發(fā)布時間：2024-12-21 05:48

　　目的:檢測膿毒癥小鼠腦組織中各種炎癥介質的水平及Notch-1、NF-κB mRNA及其蛋白表達的變化,建立miR-34a過表達慢病毒的膿毒癥相關腦病小鼠模型,評估其調控Notch-1/NF-1κB信號通路在膿毒癥相關腦病小鼠中的作用。方法:將清潔級小鼠54只隨機(隨機數(shù)字法)分為假手術組(sham組,n=9,僅行腹腔切開縫合術),陰性對照組(NC組,n=15,用鞘內注射的方法注射陰性對照慢病毒(滴度為5×108TU/mL)5ul每日一次,共3天,第7天行CLP術),手術組(CLP組,n=15只,腹腔切開、盲腸結扎穿孔、腹腔縫合術),干預組(n=15只,鞘內注射miR-34a慢病毒(滴度為5×108 TU/mL)5ul共3天,第7天行CLP術),期間觀察小鼠行為學改變,并于術后24h進行神經(jīng)功能評分;然后麻醉后處死,留取腦組織標本。并觀察腦組織病理學改變。最后用ELISA法分別測定腦組織 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α 的水平;用實時熒光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR)法測定腦組織 NF-κB mRNA、Notch...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學位級別】：碩士

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緒論
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要藥物及試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 技術路線圖
        2.2 膿毒癥小鼠模型
        2.3 行為學觀察及其神經(jīng)功能評分表
        2.4 腦組織病理檢查
        2.5 ELISA法檢測IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平
        2.6 實時熒光定量-PCR法檢測NF-κB mRNA、Notch-1表達
        2.7 Western Blot法檢測NF-κB、Notch-1蛋白表達
        2.8 統(tǒng)計學處理
3 研究結果
    3.1 術后24 h內小鼠死亡率
    3.2 術后各組小鼠行為學變化、組織變化及神經(jīng)功能評分
    3.3 各組小鼠IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平的變化
    3.4 各組小鼠NF-κB mRNA、Notch-1表達的變化
    3.5 各組小鼠NF-κB、Notch-1蛋白表達的變化
    3.6 各組小鼠腦組織病理學檢查
4 討論
    4.1 關于本試驗中小鼠模型
    4.2 關于SAE的發(fā)病機制
    4.3 Notch-1/NF-κB信號通路在膿毒癥炎癥損傷機制中的作用
    4.4 miR-34a調控Notch信號通路的機制
5 總結
6 論文實驗附圖
參考文獻
綜述
    參考文獻
作者簡歷及在學期間所取得的科研成果



本文編號：4018500