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稻瘟菌附著胞發(fā)育過程的分泌蛋白質(zhì)組研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-25 04:57
  由稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是水稻的重要病害之一,給水稻生產(chǎn)造成了嚴(yán)重威脅。附著胞是稻瘟菌侵染水稻的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),其形成是稻瘟菌侵染水稻的必要條件之一。分泌蛋白作為一類重要的致病因子,在植物病原真菌的致病過程中起著重要作用。但目前關(guān)于稻瘟菌分泌蛋白,尤其是附著胞發(fā)育過程中分泌蛋白的組成等均缺乏整體的了解。因此,開展稻瘟菌附著胞分泌蛋白質(zhì)組的研究將豐富稻瘟菌的致病分子機(jī)理。本研究采用體外模擬稻瘟菌與水稻互作的研究策略,應(yīng)用高通量的Shotgun技術(shù),對(duì)稻瘟菌附著胞的分泌蛋白進(jìn)行了高通量鑒定。應(yīng)用Label-free技術(shù)和生物信息學(xué)技術(shù),開展稻瘟菌附著胞發(fā)育不同階段的分泌蛋白質(zhì)組研究,并對(duì)其分泌蛋白的差異表達(dá)進(jìn)行了分析。取得的結(jié)果如下:1、以PVDF膜為介質(zhì),對(duì)稻瘟菌分生孢子的萌發(fā)情況進(jìn)行了研究;結(jié)果表明分生孢子在PVDF膜上可以正常萌發(fā)產(chǎn)生芽管和形成附著胞。采用超濾法,制備了高質(zhì)量的稻瘟菌附著胞分泌蛋白;表明以PVDF膜作為介質(zhì)可以模擬開展稻瘟菌早期侵染階段的分泌蛋白質(zhì)組研究。2、以附著胞形態(tài)建成過程中附著胞發(fā)育期(8 h)和附著胞成熟期(24 h)為時(shí)間點(diǎn),... 

【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

稻瘟菌附著胞發(fā)育過程的分泌蛋白質(zhì)組研究


稻瘟菌侵染循環(huán)(引自Ribotetal.,2008)

示意圖,稻瘟菌,信號(hào)通路,示意圖


圖 3 稻瘟菌信號(hào)通路示意圖(引自 Rebollar et al.,2013)促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)途徑分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,MAPK)對(duì)植物病應(yīng)外界刺激有著關(guān)鍵作用,外界信號(hào)分子通過膜受體轉(zhuǎn)換為膜內(nèi)信號(hào)后,啟 級(jí)聯(lián)反應(yīng),引起靶蛋白和轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化,實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的調(diào)控(Boudsocq。MK1 是稻瘟菌首次克隆到的 MAPK 基因,該基因敲除突變體附著胞和孢子的,但孢子的萌發(fā)不受影響(Nishidaetal.,1993)。MoMSB2 和 MoSHO1 調(diào)控 PM,MoMSB2 敲除突變體=附著胞形成明顯受阻,對(duì)水稻致病性減弱;這兩個(gè)敲除突變體在人工模擬的疏水表面幾乎不能形成附著胞,PMK1 磷酸化水平低(Liuetal.,2011)。研究發(fā)現(xiàn),MST50、MST11 和 MST7 都是 PMK1-MA的重要組分,參與了稻瘟菌附著胞的形成(Jin et al.,2013)。MPS1 作為稻

稻瘟菌,經(jīng)典,錨定位,信號(hào)肽


用軟件 WoLF PSORT(https://wolfpsort.hgc.jp/)和 TargetP 1.cbs.dtu.dk/services/TargetP/)對(duì)稻瘟菌中含有 N-端信號(hào)肽的蛋白析(Horton et al.,2007)。用軟件 TMHMM Server v2.0(http://www.cbs.dtu.dk/services/TM有 N-端信號(hào)肽且定位于胞外的蛋白質(zhì)進(jìn)行跨膜結(jié)構(gòu)預(yù)測,排除(Kroghet al.,2001)。用軟件 big-PIPredictor(http://mendel.imp.ac.at/sat/gpi/gpi_se et al.,2004)對(duì)稻瘟菌中含有 N-端信號(hào)肽、定位于胞外、且不質(zhì)進(jìn)行 GPI 錨定位點(diǎn)分析,保留不含有錨定位點(diǎn)的蛋白,最終蛋白。

【參考文獻(xiàn)】:
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本文編號(hào):3607933

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