【摘要】：中藥材是浙江省的十大農(nóng)業(yè)主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一,基本形成了白術(shù)、杭白菊等“浙八味”道地藥材和鐵皮石斛等名貴藥材的優(yōu)勢(shì)產(chǎn)區(qū),是農(nóng)民增收的重要經(jīng)濟(jì)來(lái)源。但病害基礎(chǔ)性研究薄弱,登記農(nóng)藥產(chǎn)品少及質(zhì)量安全體系滯后,導(dǎo)致了農(nóng)藥殘留和食品安全問(wèn)題成為制約行業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵因子之一,因此弄清楚病害發(fā)生、危害和規(guī)律,對(duì)中藥材的生產(chǎn)變得尤為重要。本研究從浙江省白術(shù)、杭白菊和鐵皮石斛主產(chǎn)區(qū)采集病害樣品,通過(guò)病原菌分離、致病性試驗(yàn),綜合形態(tài)學(xué)和分子系統(tǒng)發(fā)育分析對(duì)病原菌進(jìn)行了分離、鑒定,并初步研究了其防治。明確了白術(shù)立枯病病原為立枯絲核菌(Rhizoctonia solani),對(duì)噻呋酰胺和咯菌腈的敏感性最高,EC_(50)值均為0.06μg·mL~(-1);白絹病病原為齊整小核菌(Sclerotium rolfsii),對(duì)吡唑醚菌酯敏感性最高,EC_(50)值為0.02μg·mL~(-1)。白術(shù)葉斑病病原為Phoma exigua,對(duì)葉斑病菌生物學(xué)特性測(cè)定表明:該菌菌絲生長(zhǎng)的最適溫度為28℃,最適pH為8;不同碳源與氮源對(duì)其菌絲生長(zhǎng)的影響差異顯著,其中可溶性淀粉和蛋白胨分別為最適碳源與氮源;當(dāng)溫度為24℃、相對(duì)濕度為100%時(shí),最適于分生孢子萌發(fā);菌絲和分生孢子的致死溫度分別為47℃和54℃;藥劑敏感性測(cè)定結(jié)果表明:孢子對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性最高,EC_(50)值為0.10μg·mL~(-1);在離體條件下,對(duì)活性較強(qiáng)的殺菌劑進(jìn)行了防效篩選,結(jié)果表明:吡唑醚菌酯8.5μg·mL~(-1)濃度藥液對(duì)葉斑病的離體葉片保護(hù)效果達(dá)到100%。鐵皮石斛黑斑病菌為細(xì)極鏈格孢(Alternaria tenuissima),對(duì)咯菌腈的菌絲敏感性最高,EC_(50)值為0.10μg·mL~(-1);殺菌劑防效篩選結(jié)果表明:苯醚甲環(huán)唑2.8μg·mL~(-1)濃度藥液對(duì)黑斑病的離體葉片保護(hù)效果為49.28%。鐵皮石斛炭疽病病原為茶樹(shù)炭疽(Colletotrichum fructicola),對(duì)咪鮮胺的菌絲敏感性最高,EC_(50)值為0.02μg·mL~(-1);殺菌劑防效篩選結(jié)果表明:苯醚甲環(huán)唑4.8μg·mL~(-1)濃度藥液對(duì)炭疽病的離體葉片保護(hù)效果為42.00%。杭白菊葉枯病病菌為Phoma bellidis,為研究田間葉枯病菌對(duì)多菌靈的抗性程度,采用區(qū)分劑量法檢測(cè)了34株杭白菊葉枯病菌對(duì)多菌靈的抗藥性,并對(duì)不同表現(xiàn)型病菌的β-tubulin基因進(jìn)行分析比較。結(jié)果顯示:杭白菊葉枯病菌對(duì)多菌靈的抗性頻率高達(dá)93.94%,且均為高水平抗性,分子機(jī)制為β-tubulin基因第198位發(fā)生突變(E198A)。同時(shí),采用菌絲生長(zhǎng)速率法,測(cè)定了葉枯病菌對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性,結(jié)果表明:葉枯病菌群體對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性差異較大,其中33株菌株EC_(50)值在0.060~0.370μg·mL~(-1)之間,呈連續(xù)正態(tài)分布,平均EC_(50)值為0.177μg·mL~(-1),即為桐鄉(xiāng)杭白菊葉枯病菌群體對(duì)吡唑醚菌酯的敏感基線。
【學(xué)位授予單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S435.672
【圖文】：

