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氟對(duì)斑馬魚下丘腦—垂體—甲狀腺軸干擾效應(yīng)的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-20 22:18
【摘要】:目前已有大量的研究表明高氟會(huì)抑制魚類的生長發(fā)育,但對(duì)其影響機(jī)制還尚無定論。內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)對(duì)機(jī)體的生長發(fā)育至關(guān)重要,下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT)軸是內(nèi)分泌系統(tǒng)的成員之一。為探究氟是否通過影響魚類HPT軸影響魚類正常生長發(fā)育,本試驗(yàn)選用兩月齡健康斑馬魚,隨機(jī)分為3組,分別為對(duì)照組(0mg/L),40mg/L和80 mg/L氟暴露組。分別在氟暴露45 d和90 d時(shí),對(duì)斑馬魚的生長發(fā)育狀況進(jìn)行記錄,并通過HE染色對(duì)斑馬魚甲狀腺進(jìn)行組織病理學(xué)觀察,用酶聯(lián)免疫ELISA檢測魚體內(nèi)T3和T4激素水平,最后對(duì)斑馬魚頭部和肝臟組織提取總RNA,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測HPT軸相關(guān)基因的表達(dá)。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.對(duì)生長發(fā)育分析結(jié)果顯示,氟暴露45 d時(shí),雌雄斑馬魚體重、增重率、特定增重率及肥滿度均表現(xiàn)為40 mg/L促進(jìn)80 mg/L抑制,體長及增長率均表現(xiàn)為隨著濃度的升高生長抑制作用越大。氟暴露90天時(shí)除雄魚肥滿度外,其他各性別各指標(biāo)均隨著濃度的上升而下降。2.甲狀腺組織病理學(xué)結(jié)果顯示,氟暴露可造成斑馬魚甲狀腺濾泡的病變,包括濾泡腫大、上皮細(xì)胞呈扁平狀、增生和內(nèi)褶,膠質(zhì)萎縮或呈泡沫狀等。且隨著暴露濃度增大和時(shí)間的延長,甲狀腺濾泡的病變?cè)絿?yán)重;肝臟組織病理學(xué)結(jié)果顯示,40 mg/L氟暴露組在45 d時(shí)就發(fā)生了脂肪樣變、血栓等病變,且暴露濃度越高越嚴(yán)重。在氟暴露90d時(shí),雌魚肝臟脂肪樣變、血栓情況加深,雄魚80 mg/L組肝細(xì)胞大量溶解,細(xì)胞核聚集,肝組織嚴(yán)重受到損傷。3.甲狀腺激素T3和T4 ELISA結(jié)果顯示,氟暴露可影響斑馬魚體內(nèi)甲狀腺激素T3和T4的水平及T3/T4的比值,且影響程度隨暴露時(shí)間、濃度及性別不同而不同?傮w上分析,暴露45 d時(shí),氟可提高T3和T4水平,但T3/T4比值降低。氟暴露90 d時(shí),除80mg/L組雌魚T3水平和T3/T4比值降低外,其他各組T3水平和T3/T4比值均升高,但T4水平均降低。4.對(duì)氟暴露后斑馬魚HPT軸CRH、TSH、TG、NIS, TTR、DIO1、DIO2、TRα、TRβ和iUGT1ab等10個(gè)基因的表達(dá)量結(jié)果分析顯示:氟暴露45 d時(shí),雌斑馬魚40 mg/L組除CRH與TRRα外,其他8個(gè)基因表達(dá)均顯著下調(diào),80 mg/L組除TG、NIS、TTR及TRα外,其他6個(gè)基因表達(dá)均顯著下調(diào);雄魚氟暴露45 d時(shí),40mg/L組除CRH, NIS及D1O1外,其他7個(gè)基因表達(dá)均顯著上調(diào),80 mg/L組除UGT1ab與TTR基因外,其他8個(gè)基因表達(dá)均顯著上調(diào)。氟暴露90 d時(shí),雌魚40 mg/L組DIO1、DIO2 mRNA和80 mg/L組TG、DIO1、 DIO2、TRα、TRβ mRNA表達(dá)顯著上調(diào),40 mg/L組TTR、TRα和80 mg/L組UGT1ab mRNA表達(dá)顯著下調(diào),其余都未有顯著變化;雄魚40 mg/L組TSH、TG、DIO1、TTR、TRα和80mg/L TG、DIO1、TRα mRNA表達(dá)均顯著上調(diào),40mg/L組CRH和80mg/L組CRH、DIO2、TTR、UGT1ab mRNA表達(dá)顯著下調(diào)。試驗(yàn)結(jié)果表明,氟暴露可通過影響斑馬魚甲狀腺和肝臟組織形態(tài)、甲狀腺激素水平影響其生長發(fā)育,且隨著暴露濃度的增加及暴露時(shí)間的延長影響逐漸增加。氟對(duì)斑馬魚HPT軸10個(gè)相關(guān)基因的表達(dá)均有影響,且影響的大小與暴露濃度、時(shí)間和性別有關(guān),提示氟可通過影響斑馬魚HPT軸中基因的表達(dá)來干擾機(jī)體內(nèi)甲狀腺激素的含量,進(jìn)而影響機(jī)體的生長發(fā)育。本試驗(yàn)研究結(jié)果為氟影響斑馬魚生長發(fā)育機(jī)制提供基礎(chǔ)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S917.4
【圖文】:

