研究背景與目的膿毒癥是機體對感染的反應失調所導致的器官功能障礙,具有很高的發(fā)病率和死亡率,是兒科重癥監(jiān)護病房（PICU）主要的死亡原因。膿毒癥相關性腦�。⊿AE）是一種由膿毒癥所致的彌散性腦功能障礙,可出現(xiàn)在膿毒癥的早期,其感染部位常位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)之外。解耦聯(lián)蛋白2（UCP2）是線粒體解耦聯(lián)蛋白家族成員之一,廣泛分布在大腦、心臟、肺臟等器官和組織中,參與多種病理生理過程。研究表明,在腦卒中模型和急性腦損傷模型中,UCP2可以通過減輕細胞炎癥和抑制細胞凋亡來實現(xiàn)一定的神經(jīng)保護作用,而我們的前期研究證實,在膿毒癥心肌細胞模型中,UCP2可以通過解耦聯(lián)實現(xiàn)對線粒體膜電位（MMP）和ATP合成的調控。因此,本實驗擬探討UCP2在膿毒癥星形膠質細胞模型中的表達,以及其對線粒體功能的影響。研究方法第一階段:分離純化新生大鼠大腦皮質星形膠質細胞（Astrocyte,AS）,隨機將AS分為4組:正常對照組（對照組）;LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+6 小時組（LPS+IFN-γ+6h組）:LPS（150ng/mL）+IFN-γ（200U/mL）+12 小時組（LPS+IFN... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－３各組星形膠質細胞中ＵＣＰ２蛋白表達水平比較

＜０．０５），其中ｓｈＲＮＡ?－ＵＣＰ２－１６沉默序列轉染的細胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達水平??最低（０．２１４±０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，與對照組相比差異具有統(tǒng)??計學意義（ＰＣ０．０５），見表２－３圖２－４。故選擇ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６轉染序列進行??后續(xù)實驗。??確定轉染序列后，將轉染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以不同濃度（２５ｍｏｉ、５０ｍｏｉ、??ｌＯＯｍｏｉ）轉染入原代星形膠質細胞內，正常培養(yǎng)４８小時收集細胞進行熒光定量??ＰＣＲ的結果顯示：各組ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達水平均顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５），??其中當ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ濃度轉染到細胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達水平最??低（０．２１４土０．０８３比１．０００±０．００１），沉默效率最高，與空載病毒組相比差異具有??統(tǒng)計學意義（Ｐ＜〇．〇５），見表４圖５。故選擇轉染序列ｓｈＲＮＡ－ＵＣＰ２－１６以ｌＯＯｍｏｉ??濃度進行后續(xù)實驗。??３５??

／ｙｙｙ??，ｆ?，??圖２－４：各組星形膠質細胞中ＵＣＰ２ｍＲＮＡ表達水平比較?（ｘ±ｓ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ＵＣＰ２?ｍＲＮＡ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ａｍｏｎｇ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?（ｘ±ｓ）??注：與對照組比較，ａＰ＜０．０５．ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，?３戶＜〇．０５．??表２４：各組星形膠質細胞中ＵＣＰ２蛋

【參考文獻】：
期刊論文
[1]膿毒癥致線粒體損傷的研究進展[J]. 盛悅,王錦權.  中華急診醫(yī)學雜志. 2018 (05)
[2]胰島素對膿毒癥大鼠腦組織的保護作用及機制[J]. 王桃,陳亦婷,張俊亮,陳廣道,張炬興,黃錦達,曾其毅.  中華實用兒科臨床雜志. 2017 (11)
[3]膿毒癥相關性腦病遠期腦線粒體損傷與氧化應激的關系[J]. 呂娟娟,陳志江,鄭貴浪,王斌,陶少華,項丹,謝美燕,劉翠,黃錦達,曾其毅.  中華實用兒科臨床雜志. 2015 (11)
[4]UCP2基因siRNA轉染對膿毒癥血清誘導心肌細胞炎癥反應的影響[J]. 陳志江,宋遠斌,王惠麗,王陽,呂娟娟,車頔,曾其毅.  中國當代兒科雜志. 2014(08)
[5]解耦連蛋白2在膿毒癥大鼠心肌組織中的動態(tài)表達變化[J]. 陳志江,王惠麗,王陽,宋遠斌,車頔,呂娟娟,曾其毅.  發(fā)育醫(yī)學電子雜志. 2014(02)



本文編號：3414874