葉螨乙酰膽堿酯酶在pColdⅡ中的表達及活性分析
發(fā)布時間:2021-12-29 12:14
【目的】為了獲得較高活性的螨AChE重組蛋白!痉椒ā繉⑷~螨ace基因全長和去疏水區(qū)兩種形式分別在pColdⅡ與pET-30a載體中表達,比較它們的表達效果!窘Y果】AChE在兩種載體中成功表達,得到了較高純度的AChE。與載體pET-30a比,AChE蛋白在pColdⅡ表達載體中的表達量、酶活性以及對毒扁豆堿的敏感性都更高,去掉羧基端疏水區(qū)有助于提高AChE的活性!窘Y論】此研究建立高活性AChE的表達系統(tǒng),獲得了大量活性較高的AChE重組蛋白,為AChE抑制劑的篩選提供試驗基礎。
【文章來源】:北京農學院學報. 2020,35(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
各種AChE對毒扁豆堿敏感性的比較
Ni-NTA純化濃縮后,用SDS-PAGE分析和Western Blot檢測。如圖3所示, AChE重組蛋白去疏水區(qū)后的條帶以及野生型全長AChE重組蛋白的條帶大小與預期一致,說明AChE在pCold Ⅱ與pET-30a中表達成功,獲得的AChE蛋白符合后續(xù)試驗要求。2.4 不同形式AChE酶活力比較
不同形式AChE酶活比較
【參考文獻】:
期刊論文
[1]農用乙酰膽堿酯酶抑制劑研究進展[J]. 李夢怡,彭博,李博,邵文華,楊金,付欣,師光祿,卜春亞. 生物技術進展. 2017(02)
[2]基于殺螨劑靶標朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶體外表達的新型殺螨活性化合物篩選[J]. 彭博,卜春亞,師光祿,李金玲,馮曉姣,韓晶玉. 應用與環(huán)境生物學報. 2016(01)
[3]朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶的表達純化及其酶活測定條件優(yōu)化[J]. 彭博,師光祿,卜春亞,王有年. 北京農學院學報. 2015(04)
[4]朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶的原核表達及其活性分析[J]. 彭博,卜春亞,師光祿,李金玲,馮曉姣,韓晶玉,高品,王有年. 應用與環(huán)境生物學報. 2015(02)
[5]朱砂葉螨的識別與防治[J]. 王澤華,宮亞軍,魏書軍,康總江,朱亮,金桂華,石寶才. 中國蔬菜. 2013(05)
[6]來源于天然產物的乙酰膽堿酯酶抑制劑研究進展[J]. 樓影涵,査曉明,張莉莉,張茵,徐云根,張陸勇. 藥學進展. 2012(09)
[7]我國朱砂葉螨研究進展[J]. 劉波,桂連友. 長江大學學報(自科版)農學卷. 2007(03)
[8]乙酰膽堿酯酶抑制劑的研究現(xiàn)狀[J]. 王淑月,劉亞妹,姚道魯,高記華. 承德醫(yī)學院學報. 2002(04)
博士論文
[1]東亞飛蝗乙酰膽堿酯酶基因克隆及其功能研究[D]. 周小霞.重慶大學 2009
[2]甘草黃酮的分離鑒定、藥效及其指紋圖譜研究[D]. 崔永明.華中科技大學 2008
碩士論文
[1]昆明鼠乙酰膽堿酯酶克隆表達與活性測定[D]. 張立媛.華中師范大學 2008
[2]家蠅乙酰膽堿酯酶基因的克隆、突變、表達與應用研究[D]. 陳艷霞.浙江大學 2007
本文編號:3556108
【文章來源】:北京農學院學報. 2020,35(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
各種AChE對毒扁豆堿敏感性的比較
Ni-NTA純化濃縮后,用SDS-PAGE分析和Western Blot檢測。如圖3所示, AChE重組蛋白去疏水區(qū)后的條帶以及野生型全長AChE重組蛋白的條帶大小與預期一致,說明AChE在pCold Ⅱ與pET-30a中表達成功,獲得的AChE蛋白符合后續(xù)試驗要求。2.4 不同形式AChE酶活力比較
不同形式AChE酶活比較
【參考文獻】:
期刊論文
[1]農用乙酰膽堿酯酶抑制劑研究進展[J]. 李夢怡,彭博,李博,邵文華,楊金,付欣,師光祿,卜春亞. 生物技術進展. 2017(02)
[2]基于殺螨劑靶標朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶體外表達的新型殺螨活性化合物篩選[J]. 彭博,卜春亞,師光祿,李金玲,馮曉姣,韓晶玉. 應用與環(huán)境生物學報. 2016(01)
[3]朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶的表達純化及其酶活測定條件優(yōu)化[J]. 彭博,師光祿,卜春亞,王有年. 北京農學院學報. 2015(04)
[4]朱砂葉螨乙酰膽堿酯酶的原核表達及其活性分析[J]. 彭博,卜春亞,師光祿,李金玲,馮曉姣,韓晶玉,高品,王有年. 應用與環(huán)境生物學報. 2015(02)
[5]朱砂葉螨的識別與防治[J]. 王澤華,宮亞軍,魏書軍,康總江,朱亮,金桂華,石寶才. 中國蔬菜. 2013(05)
[6]來源于天然產物的乙酰膽堿酯酶抑制劑研究進展[J]. 樓影涵,査曉明,張莉莉,張茵,徐云根,張陸勇. 藥學進展. 2012(09)
[7]我國朱砂葉螨研究進展[J]. 劉波,桂連友. 長江大學學報(自科版)農學卷. 2007(03)
[8]乙酰膽堿酯酶抑制劑的研究現(xiàn)狀[J]. 王淑月,劉亞妹,姚道魯,高記華. 承德醫(yī)學院學報. 2002(04)
博士論文
[1]東亞飛蝗乙酰膽堿酯酶基因克隆及其功能研究[D]. 周小霞.重慶大學 2009
[2]甘草黃酮的分離鑒定、藥效及其指紋圖譜研究[D]. 崔永明.華中科技大學 2008
碩士論文
[1]昆明鼠乙酰膽堿酯酶克隆表達與活性測定[D]. 張立媛.華中師范大學 2008
[2]家蠅乙酰膽堿酯酶基因的克隆、突變、表達與應用研究[D]. 陳艷霞.浙江大學 2007
本文編號:3556108
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