【摘要】：羅非魚(yú)是我國(guó)淡水養(yǎng)殖的重要品種,主要在廣東、海南、廣西、云南及福建等省份養(yǎng)殖。近年來(lái)由于規(guī)�；B(yǎng)殖模式的推廣和養(yǎng)殖環(huán)境惡化,導(dǎo)致病害頻發(fā),其中以無(wú)乳鏈球菌病的危害最大。目前尚無(wú)報(bào)道羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌的途徑及侵染靶器官。開(kāi)展羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后的動(dòng)態(tài)病理學(xué)及免疫酶活性變化研究工作,可以為更深入研究無(wú)乳鏈球菌的致病機(jī)理和防控藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。本研究采用注射、灌胃、浸泡三種方式對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行無(wú)乳鏈球菌(HN016菌株)感染,觀察三種方式感染后病原菌在吉富羅非魚(yú)體內(nèi)的分布規(guī)律及病理變化,同時(shí)研究不同種群羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后血液及肝臟組織中免疫相關(guān)酶的變化規(guī)律。主要結(jié)論如下:(1)采用注射、灌胃、浸泡三種方式對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行人工感染,其中注射和灌胃均出現(xiàn)典型的無(wú)乳鏈球菌病臨床癥狀,注射組的死亡周期最短,感染后12 h出現(xiàn)死魚(yú),感染后24 h出現(xiàn)死亡高峰,死亡率最高,達(dá)到92.5%;灌胃組感染后5 h出現(xiàn)死魚(yú),感染后48 h出現(xiàn)死亡高峰,死亡率為90%;而浸泡組感染后僅出現(xiàn)輕微發(fā)病癥狀,沒(méi)有出現(xiàn)死魚(yú)。(2)在吉富羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后體內(nèi)病原菌分離方面,注射組和灌胃組感染后2h在脾臟、肝臟、前腎、胃、腮、皮膚和肌肉組織中均可分離出病原菌,感染后5h在兩組的腦組織中均可分離出病原菌,感染后8h兩組均已表現(xiàn)出明顯的發(fā)病癥狀,此時(shí)體內(nèi)各組織的病原菌濃度達(dá)到峰值;而浸泡組感染后8 h才在體內(nèi)各組織中分離出病原菌,但它們的濃度均低于相同時(shí)期的注射組和灌胃組。(3)對(duì)吉富羅非魚(yú)進(jìn)行注射、灌胃、浸泡三種方式感染無(wú)乳鏈球菌,取感染后2 h、5 h、8 h、12 h、24 h的鰓、腸、脾臟、肝臟組織進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法(H.E染色法)染色及免疫組織化學(xué)定位。H.E染色結(jié)果顯示:三種方式在感染后早期(2-5 h)鰓、肝臟、脾臟、腸組織均已經(jīng)出現(xiàn)明顯病變,其中鰓表現(xiàn)為基部上皮細(xì)胞增生及鰓小片壞死,脾臟為含鐵血黃素增多、巨噬細(xì)胞彌漫性浸潤(rùn)以及血管變細(xì),肝臟為出現(xiàn)空泡變性、毛細(xì)血管破裂,腸為腸絨毛斷裂、黏膜下層細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞;三種方式的病變程度依次為注射組灌胃組浸泡組。免疫組化定位結(jié)果顯示:灌胃感染后病原菌強(qiáng)陽(yáng)性信號(hào)先在腸組織出現(xiàn),注射組為脾臟組織,浸泡組為鰓組織。(4)采用腹腔注射方式對(duì)吉富羅非魚(yú)抗病選育系、百桂品系吉富羅非魚(yú)及奧尼羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌(HN016菌株),分析感染后三種羅非魚(yú)血液及肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、總抗氧化能力(T-AOC)等免疫相關(guān)酶活性變化。結(jié)果顯示:三個(gè)不同種群羅非魚(yú)肝臟組織ACP、AKP、LZM、SOD、T-AOC酶活力均呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì),而CAT酶活力呈現(xiàn)先下降再升高的趨勢(shì);而感染24h后CAT、ACP、AKP、LZM活力在三種羅非魚(yú)血液中均表現(xiàn)出上升的趨勢(shì)。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：S943
【圖文】：

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文邐吉富羅非魚(yú)您染無(wú)乳鏈球菌后的病理觀蔡及免疫酶ｉ舌性變化研究逡逑ｍｉ逡逑圖２－１發(fā)病吉富羅非魚(yú)體表癥狀逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋ＧＩＦＴ邋ｔｉｌａｐｉａ邋ｄｉｓｅａｓｅ邋ｉｎ邋ｓｙｍｐｔｏｍ邋ｉｎ邋ｓｕｒｆａｃｅ逡逑２．３．２病原菌鑒定及分離逡逑從出現(xiàn)明顯發(fā)病癥狀的吉富羅非魚(yú)組織接種到雞血平板上恒溫培養(yǎng)１０邋ｈ后在顯微逡逑鏡下便可觀察到呈球狀或卵圓形的無(wú)乳鏈球菌，其直徑約為０．６－１．０）Ｌｉｍ邋（見(jiàn)圖２－２）。在逡逑革蘭氏染色處理后鏡檢可觀察到菌體為鏈狀或成對(duì)排列的革蘭氏陽(yáng)性球菌（見(jiàn)圖２－３）。逡逑W逡逑ＨＰ逡逑圖２－２雞血平板上分離出的病原菌逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｔｈｅ邋ｐａｔｈｏｇｅｎｓ邋ｏｎ邋ｂｌｏｏｄ邋ａｇａｒ邋ｐｌａｔｅ逡逑ｌｌ逡逑

２．３．２病原菌鑒定及分離逡逑從出現(xiàn)明顯發(fā)病癥狀的吉富羅非魚(yú)組織接種到雞血平板上恒溫培養(yǎng)１０邋ｈ后在顯微逡逑鏡下便可觀察到呈球狀或卵圓形的無(wú)乳鏈球菌，其直徑約為０．６－１．０）Ｌｉｍ邋（見(jiàn)圖２－２）。在逡逑革蘭氏染色處理后鏡檢可觀察到菌體為鏈狀或成對(duì)排列的革蘭氏陽(yáng)性球菌（見(jiàn)圖２－３）。逡逑W逡逑ＨＰ逡逑圖２－２雞血平板上分離出的病原菌逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｔｈｅ邋ｐａｔｈｏｇｅｎｓ邋ｏｎ邋ｂｌｏｏｄ邋ａｇａｒ邋ｐｌａｔｅ逡逑ｌｌ逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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4 祝t熈

本文編號(hào)：2720540