斑馬魚,對(duì)照組,雌魚


圖3-1l#暴露45邋d和90邋d時(shí)斑馬魚T3含量逡逑Fig.3-1邋The邋T3邋conce打tration邋of邋zebrafish邋after邋exposed邋to邋fluoride邋for邋45邋and邋90邋days逡逑酶聯(lián)免疫結(jié)果顯示(圖3-1):雄魚染毒45邋d時(shí)T3含量對(duì)照組<40mg/L組<80mg/L逡逑組,40邋mg/L組與對(duì)照組相比片>0.05,沒有顯著性差異,但80邋mg/L組與對(duì)照組和40邋mg/L逡逑組相比公<0.05,有顯著性差異。染毒90d時(shí),40mg/L組與對(duì)照組相比公>0.05,沒有顯逡逑著性差異;80邋mg/L組與對(duì)照組和40邋mg/L組相比T3含量明顯增多,^<0.05,有顯著性逡逑差異。染毒45邋d化與對(duì)照組相比雌魚40邋mg/L組T3含量明顯升高,統(tǒng)計(jì)分析f邋<0.05,逡逑兩者有顯著性差異;80邋mg/L組T3含量與對(duì)照組相比沒有明顯差異,但與40邋mg/L組相比逡逑有顯著性降低。染毒90邋d時(shí),與對(duì)照組相比雌魚40邋mg/L組和80邋mg/L組T3含量分別增逡逑多和減少

斑馬魚,對(duì)照組,雌魚


圖3-1l#暴露45邋d和90邋d時(shí)斑馬魚T3含量逡逑Fig.3-1邋The邋T3邋conce打tration邋of邋zebrafish邋after邋exposed邋to邋fluoride邋for邋45邋and邋90邋days逡逑酶聯(lián)免疫結(jié)果顯示(圖3-1):雄魚染毒45邋d時(shí)T3含量對(duì)照組<40mg/L組<80mg/L逡逑組,40邋mg/L組與對(duì)照組相比片>0.05,沒有顯著性差異,但80邋mg/L組與對(duì)照組和40邋mg/L逡逑組相比公<0.05,有顯著性差異。染毒90d時(shí),40mg/L組與對(duì)照組相比公>0.05,沒有顯逡逑著性差異;80邋mg/L組與對(duì)照組和40邋mg/L組相比T3含量明顯增多,^<0.05,有顯著性逡逑差異。染毒45邋d化與對(duì)照組相比雌魚40邋mg/L組T3含量明顯升高,統(tǒng)計(jì)分析f邋<0.05,逡逑兩者有顯著性差異;80邋mg/L組T3含量與對(duì)照組相比沒有明顯差異,但與40邋mg/L組相比逡逑有顯著性降低。染毒90邋d時(shí),與對(duì)照組相比雌魚40邋mg/L組和80邋mg/L組T3含量分別增逡逑多和減少

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)會(huì)議論文 前2條

1 于燕妮;官志忠;劉家騮;;慢性氟中毒對(duì)甲狀腺的影響[A];中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)首屆微量元素專題討論會(huì)論文摘要匯編[C];1985年

2 曹謹(jǐn)玲;陳劍杰;王俊東;武向添;李運(yùn)東;謝凌天;;氟在鯉魚組織中的分布及對(duì)鰓的毒性研究[A];2012年中國水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2012年



本文編號(hào):2798512

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