防治三七黑斑病的多抗霉素發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)研究
發(fā)布時間:2022-10-10 14:06
三七(Panaxnotoginseng(Burkill)F.H.Chen ex C.H.),屬于傘形目五茄科人參屬多年生的宿根直立草本植物,享有“參中之王”、“南國神草”、“金不換”等美譽(yù),其藥用具有悠久的歷史。黑斑病是三七栽培生產(chǎn)中常見的一大病害,常年發(fā)病率在10%~20%,嚴(yán)重時高達(dá)80%以上,已成為三七的毀滅性病害之一。三七的黑斑病由人參鏈格孢(Alternariapanax Whetzel)浸染引起,病原隸屬于半知菌亞門,絲孢綱,叢梗孢目,暗色孢科,鏈格孢屬。多抗霉素(Polyoxin)又名多氧霉素、多效霉素或多抗菌素,是一種用現(xiàn)代生物工程技術(shù)生產(chǎn)的肽嘧啶核苷類廣譜農(nóng)用抗生素,近年來被應(yīng)用到三七黑斑病的生物防治上取得良好的效果。本論文研究多抗霉素的工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù),首先基于陜西麥可羅生物科技公司的多抗霉素生產(chǎn)菌株,選育對三七黑斑病病原菌人參鏈格孢具有高效抑制作用的菌株,進(jìn)一步研究發(fā)酵工藝和產(chǎn)物分離提取工藝,提高多抗霉素生產(chǎn)效率,降低生產(chǎn)成本。本論文主要研究結(jié)果如下:1、采用瓊脂擴(kuò)散法,進(jìn)行高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素產(chǎn)生菌株的選育,建立了一套快速和高效的選育方法。以三七...
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
1.1 三七簡介
1.2 三七黑斑病簡介
1.2.1 三七黑斑病
1.2.2 三七黑斑病病原菌研究
1.3 多抗霉素簡介
1.3.1 多抗霉素(Polyoxin)
1.3.2 多抗霉素研究進(jìn)展
1.4 菌種的選育
1.5 發(fā)酵工藝的優(yōu)化
1.5.1 培養(yǎng)基對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.2 溫度對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.3 pH對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.4 溶氧對微生物發(fā)酵過程的影響
1.6 抗生素的分離提取工藝
1.7 課題研究的目的意義內(nèi)容及技術(shù)路線
1.7.1 研究的目的及意義
1.7.2 研究內(nèi)容
1.7.3 研究技術(shù)路線
2 高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素產(chǎn)生菌株的選育
2.1 材料
2.1.1 菌株
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 培養(yǎng)基的制備
2.2.2 三七黑斑病病原菌的擴(kuò)培
2.2.3 金色產(chǎn)色鏈霉菌的擴(kuò)培
2.2.4 金色產(chǎn)色鏈霉菌單菌落的制備
2.2.5 高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素產(chǎn)生菌株的選育
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 玻璃大盤預(yù)選
2.3.2 搖瓶初選
2.3.3 搖瓶復(fù)篩
2.4 小結(jié)
3 搖瓶發(fā)酵工藝的優(yōu)化
3.1 材料
3.1.1 菌株
3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
3.1.4 培養(yǎng)基
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#菌株的培育
3.2.2 搖瓶發(fā)酵的培養(yǎng)條件
3.2.3 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
3.2.4 最適搖瓶發(fā)酵條件的優(yōu)化
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 不同碳源對金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#產(chǎn)多抗霉素的影響
3.3.2 不同氮源對金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#產(chǎn)多抗霉素的影響
3.3.3 營養(yǎng)成分單因子實(shí)驗(yàn)
3.3.4 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化結(jié)果
3.3.5 最適發(fā)酵條件的優(yōu)化結(jié)果
3.3.6 綜合搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
3.4 小結(jié)
4 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵工藝研究
4.1 材料
4.1.1 菌株
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
4.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)方案
4.2.1 5L一級種子罐工藝
4.2.2 15 L二級種子罐工藝
4.2.3 50 L發(fā)酵罐工藝
4.3 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
4.3.1 5 L—15 L—50 L三平行九聯(lián)DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)
4.3.2 發(fā)酵實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)檢測
4.3.3 5 L—15 L—50 L三平行九聯(lián)DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 種子培養(yǎng)結(jié)果分析
4.4.2 發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
4.5 小結(jié)
5 多抗霉素的納濾膜分離提取工藝研究
5.1 材料
5.1.1 多抗霉素發(fā)酵液及檢驗(yàn)菌
