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黃芪種子脂肪酸在幼苗形態(tài)建成中的代謝研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-04 04:39
【摘要】:黃苗(Astragalus membranaceus)是一種傳統(tǒng)中藥材,其藥用歷史已有2000多年。黃芪從種子萌發(fā)到幼苗形態(tài)建成的過程是其完成從種子供養(yǎng)到光合作用供養(yǎng)轉(zhuǎn)變的過程,也是其生活史中面對(duì)環(huán)境變化表現(xiàn)較為脆弱的階段。本文以黃芪種子為材料,利用GC-MS研究了種子萌發(fā)以及形態(tài)建成過程中包括脂肪酸在內(nèi)的貯藏物質(zhì)代謝變化,同時(shí)利用UPLC-MS還研究了形態(tài)建成過程中黃芪幼苗黃酮和皂苷等活性物質(zhì)含量變化,以期為深入了解黃芪種子萌發(fā)和形態(tài)建成的養(yǎng)分代謝規(guī)律提供參考。得到如下主要結(jié)果:在黃芪種子萌發(fā)及后生長過程,發(fā)現(xiàn)子葉貯藏的淀粉被優(yōu)先利用,而脂質(zhì)則主要在萌發(fā)后生長階段被動(dòng)員。脂肪酸組分分析結(jié)果顯示,子葉中主要飽和及單不飽和脂肪酸所占比例降低,多不飽和脂肪酸則與它們相反,但總體變化幅度都較小。外源脫落酸和茉莉酸甲酯處理均抑制了黃芪種子萌發(fā)及后生長。同時(shí),脫落酸和茉莉酸甲酯抑制了貯藏物質(zhì)動(dòng)員,降低了其利用效率,還引發(fā)了早期貯藏物質(zhì)碳的高消耗,阻止了子葉脂肪酸的去飽和及碳鏈延長。在黃芪幼苗形態(tài)建成過程,發(fā)現(xiàn)子葉脂肪酸組分發(fā)生了較大幅度的變化。與暗形態(tài)建成過程相比,光照條件下子葉中α-C18:3比例增加了 28.62%,而C18:1則降低了30.96%。同時(shí),子葉脂肪酸去飽和酶基因FAD7和FAD2的轉(zhuǎn)錄水平在光形態(tài)建成過程中均有明顯上調(diào),表明它們可能參與了 α-C18:3和C18:1比例轉(zhuǎn)變的過程。在細(xì)胞器膜脂組分研究中,與暗形態(tài)建成相比,光照誘導(dǎo)了質(zhì)體膜C16:1、α-C18:3、線粒體膜C22:0、C24:0、C16:0、α-C18:3以及過氧化物酶體膜C16:0、C18:0的大幅度增加。同時(shí),相關(guān)性分析結(jié)果顯示,質(zhì)體和線粒體中α-C18:3與子葉α-C18:3表現(xiàn)出顯著正相關(guān),表明光照誘導(dǎo)的子葉α-C18:3增加可能與質(zhì)體和線粒體中α-C18:3增加密切相關(guān)。與子葉不同,新生組織中α-C18:3、C18:2和C18:1三種主要不飽和脂肪酸比例在形態(tài)建成過程中逐漸下降,而C16:0和C18:0比例則持續(xù)升高,并且光照條件下α-C18:3的下降幅度以及C16:0和C18:0的升高幅度均小于黑暗下。此外,在黃芪幼苗形態(tài)建成過程中,光照均誘導(dǎo)了異黃酮和皂苷的積累,并且其主要是由新生組織中芒柄花黃素和黃芪甲苷的含量變化引起的。與暗形態(tài)建成相比,子葉和新生組織中H2O2含量和POD活性在光形態(tài)建成中明顯增加。異黃酮和皂苷等次生代謝產(chǎn)物的積累變化可能通過調(diào)控組織細(xì)胞氧化還原水平參與了黃芪幼苗光形態(tài)建成中的脂肪酸氧化還原代謝過程。
【圖文】:

色譜圖,種子萌發(fā),柱溫,階段


進(jìn)樣量:1邋pL;柱溫箱的升溫程序?yàn)槌跏贾鶞貫椋保矗?#176;C,并保持5邋min1:的速度,使溫度從1401:上升到2401,并在2401:保持1511^。逡逑件:電離方式EI,電離能量為70eV,離子源溫度為200°C,掃描質(zhì)量00邋m/z。樣品分流比:20:1。將測(cè)得樣品色譜圖中各峰的保留時(shí)間與37混標(biāo)(Nu-Chek邋Prep,美國)的色譜圖中各峰保留時(shí)間進(jìn)行比較,確定峰的性質(zhì)。采用面積歸一法確定每種脂f 酸占總脂肪酸的百分比。逡逑處理逡逑數(shù)據(jù)均表示為均值士標(biāo)準(zhǔn)差,均數(shù)比較采用SPSS軟件(SPSS邋17.0,邋S)進(jìn)行相關(guān)性分析。同時(shí)平均值的差異(p邋<0.05)用單因素方差分析檢數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化為-1至1,其中-1表示最佳下調(diào),1表示最佳上調(diào)。然后atmap邋Illustrator邋1.0邋版)制作熱圖。逡逑結(jié)果逡逑芪種子萌發(fā)及萌發(fā)后生長含水量變化逡逑說,種子萌發(fā)常被分為3個(gè)階段。第I階段為快速吸水階段,主要是D100邋邐逡逑

發(fā)芽指數(shù),發(fā)芽率,含水量,貯藏物質(zhì)


代表著種子萌發(fā)的完成以及貯藏物質(zhì)進(jìn)一步被利用來保證新生組織的發(fā)生逡逑[79]。黃芪種子萌發(fā)含水量也遵循種子吸脹吸水三個(gè)階段的明顯變化如圖2-1。第一階段逡逑為0-4邋h,含水量出現(xiàn)顯著的增加(8.03%-56.27%)。第二階段為8-24邋h,含水量達(dá)到一逡逑個(gè)平臺(tái)期,呈緩慢增加的趨勢(shì)(58.71%-61.97%)。第三階段為36-120邋h,種子再次快逡逑速吸水,,在120邋h,含水量高達(dá)89.68%。因此,根據(jù)含水量的動(dòng)態(tài)變化,選。啊ⅲ埃、逡逑1.5、3、4、5邋d這5個(gè)時(shí)間點(diǎn)來進(jìn)一步研究黃芪種子萌發(fā)過程貯藏物質(zhì)的利用方式以及逡逑ABA和MeJA的影響。逡逑2.3.2邋ABA和MEJA對(duì)黃芪種子萌發(fā)及萌發(fā)后生長的影響逡逑80邋邐邐邐邐—邐—邐邐邐邋70邋邐—邐邐邐邐邐邐邐邐逡逑^:ABA邐^邋a邋60邋r^l邐b逡逑篆邋--r-邋MeJA邐60邋—逡逑i60'邋ZV5邋Is。-逡逑I邐#邐i:]邐Hn逡逑0邋?邋4邐 ̄>邐,邐,邐
【學(xué)位授予單位】:東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S567.239

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本文編號(hào):2695905

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