【摘要】：團頭魴是我國主要的養(yǎng)殖品種之一,深受消費者喜愛。然而,其不耐低氧,易浮頭,養(yǎng)殖生產(chǎn)的進一步發(fā)展急需具有耐低氧性狀的優(yōu)良品種。本研究以團頭魴耐低氧選育系為材料,進行了1、2齡階段生長性能分析,研究了饑餓脅迫下對其鰓組織形態(tài)、抗氧化酶和ATP酶影響,并利用Egln2基因?qū)ζ溥M行耐低氧分子標(biāo)記篩選。本研究包括以下三方面:(一)為評估團頭魴耐低氧F_4代的選育效果,在上海市浦東和青浦2個試驗點采用剪鰭標(biāo)記和同池比較法對團頭魴耐低氧F_4代(選育組)和“浦江1號”(對照組)1、2齡階段的體質(zhì)量絕對增長率進行了比較。結(jié)果顯示:浦東試驗點選育組1、2齡階段的體質(zhì)量絕對增長率比對照組分別高24.7%和20.9%,青浦試驗點選育組1、2齡階段的體質(zhì)量絕對增長率比對照組分別快24.4%和20.9%。結(jié)果表明,團頭魴耐低氧F_4代(選育組)1、2齡魚的生長速度優(yōu)于“浦江1號”(對照組),團頭魴耐低氧F_4代在經(jīng)過系統(tǒng)選育后,其生長特性和養(yǎng)殖效果獲得顯著提高。試驗結(jié)果對于團頭魴耐低氧新品系的選育及推廣具有參考意義。(二)為了研究不同饑餓時間(0、5、10、15、20、25和30d)對團頭魴耐低氧F_4代幼魚鰓組織的影響,在溫度(25±1.0)℃,溶解氧(7.0±0.5)mg·L~(-1)條件下,以體質(zhì)量為(30.5±2.6)g的團頭魴耐低氧F_4代幼魚為研究對象,利用組織切片、掃描電鏡技術(shù)和分光光度計法研究了饑餓脅迫對其鰓組織結(jié)構(gòu)、Na~+/K~+-ATP酶和抗氧化酶的影響。酶活性結(jié)果顯示:隨著饑餓時間的延長,團頭魴耐低氧F_4代鰓組織的Na~+/K~+-ATP、SOD和CAT酶活性逐漸降低(P0.05)。恢復(fù)投喂7d后基本恢復(fù)到正常水平。形態(tài)學(xué)觀察顯示:隨著饑餓時間延長,團頭魴耐低氧F_4代鰓小片平均伸出長度增加(P0.05),層間基質(zhì)的厚度減小(P0.05),這種變化導(dǎo)致鰓小片呼吸面積增加和層間基質(zhì)體積減小(P0.05)�；謴�(fù)投喂7d后,基本恢復(fù)到正常投喂時的形態(tài)。由此可見,饑餓脅迫情況下,團頭魴耐低氧F_4代幼魚抗氧化系統(tǒng)受到嚴(yán)重干擾,魚體主動調(diào)整鰓小片呼吸面積適應(yīng)饑餓脅迫。(三)從團頭魴耐低氧轉(zhuǎn)錄組獲得的10個低氧差異表達(dá)基因中篩選SNP位點,發(fā)現(xiàn)在Egln2基因上存在2個完全連鎖的多態(tài)SNP位點(PIC0.5),即T~(397)C~(397)和T~(715)G~(715),可組成單倍型Ⅰ(C~(397)G~(715))和單倍型Ⅱ(T~(397)T~(715))2種單倍型。單倍型Ⅰ在對照群體(團頭魴“浦江1號”)中出現(xiàn)的頻率為83.5%,在團頭魴耐低氧選育F_5代中的出現(xiàn)頻率為27.5%,差異極顯著(P0.01);單倍型Ⅱ在對照群體中出現(xiàn)的頻率為16.5%,在團頭魴耐低氧選育F_5代中的出現(xiàn)頻率為72.5%,差異極顯著(P0.01)。單倍型Ⅰ和Ⅱ可組合成3種雙倍型,即雙倍Ⅰ型(C~(397)C~(397)G~(715)G~(715))、雙倍Ⅱ型(T~(397)T~(397)T~(715)T~(715))和雙倍Ⅲ型(T~(397)C~(397)T~(715)G~(715))。雙倍Ⅱ型個體體型失衡的關(guān)鍵溶氧值(LOE_(crit))顯著低于雙倍型I個體(P0.01),其中雙倍Ⅱ型在低氧性狀關(guān)聯(lián)酶(CAT酶、SOD酶及Na~+/K~+-ATP酶)活力上也顯著高于其他組合(P0.05),表明雙倍Ⅱ型個體耐低氧能力顯著高于雙倍型I個體。在低氧脅迫下,雙倍Ⅱ型個體的鰓小片伸出長度、鰓小片面積均顯著小于雙倍Ⅰ型個體(P0.01),而相鄰兩鰓小片層間基質(zhì)(ILCM)的厚度和體積則增加,表明雙倍Ⅱ型個體不需要暴露太多的呼吸面積就可以應(yīng)對低氧脅迫,表現(xiàn)出明顯的耐低氧能力。同時,雙倍Ⅱ型個體紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白(Hb)濃度在低氧脅迫條件下明顯高于雙倍Ⅰ型個體(P0.01)。這些結(jié)果表明,Egln2基因的雙倍Ⅱ型與耐低氧性狀密切相關(guān),可作為團頭魴耐低氧新品系的分子特征標(biāo)記,用于后續(xù)的分子輔助育種。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S917.4
【圖文】：

圖 2-1 饑餓和恢復(fù)投喂?fàn)顟B(tài)下團頭魴耐低氧 F4代鰓組織的顯微結(jié)構(gòu)Fig.2-1. Light microscope (LM) micrographs of the gill lamellae of hypoxia-tolerant F4generationof blunt snout bream at the end of hunger and re-feeding.圖中 1-8 分別表示團頭魴耐低氧 F4代鰓組織在饑餓脅迫 0、5、10、15、20、25 和 30d 以及恢復(fù)投喂 7d 時的形態(tài)變化。其中，黑色箭頭表示鰓小片，紅色箭頭表示相鄰兩鰓小片 ILCM，H.E染色。Picture series starts with 0 days of hunger (1),5-30 days of hunger (2-7)and 7 days of recovery(8).Black arrows is lamellae,Red arrows reveal is ILCM. HE Staining.

圖 2-1 饑餓和恢復(fù)投喂?fàn)顟B(tài)下團頭魴耐低氧 F4代鰓組織的顯微結(jié)構(gòu)Fig.2-1. Light microscope (LM) micrographs of the gill lamellae of hypoxia-tolerant F4generationof blunt snout bream at the end of hunger and re-feeding.圖中 1-8 分別表示團頭魴耐低氧 F4代鰓組織在饑餓脅迫 0、5、10、15、20、25 和 30d 以及恢復(fù)投喂 7d 時的形態(tài)變化。其中，黑色箭頭表示鰓小片，紅色箭頭表示相鄰兩鰓小片 ILCM，H.E染色。Picture series starts with 0 days of hunger (1),5-30 days of hunger (2-7)and 7 days of recovery(8).Black arrows is lamellae,Red arrows reveal is ILCM. HE Staining.

【參考文獻】

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本文編號：2713110