5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
5.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 發(fā)酵液預(yù)處理
5.2.2 板式壓濾機(jī)壓濾固液分離
5.2.3 納濾膜分離提取實(shí)驗(yàn)
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 草酸酸化
5.3.2 壓濾固液分離
5.3.3 納濾膜分離提取
5.4 小結(jié)
6 結(jié)論與展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三七素的藥理作用研究進(jìn)展[J]. 張希,王文倩,許旭東,田瑜,尚海. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2019(10)
[2]春雷霉素高產(chǎn)菌株選育及其工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用[J]. 田露,王亮,閔建紅,祁晨娟,張志敏,龔國利. 陜西科技大學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[3]抗癌藥物埃博霉素的生產(chǎn)及工藝發(fā)展[J]. 田露,薛仁政,張志敏,薛春仙,沈蘭芳,龔國利. 生物技術(shù)通報. 2019(10)
[4]蒙藥資源分布及栽培研究進(jìn)展[J]. 白雪飛,包保全,王艷麗,向昌林,岳鑫,馮中華,麻煥如,李桂林. 現(xiàn)代園藝. 2019(09)
[5]三七黑斑病病原菌Alternaria alternata Keissl.生物學(xué)特性研究[J]. 楊婷,楊寬,何遲,王慧玲,王文鵬,金鑫,朱書生,朱有勇,何霞紅. 中藥材. 2018(04)
[6]不同殺菌劑對三七黑斑病菌的毒力測定[J]. 包媛媛,趙娟秀,楊加艷,王官民,毛忠順,楊莉,馮光泉. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2018(02)
[7]三七主要病害及其防治策略[J]. 張連娟,高月,董林林,尉廣飛,楊娟,陳軍文,沙本才. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2017(10)
[8]含三七中成藥用藥規(guī)律研究[J]. 陳光,劉超,何浩強(qiáng),高嘉良,李軍,邢雁偉,王階. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(07)
[9]三七黑斑病病原菌的復(fù)核鑒定[J]. 黃宏強(qiáng),范小燕,陶亞群,魯紅學(xué),鄧建新. 長江大學(xué)學(xué)報(自科版). 2016(15)
[10]三七圓斑病和黑斑病及其防治[J]. 王志敏,皮自聰,羅萬東,劉璇,王浩,李新瑩. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2016(01)
博士論文
[1]三七根際土壤微生物的群落特征[D]. 苗翠蘋.云南大學(xué) 2015
碩士論文
[1]多抗霉素B在人參樣品中的儲藏穩(wěn)定性研究[D]. 張睿泓.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]短短芽孢桿菌YNP-1的分離及其抗菌物質(zhì)的初步鑒定[D]. 王忠忠.陜西科技大學(xué) 2018
[3]三七根腐病病原真菌的初步研究[D]. 喬新國.云南大學(xué) 2015
[4]多孔陶瓷吸附固定纖維堆囊菌發(fā)酵制備埃博霉素[D]. 劉麗麗.陜西科技大學(xué) 2014
[5]Genome shuffling提高埃博霉素B的發(fā)酵產(chǎn)量[D]. 陳松.陜西科技大學(xué) 2013
[6]農(nóng)抗120產(chǎn)生菌誘變育種及發(fā)酵條件的優(yōu)化[D]. 楊宏勃.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[7]抗真菌農(nóng)用抗生素分離及發(fā)酵工藝優(yōu)化的初步研究[D]. 郭衛(wèi)寰.天津大學(xué) 2007
本文編號:3689754
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
1.1 三七簡介
1.2 三七黑斑病簡介
1.2.1 三七黑斑病
1.2.2 三七黑斑病病原菌研究
1.3 多抗霉素簡介
1.3.1 多抗霉素(Polyoxin)
1.3.2 多抗霉素研究進(jìn)展
1.4 菌種的選育
1.5 發(fā)酵工藝的優(yōu)化
1.5.1 培養(yǎng)基對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.2 溫度對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.3 pH對微生物發(fā)酵過程的影響
1.5.4 溶氧對微生物發(fā)酵過程的影響
1.6 抗生素的分離提取工藝
1.7 課題研究的目的意義內(nèi)容及技術(shù)路線
1.7.1 研究的目的及意義
1.7.2 研究內(nèi)容
1.7.3 研究技術(shù)路線
2 高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素產(chǎn)生菌株的選育
2.1 材料
2.1.1 菌株
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 培養(yǎng)基的制備
2.2.2 三七黑斑病病原菌的擴(kuò)培
2.2.3 金色產(chǎn)色鏈霉菌的擴(kuò)培
2.2.4 金色產(chǎn)色鏈霉菌單菌落的制備
2.2.5 高效抑制三七黑斑病病原菌的多抗霉素產(chǎn)生菌株的選育
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 玻璃大盤預(yù)選
2.3.2 搖瓶初選
2.3.3 搖瓶復(fù)篩
2.4 小結(jié)
3 搖瓶發(fā)酵工藝的優(yōu)化
3.1 材料
3.1.1 菌株
3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
3.1.4 培養(yǎng)基
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#菌株的培育
3.2.2 搖瓶發(fā)酵的培養(yǎng)條件
3.2.3 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
3.2.4 最適搖瓶發(fā)酵條件的優(yōu)化
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 不同碳源對金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#產(chǎn)多抗霉素的影響
