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馬鈴薯四種病害拮抗菌的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2020-07-01 20:25
【摘要】:為了尋找馬鈴薯枯萎病、黃萎病、黑痣病和晚疫病病菌的拮抗菌菌株,通過篩選芽孢細(xì)菌的方法,從內(nèi)蒙古不同生境下的土樣品分離篩選到了 92株細(xì)菌,共劃分為 7 個(gè)屬,分別是Bacillus、Paenibacillus、Lysobacter、Psendomonas、Brevibacillus、Ochrobactrum和Enterobacter。其中,最優(yōu)勢(shì)屬為Bacillus,共包括了 67株、占總菌種數(shù)的73%?梢砸种岂R鈴薯枯萎病、黃萎病、黑痣病和晚疫病的共有19株細(xì)菌,其中8株屬于Bacillus、6株屬于Paenibacillus、2株屬于Lysobacter、2株屬于Psendomonas、1株屬于Brevibacillus。平板對(duì)峙試驗(yàn)表明,P01對(duì)馬鈴薯晚疫病抑制效果最好,H5對(duì)馬鈴薯枯萎病、黑痣病和晚疫病都有抑制作用,P16對(duì)馬鈴薯枯萎病、黃萎病、黑痣病和晚疫病的都有抑制效果,生防效果比較好的菌株,大多數(shù)具有固氮能力、溶無機(jī)磷能力、產(chǎn)鐵載體能力。為了使菌株的生物量達(dá)到最好,采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)結(jié)合的方法對(duì)拮抗效果最好的4株菌株進(jìn)行了發(fā)酵條件優(yōu)化。結(jié)果表明:P01菌株最佳配方為胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化鈉10 g/L、蔗糖8g/L、麥芽糖10 g/L、干酪素6 g/L、硫酸鎂1 g/L;最佳培養(yǎng)條件為pH值7.2、發(fā)酵溫度28℃、發(fā)酵時(shí)間52 h、發(fā)酵轉(zhuǎn)速180 r/min、接種量250 μL/50 mL。P16菌株最佳配方為胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化鈉10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖6g/L、蛋白胨8 g/L、硫酸鎂2.5 g/L;最佳培養(yǎng)條件為pH值8.0、發(fā)酵溫度28℃、發(fā)酵時(shí)間35 h、發(fā)酵轉(zhuǎn)速160 r/min、接種量250 μL/50 mL。H5菌株最佳配方為胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化鈉10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖8 g/L、蛋白胨10 g/L、硫酸鎂1.5 g/L;最佳培養(yǎng)條件為pH值8.0、發(fā)酵溫度30℃、發(fā)酵時(shí)間24 h、發(fā)酵轉(zhuǎn)速180 r/min、接種量250 μL/50 mL。K16菌株最佳配方為胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化鈉10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖6g/L、干酪素8 g/L、磷酸氫二鉀2 g/L;最佳培養(yǎng)條件為pH值7.2、發(fā)酵溫度30℃、發(fā)酵時(shí)間47 h、發(fā)酵轉(zhuǎn)速 180r/min、接種量 150 μL/50 mL。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S435.32
【圖文】:

示意圖,初步篩選,拮抗,芽孢


內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文3.2拮抗芽孢細(xì)菌的篩選逡逑在已經(jīng)純化的92株芽孢桿菌細(xì)菌,針對(duì)馬鈴薯枯萎病、馬鈴薯黃萎病、馬黑痣病、馬鈴薯晚疫病病原菌進(jìn)行平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)[57],初步篩選具有生防能力的細(xì)菌,有拮抗效果的菌株周圍會(huì)產(chǎn)生抑菌圈,無拮抗效果的菌株會(huì)被病菌的菌蓋逡逑

示意圖,示意圖,接菌,菌株


圖4馬鈴薯黃萎病平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)示意圖逡逑Fig.4邋Experimental邋Diagram邋of邋Potato邋Verticillium邋Wilt邋stand-off邋on邋flat邋Plate逡逑注:圖4,標(biāo)注有效的為馬鈴薯黃萎病有拮抗效果的菌株,標(biāo)注CK的為不接菌的陰性對(duì)照。逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2737233

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