經(jīng) 2015~2016 年調(diào)查發(fā)現(xiàn)，浙江省磐安縣白術(shù)種植區(qū)立枯病和白絹病發(fā)生較輕，立枯病發(fā)病初期莖基部出現(xiàn)水漬狀暗褐色病斑，病斑環(huán)莖蔓延。隨后植株整體表現(xiàn)萎蔫，頂部葉片下垂干枯，近地面葉片出現(xiàn)大面積黑褐色病斑，莖基部溢縮，表皮都為黑褐色病斑（圖 2.1 a b）。白絹病發(fā)病初期在莖基部傷口開(kāi)始發(fā)病，隨著病情發(fā)展，莖基部出現(xiàn)水漬狀、暗褐色、不規(guī)則病斑，近地面葉片黃化萎蔫。病情后期莖基部和近地面葉片被白色呈絹絲狀菌絲纏繞，植株可從基質(zhì)中輕易拔起，葉片、莖部和土層中可見(jiàn)大量油菜籽狀茶褐色菌核（圖 2.1 c d）。葉斑病發(fā)生較為嚴(yán)重，病株率可達(dá) 70~80%，病重植株全株焦枯死亡。病害一般在 4 月下旬至 5 月初始發(fā)生，6~8 月份溫濕度適合時(shí)發(fā)病嚴(yán)重，未清理病殘?bào)w的連作田塊發(fā)病更為嚴(yán)重，9 月進(jìn)入病情末期，但仍有發(fā)生。葉斑病菌首先侵染莖基部老葉，后向上擴(kuò)展，病情嚴(yán)重時(shí)擴(kuò)展至整株，導(dǎo)致全葉焦枯（圖 2.1 e f）。發(fā)病初期葉片上產(chǎn)生大小不等的褐色斑點(diǎn)，病斑形狀受葉脈限制，后期病斑不斷擴(kuò)大，中央為灰白色，出現(xiàn)大量黑色小點(diǎn)，即分生孢子器，分生孢子可通過(guò)雨水、風(fēng)力等方式進(jìn)行傳播至附近植株引起發(fā)病。

2.2.2 分離物致病性分別將立枯病的病樣分離物 PARS16-1 和 PARS16-2，白絹病的病樣分離物PASR16-1 和 PASR16-2，葉斑病的病樣分離物 PAPE16-1 和 PAPE16-2 進(jìn)行致病性試驗(yàn)。結(jié)果表明了三種病害分離物對(duì)白術(shù)具有致病性，且致病癥狀與田間癥狀相似，且對(duì)照處理均未發(fā)病。此外分離物 PASR16-1 和 PASR16-2 對(duì)白術(shù)莖桿同樣具有致病性（圖 2.2）。對(duì)接種發(fā)病后的 3 種病斑進(jìn)行再分離，獲得與原菌株形態(tài)一致的病原菌，根據(jù)柯赫氏法則，明確菌株P(guān)ARS16-1和PARS16-2，PASR16-1和PASR16-2，PAPE16-1和 PAPE16-2 分別為白術(shù)立枯病、白絹病和葉斑病的病原菌。

9 d 后菌核顏色變?yōu)椴韬稚砻婀饣�，不與菌絲相連，呈近球形或橢球形（圖2.3 d-f），大小為（1.45～1.76）mm×（1.29～1.61）mm。

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本文編號(hào)：2757207