玉米產(chǎn)量是一個(gè)極其復(fù)雜的數(shù)量性狀,不僅受遺傳因素的調(diào)控,受環(huán)境因素的影響也十分明顯。實(shí)際田間生產(chǎn)中,玉米的單穗重量、穗長(zhǎng)度、百粒重、粒寬、粒長(zhǎng)等遺傳性狀決定了玉米產(chǎn)量。ZmTE1基因?qū)儆趍ei2-like家族,對(duì)玉米早期葉片的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的調(diào)節(jié)作用,其玉米突變體表現(xiàn)出明顯的植株矮小,節(jié)間距離縮短,葉片增多。本實(shí)驗(yàn)室在轉(zhuǎn)基因水稻中過(guò)表達(dá)ZmTE1的同源基因OsTEL發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因水稻的千粒重、粒寬、粒長(zhǎng)等產(chǎn)量性狀明顯變大,因此我們推測(cè)ZmTE1可能具有提高玉米產(chǎn)量的潛能。本文研究的轉(zhuǎn)基因玉米AM16利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)入抗草甘膦基因G10evo和來(lái)源于玉米的 ZmTE1 基因的 T-DNA(載體為 1300-p35S-pUbi-G10evo-pAu-ZmTE1),獲得不同的轉(zhuǎn)基因玉米事件,選取其中生長(zhǎng)發(fā)育良好,產(chǎn)量性狀有明顯變化的轉(zhuǎn)化事件AM16,對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)特征和農(nóng)藝性狀的研究和統(tǒng)計(jì)分析。轉(zhuǎn)基因玉米AM16的分子特征研究結(jié)果表明:PCR擴(kuò)增表明轉(zhuǎn)基因玉米AM16含有目的基因G10evo基因和ZmTE1基因;以G10evo基因?yàn)樘结樀腟outhern blot檢測(cè)顯示AM16中插入...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
1. 文獻(xiàn)綜述
    1.1 轉(zhuǎn)基因玉米研究進(jìn)展
        1.1.1 引言
        1.1.2 轉(zhuǎn)基因抗草甘膦( Glyphosate )玉米研究進(jìn)展
            1.1.2.1 草甘膦及其在雜草防治中的應(yīng)用
            1.1.2.2 草甘膦的雜草防治的作用機(jī)理
            1.1.2.3 作物抗草甘膦策略
            1.1.2.4 轉(zhuǎn)EPSPS基因抗除草劑玉米研究現(xiàn)狀
        1.1.3 玉米產(chǎn)量相關(guān)性狀
            1.1.3.1 株高
            1.1.3.2 玉米穗和顆粒
    1.2 ZmTE1家族基因研究進(jìn)展
        1.2.1 TE1基因的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 TE1基因的表達(dá)
    1.3 本研究的目的和意義
2. 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 菌株和質(zhì)粒載體
    2.3 主要工具酶
    2.4 常用試劑、核酸、蛋白分子質(zhì)量及試劑盒
    2.5 培養(yǎng)基的配制
    2.6 常用生化試劑和溶液
    2.7 儀器
    2.8 實(shí)驗(yàn)方法
        2.8.1 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法
            2.8.1.1 基因組DNA提取
            2.8.1.2 PCR技術(shù)
            2.8.1.3 凝膠回收
            2.8.1.4 高保真酶擴(kuò)增產(chǎn)物加A反應(yīng)
            2.8.1.5 連接反應(yīng)
            2.8.1.6 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化
            2.8.1.7 挑單克隆細(xì)胞
            2.8.1.8 質(zhì)粒微量提取
            2.8.1.9 酶切反應(yīng)
            2.8.1.10 大腸桿菌TG1感受態(tài)細(xì)胞的制備
            2.8.1.11 Genome Walker
            2.8.1.12 Western blot
            2.8.1.13 Southern blot
            2.8.1.14 EPSPS速測(cè)
            2.8.1.15 總RNA提取、純化和cDNA第一鏈的合成
            2.8.1.16 qRT PCR
        2.8.2 農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)方法
            2.8.2.1 農(nóng)藝性狀統(tǒng)計(jì)
            2.8.2.2 產(chǎn)量性狀統(tǒng)計(jì)
        2.8.3 統(tǒng)計(jì)方法
    2.9 溫室轉(zhuǎn)基因玉米植株杭性測(cè)定
3. 結(jié)果與分析
    3.1 轉(zhuǎn)基因玉米PCR鑒定
    3.2 T -DNA插入位點(diǎn)確定
    3.3 轉(zhuǎn)基因玉米拷貝數(shù)鑒定
    3.4 轉(zhuǎn)基因玉米ZmTE1的相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平分析
    3.5 轉(zhuǎn)基因玉米G10evo蛋白表達(dá)分析
    3.6 轉(zhuǎn)基因玉米表型差異分析
    3.7 轉(zhuǎn)基因玉米農(nóng)藝性狀統(tǒng)計(jì)分析
        3.7.1 葉片數(shù)量和株高
        3.7.2 節(jié)間距和節(jié)間數(shù)量
        3.7.3 相鄰葉間數(shù)量
        3.7.4 葉間距離
    3.8 轉(zhuǎn)基因玉米產(chǎn)量性狀分析
4 總結(jié)與討論
    4.1 總討論
    4.2 創(chuàng)新之處
    4.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    附錄A 常用培養(yǎng)基配方
    附錄B 常用生化試劑、溶液
        常用生化試劑
        溶液
    附錄C 常用儀器



本文編號(hào)：3852391