為了滿足隨世界人口增長而不斷增長的糧食需求,人們通過大量施用化肥來補充土壤肥力以保證糧食儲量與產(chǎn)量。但長期過量施用化肥不僅使農(nóng)產(chǎn)品的品質下降,更嚴重的是可能會產(chǎn)生一系列環(huán)境污染問題。因此微生物菌劑這種環(huán)境友好型肥料逐漸進入人們視野。20世紀50年代,科學家們發(fā)現(xiàn)一部分植物根際促生菌(PGPR)可以通過合成IAA(吲哚乙酸,植物生長素)來影響作物的生長,被稱作IAA產(chǎn)生菌,BacillusSubtilis168更是作為IAA產(chǎn)生菌的模式菌株被大量使用。生物質炭制備過程簡單來源廣泛,同時能提供養(yǎng)分以及具有疏松多孔結構有利于促生菌的定殖。對于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)來講,生物質炭-促生菌菌劑既能達到促進植物生長的目的,又是經(jīng)濟、高效、高產(chǎn)的選擇。但目前關于IAA生物合成關鍵基因或關鍵酶的鑒定及性質研究較少,并且正是由于生物質炭來源廣泛,所以那一種生物質炭才是IAA產(chǎn)生菌較好的載體以及用該種生物質炭制備的微生物菌劑對水稻的生長到底有何種促生作用,目前還不甚了解。因此本研究從設計IAA產(chǎn)生菌功能基因引物,準確定量土壤中IAA產(chǎn)生菌功能基因開始;再篩選適宜的生物質炭材料作為載體,制備生物質炭-促生菌菌劑,最后研究其...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１：高粱種子（ａ）對照，未接種促生菌；（ｂ）接種＾ｆｚｏｓ＾Ｗ／＿Ｚ？ｎｘ＾７ｍｓｅＳＭ野生??株；（ｃ）接種敲除ＩＡＡ合成功能基因（由ｄＣ）突變株，培養(yǎng)１４天后根部生長情況圖

一直到２００７年，在Ｓｐａｅｐｅｎ的文章中呈現(xiàn)出了細菌合成ＩＡＡ的５條主要路徑圖。??并指出細菌合成ＩＡＡ的通路與植物合成ＩＡＡ通路有很大的相似程度。這５條主??要路徑被延用至今，各條通路中的關鍵步驟及相關功能基因不斷被完善如圖１－２??所示，然而雖然在大多數(shù)細菌中都檢測到可以產(chǎn)....

圖１－２如ｃ／Ｕｚ／ｔｏｔｅ?１６８中ＩＡＡ生物合成通路圖??Ｆｉｇ．?１－２?ＩＡＡ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｐａｔｈｗａｙ?ｉｎ?Ｂａｃｉｌｌｕｓ?Ｓｕｂｔｉｌｉｓ?１６８（ｒｅｃｏｍｐｏｓｅｄ?ｂｙ?Ｓｐａｅｐｅｎ?ｅｔ?ａｌ．，??２０１１；ｓｈａｏ?２０１５；ｚｈａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１５）??

．－：＾－??圖１－１：高粱種子（ａ）對照，未接種促生菌；（ｂ）接種＾ｆｚｏｓ＾Ｗ／＿Ｚ？ｎｘ＾７ｍｓｅＳＭ野生??株；（ｃ）接種敲除ＩＡＡ合成功能基因（由ｄＣ）突變株，培養(yǎng)１４天后根部生長情況圖。??Ｆｉｇ．ｌ－ｌ：Ｔｈｅ?ｓｏｒｇｈｕｍ?ｓｅｅｄ（ａ）ｃｏｎｔｒｏｌ，ｄｏｎ５....

圖2-IiaaM基因序列NCBI搜索檢索結果

浙江大學碩士學位論文?第二章ＩＡＡ產(chǎn)生菌相關功能基因引物的設計??２．２．２功能基因原始序列的收集??功能基因原始序列的收集均來自于ＮＣＢＩ網(wǎng)站（Ｎａｔｉｏｎａｌ?Ｃｅｎｔｅｒ?ｆｏｒ??Ｂｉｏｔｅｃｎｏｌｏｇｙ?Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ），根據(jù)基因名稱進行搜索（圖２－１），之后將....

圖２－３：?（ａ）?２０１６年提取水稻根際土壤微生物ＤＮＡ，用６組引物進行擴增之后的電泳??結果成像圖；（ｂ）?２０１７年提取水稻根際土壤微生物ＤＮＡ，用６組引物進行擴增之后的電泳??給結果成像圖；（ｃ）用第４組引物，進行ＰＣＲ程序優(yōu)化后的電泳結果成像圖；（ｄ）切膠純??化ＰＣＲ?（遐火溫度５６°Ｃ，?２５個循環(huán)）電泳結果成?

帶切肢回收的核酸序列重新擴增后確沒有擴增出上方的條帶。這一現(xiàn)象有可能是??由于引物的非特異性結合而造成的結果，即在上方較長的ＤＮＡ片段中，有兩個??相似的前引物或后引物結合位點（圖２－３ｅ），引物在結合時除了結合在較長ＤＮＡ??片段的首尾還結合在了其中間某一個結合位點，造成一個短....

本文編號：4040997