發(fā)布時(shí)間：2023-05-10 05:18

　　甲基轉(zhuǎn)移酶催化的DNA甲基化反應(yīng)是非常重要的表觀遺傳修飾過程,在改變DNA的構(gòu)象、染色質(zhì)的結(jié)構(gòu),基因表達(dá)等生物過程中起著非常關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性和甲基化水平的異常會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生,DNA甲基轉(zhuǎn)移酶也因而成為醫(yī)學(xué)診斷及治療一些復(fù)雜疾病的重要靶標(biāo)。因此,開發(fā)建立操作簡(jiǎn)單、靈敏度高的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的檢測(cè)方法不僅在表觀遺傳等基本生物過程的研究而且在相關(guān)疾病診斷、藥物開發(fā)研究等方面具有重要意義。此外,葡萄糖是糖尿病診斷的一項(xiàng)重要生化指標(biāo)。研究建立操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、價(jià)格低廉的葡萄糖定量檢測(cè)方法,對(duì)于糖尿病的治療和控制十分必要。本論文中,我們基于一些簡(jiǎn)單、高效的核酸擴(kuò)增技術(shù),以及性能優(yōu)異的Ce02納米材料,發(fā)展了分別針對(duì)甲基轉(zhuǎn)移酶及葡萄糖兩類物質(zhì)的新型熒光傳感方法。主要內(nèi)容如下:1、論文第二章,我們基于末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)介導(dǎo)的核酸擴(kuò)增技術(shù)建立了一種新型的檢測(cè)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活性的新方法。在本方法中,只需要設(shè)計(jì)一種簡(jiǎn)單的莖環(huán)結(jié)構(gòu)DNA分子,其莖部含有Dam甲基轉(zhuǎn)移酶特殊識(shí)別5’-G-A-T-C-3’序列,且3’末端被磷酸封閉。當(dāng)Dam甲基轉(zhuǎn)移酶作用于該莖環(huán)DNA...

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 選題背景與意義
    1.2 甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展
        1.2.1 傳統(tǒng)的檢測(cè)方法
        1.2.2 基于功能核酸探針的檢測(cè)方法
    1.3 葡萄糖檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展
    1.4 本論文選題思想和主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 基于核酸末端延伸反應(yīng)的甲基轉(zhuǎn)移酶的活性分析
        1.4.2 基于CeO₂的熒光傳感體系
第二章 基于核酸末端延伸反應(yīng)的蛋白酶活性分析
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 儀器與試劑
        2.2.2 Dam甲基轉(zhuǎn)移酶的活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟
        2.2.3 T4多聚核苷酸磷酸激酶的活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 基于核酸末端延伸反應(yīng)的Dam甲基轉(zhuǎn)移酶的活性檢測(cè)原理
        2.3.2 優(yōu)化TdT酶和DpnI酶的用量
        2.3.3 基于核酸末端延伸反應(yīng)的Dam甲基轉(zhuǎn)移酶活性分析
        2.3.4 基于核酸末端延伸反應(yīng)的Dam甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 基于核酸末端延伸反應(yīng)的T4多聚核苷酸激酶的活性檢測(cè)原理
        2.3.6 優(yōu)化Tris-HCl、TdT緩沖溶液、TdT酶的濃度
        2.3.7 基于核酸末端延伸反應(yīng)的T4多聚核苷酸激酶活性分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 基于CeO₂納米粒子的葡萄糖熒光檢測(cè)
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 儀器與試劑
        3.2.2 基于Ce³⁺/鈣黃綠素的體系檢測(cè)H₂O₂的實(shí)驗(yàn)過程
        3.2.3 基于CeO₂/鈣黃綠素的體系檢測(cè)H₂O₂和葡萄糖的的實(shí)驗(yàn)過程
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 檢測(cè)原理
        3.3.2 基于Ce³⁺/鈣黃綠素體系檢測(cè)H₂O₂活性分析
        3.3.3 基于CeO₂/鈣黃綠素體系的活性分析
    3.4 本章小結(jié)
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間科研成果



本文編號(hào)：3813111