茶樹內(nèi)生草螺菌WTOOC（Herbaspirillum sp.WT00C）是本實驗室從野生茶樹中分離獲得一株茶樹特異性內(nèi)生革蘭氏陰性細(xì)菌。它的微生物學(xué)性質(zhì)、生理生化性質(zhì)、分類鑒定以及茶樹促生作用都進行過較深入的研究,其基因組也已解序。基因組分析發(fā)現(xiàn)該內(nèi)生菌擁有完整的硒代謝途徑。為了證實茶樹內(nèi)生草螺菌WT00C的硒酸鹽還原能力和探索是否可利用該細(xì)菌促進茶葉富硒,本項目就草螺菌WT00C的硒酸鹽還原、硒還原的最佳條件、還原硒產(chǎn)物的性質(zhì)以及改善茶樹硒富集等方面展開研究。經(jīng)過三年的努力,獲得如下主要結(jié)論:1.茶樹內(nèi)生草螺菌WT00C具有較強的硒酸鹽耐受性。當(dāng)草螺菌WT00C在含硒酸鈉的LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,細(xì)菌生長表現(xiàn)抑制現(xiàn)象且抑制作用隨著硒酸鹽濃度的升高而增強。當(dāng)培養(yǎng)基中的硒酸鹽濃度達到200 mM時,12小時培養(yǎng)期間內(nèi)細(xì)菌生長受到嚴(yán)重抑制,但12小時后細(xì)菌細(xì)胞恢復(fù)生長并且在48小時時接近不含硒酸鹽對照組的細(xì)菌生長水平�；罹鷻z測發(fā)現(xiàn)12小時培養(yǎng)期間內(nèi)的細(xì)菌仍然存活,表現(xiàn)出較強的硒酸鹽耐受性。通過條件優(yōu)化發(fā)現(xiàn),在溫度為37℃和轉(zhuǎn)速為200rpm條件下,草螺菌WT00C還原硒酸鈉最佳。2.茶樹內(nèi)生... 

【文章來源】：湖北大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

我國各地土壤硒含量Cmglkg)Dz}Figurel.2Soilselenium‘lioninChina(mg/kg)

于含１００?ｍＭ硒酸鈉的ＬＢ液體培養(yǎng)基中。以２００?ｒｐｍ的轉(zhuǎn)速３７°Ｃ恒溫培養(yǎng)２４�。埃簟�??將菌液轉(zhuǎn)移至離心管中，以１００?ｘｇ轉(zhuǎn)速離心１０分鐘，收集上清。６０８０?ｘｇ轉(zhuǎn)速離心１〇??分鐘，收集沉淀，用無菌的１?ＭＰＢＳ緩沖液重懸沉淀。按圖２．１所示方法，用無菌的５０％??和７０％蔗糖溶液（各２?ｍＬ），在無菌的離心管中制得密度梯度。將ｌｍＬ重懸液轉(zhuǎn)移至??蔗糖溶液上層，１５０００?ｘｇ離心２０分鐘。小心吸取５０％蔗糖和７０％蔗糖溶液中間的紅色??區(qū)帶，用無菌的１ＭＰＢＳ緩沖液重懸沉淀。轉(zhuǎn)移至新的蔗糖密度梯度溶液上，再離心一??次。用無菌的１?ＭＰＢＳ緩沖液清洗沉淀，６０８０?ｘｇ離心１〇分鐘收集沉淀，重復(fù)兩次。得??到純化后的硒納米顆粒懸液。??２５??

培養(yǎng)草螺菌ＷＴＯＯＣ培養(yǎng)基的紅色最深，草螺菌Ｏｓ３４次之，大腸桿菌ＢＬ２１紅??色最淺。說明草螺菌ＷＴＯＯＣ比草螺菌Ｏｓ３４和大腸桿菌ＢＬ２１能更有效地還原硒酸鹽（參??見圖２．３）。??３１??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國主要農(nóng)耕區(qū)土壤硒含量分布特征、來源及影響因素[J]. 王銳,余濤,曾慶良,楊忠芳.  生物技術(shù)進展. 2017(05)
[2]陜西紫陽富硒核心區(qū)周邊土壤中硒的賦存形態(tài)分析[J]. 王瑋祺,吳思源,王小垚,付榮,曹冉冉,鄭紅.  環(huán)境化學(xué). 2014(11)
[3]兩株茶樹內(nèi)生草螺菌的微生物學(xué)特性[J]. 王婷,楊升,陳亞雪,胡玲玲,屠琴,張麗,劉雪芹,王行國.  微生物學(xué)報. 2014(04)
[4]北京市平原區(qū)土壤中硒的含量和分布[J]. 郭莉,楊忠芳,阮起和,胡省英,周亞男,馮輝.  現(xiàn)代地質(zhì). 2012(05)
[5]食物中硒的生物功能及測定分析研究[J]. 林文業(yè),鄧衛(wèi)利,黃文琦,陳桂鸞,韋小燁,羅艷,黃一帆.  大眾科技. 2011(04)
[6]硒和GPx-1過表達在保護哺乳動物細(xì)胞免受紫外線誘導(dǎo)的DNA損傷中的作用[J]. 劉凱,康龍麗.  國外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊). 2010 (03)
[7]恩施硒中毒區(qū)土壤高硒的成因:自然硒的證據(jù)[J]. 朱建明,左維,秦海波,馮志剛,鄭寶山,蘇宏燦.  礦物學(xué)報. 2008(04)
[8]殼寡糖-硒納米植物營養(yǎng)調(diào)節(jié)劑的研制與應(yīng)用[J]. 童春義,肖蘇堯,王貝,蕭小鵑,鄭元青,薛昌剛,汪啟明,劉選明.  湖南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2008(10)
[9]信陽富硒茶達標(biāo)綜合技術(shù)研究[J]. 馬元鳳.  河南農(nóng)業(yè). 2008(07)
[10]無定形硒納米粒子的交聯(lián)酶模板法合成及其在生物傳感器中的應(yīng)用[J]. 張娟,張勝義,徐靜娟,陳洪淵.  無機化學(xué)學(xué)報. 2006(03)



本文編號：3072475