【摘要】：黃芪(Radix Astragali)原名黃耆,來源于豆科藥用植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao 和膜莢黃芪 Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,是一種重要的藥用植物,黃芪中的多糖、皂苷、黃酮類物質(zhì)是其主要活性成分,有增強機體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老等作用,藥用價值相當高。本文以收集的47份黃芪種質(zhì)資源為材料,研究不同種質(zhì)資源間有效成分黃芪總皂苷、甲苷和總黃酮含量的差異,采用ITS和ISSR分子標記對來源不同的種質(zhì)資源進行遺傳多樣性分析,并開展黃芪有效成分與分子標記間的關(guān)聯(lián)分析,旨在了解所研究黃芪種質(zhì)資源的遺傳背景,初步揭示黃芪中總皂苷、總黃酮、黃芪甲苷含量與ISSR分子標記之間的關(guān)系,為黃芪優(yōu)質(zhì)種源的引種篩選和合理利用提供理論依據(jù)。其研究結(jié)果如下:(1)不同黃芪種質(zhì)資源的總皂苷、甲苷和總黃酮含量有差異,含量變異系數(shù)依次為16.71%、49.23%和19.64%,總皂苷含量范圍7.1670～17.5790 mg/g,甲苷含量范圍6.0700～107.9200 μg/g,總黃酮含量范圍2.2120～6.1639 mg/g;總皂苷含量均高于總黃酮含量,兩者呈極顯著正相關(guān)。甲苷含量與總皂苷以及總黃酮含量無相關(guān)性。(2)47份黃芪種質(zhì)資源ITS序列一致性為99.67%,ITS片段大小為611～618 bp,共三種序列類型;三種序列類型共42個SNP位點,包括堿基的缺失與插入;42個SNP位點在ITS1區(qū)段分布24個,5.8S區(qū)段1個,ITS2區(qū)段17個,種源340代表的序列類型與其它序列的差異最大。(3)13條ISSR引物在39個黃芪種質(zhì)資源的780個單株中共檢測到222多態(tài)性位點,每個引物的平均多態(tài)性百分率均為100%;39個種源的平均Nei's遺傳多樣性指數(shù)(H)和shannon信息指數(shù)(I)平均值分別為0.1852和0.2891,物種水平的遺傳多樣性指數(shù)(H)和shannon信息指數(shù)(I)分別是0.2419,0.3843;物種水平的遺傳多樣性高于種源水平;39份黃芪種質(zhì)資源間遺傳分化系數(shù)為0.2235;平均基因流為1.9591,說明黃芪各種質(zhì)資源間存在一定的基因交流;聚類分析將39份種質(zhì)資源共分為4大類。(4)13條ISSR引物對47份種質(zhì)資源的各混合DNA進行擴增共檢測到162個位點,其中多態(tài)性位點155個,平均多態(tài)性位點百分率為95.71%,平均每個引物擴增位點數(shù)為12.46,多態(tài)性位點為11.92個,H和I平均值分別為0.2327、0.3728;聚類分析將47份種質(zhì)資源共分為4大類。(5)13條ISSR引物中共61個位點與總皂苷和總黃酮含量發(fā)生關(guān)聯(lián),引物57可關(guān)聯(lián)到的位點最多,共11個;與總皂苷含量關(guān)聯(lián)的位點共24個,貢獻率的變異范圍5.05%～12.57%。與甲苷含量關(guān)聯(lián)的位點共23個,貢獻率的變異范圍9.98%～30.24%,與總黃酮含量關(guān)聯(lián)的位點共35個,貢獻率的變異范圍4.64%～11.11%;可以同時關(guān)聯(lián)到總皂苷和總黃酮含量兩個性狀的位點共有16個,可以同時關(guān)聯(lián)到總黃酮和甲苷含量兩個性狀的位點共有5個。
【圖文】：

ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、Ｗ，異黃皂苷Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ以及大豆皂苷Ｉ、ＩＢ，乙酰黃芪苷Ｉ，黃芪莖葉皂逡逑苷Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｊ等［１２％。其中除大豆皂苷Ｉ和黃芪皂苷ＶＤ以外，，其余均以９，邋１９－環(huán)羊毛逡逑脂烷型的四環(huán)三萜皂苷類作為苷元，總稱為黃芪皂苷或黃芪總皂苷（圖１－１邋ａｂｃ）邋［３0］逡逑－２－逡逑

ａ邐ｂｅ逡逑圖１－１黃芪甲苷類、乙酰黃芪苷類、異黃芪苷類母核、大豆皂苷類、莖葉皂苷類母核逡逑注：ａ為黃芪甲苷、乙酰黃芪苷、異黃芪苷類母核，ｂ為黃芪大豆皂苷類母核，ｃ為黃芪莖葉皂苷類母核；逡逑結(jié)構(gòu)式中取代基Ｒ的類型：Ｈ、０Ｈ、００出或者是糖逡逑北川勛等在１９８１年從［３１］膜英黃芪中分離出黃芪苷（ｏｓ／ｒａｇａ／ｏｓｉ？辦）Ｉ－ＶＤ等１２個三萜寡糖苷。逡逑此后，黃芪皂苷甲、黃芪皂苷乙、異黃芪皂苷ＩＶ等也陸續(xù)被國外學者［２Ｑ＇３２ｌ從膜莢黃芪中分離出來。逡逑馬英麗等【３３）從膜莢黃茂的地上部分分離得到膜莢黃民蓮葉阜苷Ｃ（Ｈｕａｎｇｑｉｙｉｅｓａｐｏｎｉｎ邋Ｃ）－Ｈｉｒｏｔａｎｉ逡逑Ｍ．等【２３】從膜莢黃芪的毛狀根中分離并得到黃芪皂苷Ｉ邋－ＩＶ、乙酰黃芪皂苷Ｉ、異黃芪皂苷Ｉ及逡逑ａｇｒｏａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ邋Ｉ邋－ＩＶ。Ｘｕ等丨３４】利用ＨＰＬＣ－ＭＳ方法對不同產(chǎn)地黃芪進行研究，根據(jù)得到的結(jié)果逡逑能夠鑒別出不同產(chǎn)地的黃芪藥材。趙強［３５］等用ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法測得黃芪提取物中黃芪皂苷Ｉ，邋ＩＩ逡逑和乙酰黃芪皂苷Ｉ的含量，并把這種方法用于黃芪提取物中皂苷類成分的定量分析。汪紅等【３６］逡逑利用ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法對黃芪皂苷（皂苷ＩＶ，ＩＩＩ，邋Ｉ）的含量的測定，認為這三種成分可以作為黃逡逑芪及其制劑的質(zhì)量評價標準。逡逑１．２．１．２黃芪黃酮類化合物及其測定方法逡逑隨著現(xiàn)在化學分析技術(shù)的發(fā)展
【學位授予單位】：寧夏大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S567.239

【參考文獻】

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本文編號：2657644