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STTM-OsmiRNA載體構(gòu)建及水稻遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2024-05-08 20:20
  水稻是全球主要的糧食作物之一,提高水稻的產(chǎn)量和品質(zhì),不僅對(duì)于國(guó)家糧食安全具有重要的意義,而且也是人們健康的需要。水稻具有極其廣泛的適應(yīng)性,在我國(guó)東北到西南的廣大地區(qū)均有種植,這表明水稻對(duì)環(huán)境具有廣泛的適應(yīng)性。水稻籽粒產(chǎn)量屬于復(fù)雜的數(shù)量性狀,不僅決定于產(chǎn)量性狀本身,而且植株的生長(zhǎng)發(fā)育也對(duì)籽粒產(chǎn)量具有重要的影響。雖然一些調(diào)控水稻籽粒和植株生長(zhǎng)發(fā)育的基因被分離和克隆,在一定程度上解析了水稻產(chǎn)量形成的分子機(jī)制,但microRNA(miRNA)調(diào)控水稻生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量形成的研究較少。miRNA屬于小分子非編碼RNA,在植物生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)階段及產(chǎn)量形成均具有重要的調(diào)控作用。水稻MIR319家族包含兩個(gè)成員,相關(guān)研究表明該miRNA家族不但參與了植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的生物與非生物脅迫應(yīng)答,而且與植物的育性相關(guān)。本研究采用短片段靶基因模擬技術(shù)(STTM)敲除OsmiR319家族,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻愈傷組織的遺傳轉(zhuǎn)化進(jìn)行水稻轉(zhuǎn)基因,進(jìn)而篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因突變體,并對(duì)OsmiR319的功能進(jìn)行初步分析。本研究的主要研究結(jié)果:(1)本研究采用引物擴(kuò)增的方法構(gòu)建STTM319,STTM390,STTM397,STT...

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1miRbase中miRNA前體及成熟序列

圖1miRbase中miRNA前體及成熟序列

中共發(fā)現(xiàn)了16個(gè)miRNA,依次分別命名為miR156至miR171,豐富了植物基因的研究領(lǐng)域。目前,已在不同的物種發(fā)現(xiàn)了大量的miRNA,并且在miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)釋版本中,都會(huì)增加大量的miRNA前體、成熟序列等(圖1),在miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)最新ase....


圖2植物miRNA轉(zhuǎn)錄、翻譯以及作用機(jī)制[21]

圖2植物miRNA轉(zhuǎn)錄、翻譯以及作用機(jī)制[21]

物合成IR基因轉(zhuǎn)錄并經(jīng)過(guò)一系列的剪切加工而成的小分子RNAAPolymeraseⅡ,PolⅡ)以及轉(zhuǎn)錄因子的共同作用下,轉(zhuǎn)3′端PloyA尾巴的MIRNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄本(Primary-miRNDicer-LIke1)[12]蛋白的剪切加工作,生成帶有莖環(huán)結(jié)pre....


圖3水稻miR319家族Fig.3Thefamilyofosa-miR319

圖3水稻miR319家族Fig.3Thefamilyofosa-miR319

可以分別加工為3個(gè)成熟的miR319(a-c)。在miRBase20中,水稻miR31個(gè)miRNA前體位于位于1號(hào)染色體,分別是MIR319a和MIR319b,可以分miR319(a,b)。而在miRBase21中,Osa-miR319的2....


圖3STTM319結(jié)構(gòu)及亞克隆載體示意圖

圖3STTM319結(jié)構(gòu)及亞克隆載體示意圖

14圖3STTM319結(jié)構(gòu)及亞克隆載體示意圖[134]Fig3.STTMPCRconstructionstrategyandtheSTTMstructureTTM319低表達(dá)miR319載體引物設(shè)計(jì)究根據(jù)Tang等[134]構(gòu)建STTM載體方法....



本文編號(hào):3967774

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