3.3.2 不同氮源對金色產(chǎn)色鏈霉菌—18#產(chǎn)多抗霉素的影響
3.3.3 營養(yǎng)成分單因子實(shí)驗(yàn)
3.3.4 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化結(jié)果
3.3.5 最適發(fā)酵條件的優(yōu)化結(jié)果
3.3.6 綜合搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
3.4 小結(jié)
4 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵工藝研究
4.1 材料
4.1.1 菌株
4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
4.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
4.1.4 培養(yǎng)基
4.2 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)方案
4.2.1 5L一級種子罐工藝
4.2.2 15 L二級種子罐工藝
4.2.3 50 L發(fā)酵罐工藝
4.3 DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
4.3.1 5 L—15 L—50 L三平行九聯(lián)DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)
4.3.2 發(fā)酵實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)檢測
4.3.3 5 L—15 L—50 L三平行九聯(lián)DCS控制系統(tǒng)發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 種子培養(yǎng)結(jié)果分析
4.4.2 發(fā)酵實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
4.5 小結(jié)
5 多抗霉素的納濾膜分離提取工藝研究
5.1 材料
5.1.1 多抗霉素發(fā)酵液及檢驗(yàn)菌
5.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
5.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑材料
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 發(fā)酵液預(yù)處理
5.2.2 板式壓濾機(jī)壓濾固液分離
5.2.3 納濾膜分離提取實(shí)驗(yàn)
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 草酸酸化
5.3.2 壓濾固液分離
5.3.3 納濾膜分離提取
5.4 小結(jié)
6 結(jié)論與展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三七素的藥理作用研究進(jìn)展[J]. 張希,王文倩,許旭東,田瑜,尚海. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2019(10)
[2]春雷霉素高產(chǎn)菌株選育及其工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用[J]. 田露,王亮,閔建紅,祁晨娟,張志敏,龔國利. 陜西科技大學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[3]抗癌藥物埃博霉素的生產(chǎn)及工藝發(fā)展[J]. 田露,薛仁政,張志敏,薛春仙,沈蘭芳,龔國利. 生物技術(shù)通報. 2019(10)
[4]蒙藥資源分布及栽培研究進(jìn)展[J]. 白雪飛,包保全,王艷麗,向昌林,岳鑫,馮中華,麻煥如,李桂林. 現(xiàn)代園藝. 2019(09)
[5]三七黑斑病病原菌Alternaria alternata Keissl.生物學(xué)特性研究[J]. 楊婷,楊寬,何遲,王慧玲,王文鵬,金鑫,朱書生,朱有勇,何霞紅. 中藥材. 2018(04)
[6]不同殺菌劑對三七黑斑病菌的毒力測定[J]. 包媛媛,趙娟秀,楊加艷,王官民,毛忠順,楊莉,馮光泉. 中國農(nóng)學(xué)通報. 2018(02)
[7]三七主要病害及其防治策略[J]. 張連娟,高月,董林林,尉廣飛,楊娟,陳軍文,沙本才. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2017(10)
[8]含三七中成藥用藥規(guī)律研究[J]. 陳光,劉超,何浩強(qiáng),高嘉良,李軍,邢雁偉,王階. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(07)
[9]三七黑斑病病原菌的復(fù)核鑒定[J]. 黃宏強(qiáng),范小燕,陶亞群,魯紅學(xué),鄧建新. 長江大學(xué)學(xué)報(自科版). 2016(15)
[10]三七圓斑病和黑斑病及其防治[J]. 王志敏,皮自聰,羅萬東,劉璇,王浩,李新瑩. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2016(01)
博士論文
[1]三七根際土壤微生物的群落特征[D]. 苗翠蘋.云南大學(xué) 2015
碩士論文
[1]多抗霉素B在人參樣品中的儲藏穩(wěn)定性研究[D]. 張睿泓.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]短短芽孢桿菌YNP-1的分離及其抗菌物質(zhì)的初步鑒定[D]. 王忠忠.陜西科技大學(xué) 2018
[3]三七根腐病病原真菌的初步研究[D]. 喬新國.云南大學(xué) 2015
[4]多孔陶瓷吸附固定纖維堆囊菌發(fā)酵制備埃博霉素[D]. 劉麗麗.陜西科技大學(xué) 2014
[5]Genome shuffling提高埃博霉素B的發(fā)酵產(chǎn)量[D]. 陳松.陜西科技大學(xué) 2013
[6]農(nóng)抗120產(chǎn)生菌誘變育種及發(fā)酵條件的優(yōu)化[D]. 楊宏勃.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[7]抗真菌農(nóng)用抗生素分離及發(fā)酵工藝優(yōu)化的初步研究[D]. 郭衛(wèi)寰.天津大學(xué) 2007
本文編號:3689754
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