小麥?zhǔn)鞘澜缛蠹Z食作物之一,也是分布最廣、播種面積和產(chǎn)量最大的谷物。隨著功能性食品市場(chǎng)需求量的快速增加,我國(guó)小麥育種的重點(diǎn)逐步由產(chǎn)量育種轉(zhuǎn)向品質(zhì)育種。HMW-GS是麥谷蛋白的主要組成成分,對(duì)小麥的加工品質(zhì)具有決定性作用。近年來,在山西省乃至全國(guó)的小麥品質(zhì)育種中,無論是在地方品種還是育成品種中,各種優(yōu)質(zhì)HMW-GS的變異類型和各自的占比有所提高,但小麥的品質(zhì)的提升總體上并未發(fā)生大的變化,主要原因是缺乏優(yōu)質(zhì)的育種材料。本研究改良了傳統(tǒng)小麥基因組DNA提取方法,改進(jìn)了小麥高分子量谷蛋白優(yōu)質(zhì)亞基的分子檢測(cè)技術(shù),并對(duì)相關(guān)小麥材料的HMW-GS進(jìn)行了分析、檢測(cè)與比較。研究結(jié)果為小麥的品質(zhì)育種提供了依據(jù)。主要結(jié)果如下:⑴以10份小麥種子為材料,在傳統(tǒng)CTAB法的基礎(chǔ)上,結(jié)合磁珠方法,建立了一種操作簡(jiǎn)便、成本低廉、適合小麥HMW-GS檢測(cè)的高通量DNA提取方法;應(yīng)用紫外分光光度計(jì)、瓊脂糖凝膠電泳和AS-PCR等方法驗(yàn)證了DNA的產(chǎn)率和質(zhì)量。該方法所提取的小麥基因組DNA的質(zhì)量和產(chǎn)率穩(wěn)定,能夠滿足小麥HMW-GS分子檢測(cè)的要求。⑵分別應(yīng)用SDS-PAGE方法和AS-PCR方法檢測(cè)了40個(gè)小麥品種的HMW... 

【文章來源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HMW-GS各位點(diǎn)編碼的帶型

糖凝膠電泳結(jié)果。從圖 2.1 和圖 2.2 可以看出，傳統(tǒng) CTAB 法所提取的 DNA 膠孔較亮，條帶下方有許多小片段拖尾，條帶不整齊；改良 CTAB 法所提取的 DNA 電泳條帶整齊，膠孔與條帶下方干凈、清晰。說明改良 CTAB 法提取的 DNA 較為純凈并且穩(wěn)定性比較好。圖 2.1 應(yīng)用傳統(tǒng) CTAB 法提取 DNA 樣品的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果（1～10）

小麥 HMW-GS 分子檢測(cè)中 DNA 提取方法的改良2.2.2 DNA 質(zhì)量表 2.2 為紫外分光光度計(jì)檢測(cè)的 DNA 的 A260/280 和 A260/230 的值。從表 2.可以看出：⑴傳統(tǒng) CTAB 法和改良 CTAB 法所提取 DNA 的 A260/280 的平均值均在1.8～2.0 之間，但改良 CTAB 法的值更接近于 1.8，標(biāo)準(zhǔn)差也較小，說明改良 CTA法所提取的DNA較為純凈。⑵傳統(tǒng)CTAB法和改良CTAB法所提取DNA的A260/23的平均值均大于 1.6，但改良 CTAB 法更接近于 2.0～2.3，同樣說明改良 CTAB 法所提取的 DNA 雜質(zhì)較少。圖 2.1、圖 2.2 分別為傳統(tǒng) CTAB 法與改良 CTAB 法所提取的 DNA 樣品的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果。從圖 2.1 和圖 2.2 可以看出，傳統(tǒng) CTAB 法所提取的 DNA 膠孔較亮，條帶下方有許多小片段拖尾，條帶不整齊；改良 CTAB 法所提取的 DNA 電泳條帶整齊，膠孔與條帶下方干凈、清晰。說明改良 CTAB 法提取的 DNA 較為純凈并且穩(wěn)定性比較好。


本文編號(hào)：3376454