4 模式生物—斑馬魚
    1.5 斑馬魚心血管發(fā)育
        1.5.1 斑馬魚心臟發(fā)育過程
        1.5.2 斑馬魚血管發(fā)育過程
        1.5.3 斑馬魚心血管發(fā)育研究現(xiàn)狀
第2章 緒論
    2.1 選題背景與意義
    2.2 研究內(nèi)容與技術(shù)路線
        2.2.1 研究內(nèi)容
        2.2.2 技術(shù)路線
第3章 實驗動物及方法
    3.1 實驗動物、儀器及試劑
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 質(zhì)粒圖譜
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 主要試劑
        3.1.5 主要試劑配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 溶解氧條件的制備
        3.2.2 觀測胚胎外部形態(tài)
        3.2.3 cDNA的合成
        3.2.4 PCR擴增目的基因
        3.2.5 目的片段的克隆
        3.2.6 重組質(zhì)粒的提取及純化
        3.2.7 地高辛探針的合成
        3.2.8 整胚原位雜交
        3.2.9 qPCR檢測
第4章 實驗結(jié)果與討論
    4.1 低氧和高氧對胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
        4.1.1 胚胎發(fā)育對低氧和高氧敏感的時間窗
        4.1.2 低氧和高氧對胚胎存活率的影響
        4.1.3 低氧和高氧對胚胎外部形態(tài)的影響
        4.1.4 低氧和高氧對胚胎體長的影響
        4.1.5 低氧和高氧對胚胎卵黃球（YB）及卵黃延伸（YE）的影響
        4.1.6 低氧和高氧對胚胎眼徑的影響
        4.1.7 低氧和高氧對胚胎心臟形態(tài)的影響
        4.1.8 低氧和高氧對胚胎血管形態(tài)的影響
    4.2 低氧和高氧對胚胎心臟、血管發(fā)育相關(guān)基因表達的影響
        4.2.1 總RNA的提取
        4.2.2 目的基因的擴增
        4.2.3 陽性克隆篩選及鑒定
        4.2.4 DIG標記RNA探針的合成
        4.2.5 心臟相關(guān)基因的整胚原位雜交
        4.2.6 血管相關(guān)基因的整胚原位雜交
        4.2.7 qPCR檢測心臟、血管發(fā)育相關(guān)基因的表達
    4.3 討論
        4.3.1 低氧和高氧對胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
        4.3.2 低氧和高氧對胚胎心臟發(fā)育的影響
        4.3.3 低氧和高氧對胚胎血管發(fā)育的影響
第5章 結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3110122