本文關(guān)鍵詞：脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本研究采用盲腸結(jié)扎穿孔法(CLP)制備大鼠膿毒癥模型,然后給予外源性重組脂聯(lián)素對模型大鼠進行干預(yù),動態(tài)觀察脂聯(lián)素對膿毒癥大鼠干預(yù)后不同手術(shù)時間點血清降鈣素原(PCT)、肝功能標(biāo)記物(ALT、AST、TBIL)及肝組織中炎癥因子(TNF-α、IL-6)變化的影響,并對接受干預(yù)后的模型大鼠肝臟病理變化和形態(tài)變化進行記錄分析,初步探討脂聯(lián)素干預(yù)對膿毒癥大鼠肝功能障礙的保護作用,并進一步闡述其可能作用機制。方法:通過隨機數(shù)字表法將清潔健康Wistar待實驗大鼠54只,雌雄不拘,隨機分為假手術(shù)組(Sham)、膿毒癥組(CLP)及脂聯(lián)素干預(yù)組(APN+CLP),每組18只,每個大組大鼠根據(jù)實驗觀察時間點再隨機分為(3h、6h、12h)3個亞組,每組各6只。Sham組大鼠無菌剖腹后,分離盲腸,翻動盲腸,原位回納后關(guān)腹,不對其行盲腸結(jié)扎及穿刺術(shù),其余兩組大鼠采用盲腸結(jié)扎和穿刺術(shù)制備膿毒癥模型,APN+CLP組大鼠CLP模型成功建立后立即行腹腔注射脂聯(lián)素600ug/100g。CLP模型建立完成后,分別于術(shù)后3h、6h、12h采集血標(biāo)本,用于檢測血清降鈣素原(PCT)、肝功能標(biāo)記物(ALT、AST、TBIL)及肝組織中炎癥因子TNF-α、IL-6水平。各觀察時間點采血后立即處死大鼠,無菌取出完整肝臟,經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)染色后顯微鏡下觀察肝臟病理形態(tài)變化。實驗所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組之間采用t檢驗進行比較,兩組以上之間采用單因素方差分析(One-way ANOVA)進行比較,P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,反之則P0.05。結(jié)果:各組大鼠術(shù)后不同觀察時間點血清肝功能標(biāo)記物(ALT、AST、TBIL)變化:CLP組和APN+CLP組各觀察時間點血清ALT、AST、TBIL濃度呈現(xiàn)逐漸升高趨勢,與Sham組相比,結(jié)果存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),但APN+CLP組各觀察時間點血清肝功能標(biāo)記物濃度較CLP組均明顯下降(P0.05);各組大鼠不同觀察時間點血清降鈣素原(PCT)濃度變化:CLP組和APN+CLP組在術(shù)后3h血清PCT水平即有所升高,但與Sham組相比差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),觀察至CLP術(shù)后6h才顯著高于Sham組(P0.05),術(shù)后12h仍持續(xù)升高,但APN+CLP組術(shù)后6h、12h血清PCT濃度較CLP組均顯著降低(P0.05);各組大鼠肝組織炎癥因子(TNF-α、IL-6)水平變化:與Sham組相比,CLP組和APN+CLP組各觀察時間點肝組織炎癥因子水平均明顯升高,結(jié)果存在統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),但APN+CLP組各觀察時間點較CLP組均明顯降低(P0.05),除Sham組外,其余兩組大鼠肝組織炎癥因子均在術(shù)后6h達高峰,術(shù)后12h稍回落。各組大鼠不同觀察時間點肝組織病理結(jié)構(gòu)變化:3h組織變化:Sham組肝細(xì)胞排列整齊規(guī)律,肝細(xì)胞形態(tài)一致,多呈多邊形,胞核多分布于細(xì)胞中心,呈圓形,胞質(zhì)均勻無雜質(zhì);CLP組尚可觀察到正常肝小葉結(jié)構(gòu),偶見細(xì)胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象,個別細(xì)胞內(nèi)可見到含鐵血黃素顆粒沉積;APN+CLP組肝臟損傷較CLP組稍減輕,但不明顯;術(shù)后12h肝組織可見如下形態(tài)變化,Sham組肝臟病理形態(tài)與術(shù)后3h對比無明顯變化,CLP組肝臟病理結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了明顯異常改變,肝細(xì)胞大小不均,排列極不規(guī)律,部分細(xì)胞可見腫脹變性,甚至各別細(xì)胞出現(xiàn)壞死,可見多個細(xì)胞胞核固縮、溶解、破裂現(xiàn)象,甚至可見肝細(xì)胞再生現(xiàn)象,有的細(xì)胞胞核出現(xiàn)雙核變,APN+CLP組肝組織結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常,較CLP組比較病理改變顯著減輕,但仍可見不同程度的病變;術(shù)后6h各組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)變化介于3h與12h之間。結(jié)論:膿毒癥時,給予脂聯(lián)素治療能夠顯著減輕膿毒癥大鼠肝臟病理損傷,對肝細(xì)胞功能及結(jié)構(gòu)完整性具有保護作用,其機制可能是通過有效下調(diào)肝臟局部炎癥因子的表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：膿毒癥 肝功能障礙 脂聯(lián)素
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R459.7
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 前言9-15
• 第二章 材料和方法15-20
• 2.1 實驗設(shè)備和材料15-16
• 2.1.1 實驗動物15
• 2.1.2 實驗試劑15
• 2.1.3 實驗儀器15-16
• 2.2 實驗動物分組與模型制備16-17
• 2.3 標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測17-19
• 2.3.1 標(biāo)本收集17
• 2.3.2 各項指標(biāo)檢測與方法17-19
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)方法19-20
• 第三章 實驗結(jié)果20-28
• 3.1 APN處理對sepsis大鼠血清肝功能指標(biāo)的影響20-22
• 3.2 APN處理對sepsis大鼠血清降鈣素原的影響22-23
• 3.3 APN處理對sepsis大鼠肝組織TNF-α和IL-6 濃度的影響23-25
• 3.4 APN處理對sepsis大鼠后肝臟病理變化25-28
• 第四章 討論28-33
• 4.1 Sepsis模型評估28-29
• 4.2 Sepsis肝功能損傷標(biāo)記物29-30
• 4.3 血清降鈣素原與炎癥反應(yīng)30-31
• 4.4 Sepsis時肝組織炎癥因子的表達31-33
• 第五章 結(jié)論33-34
• 5.1 主要結(jié)論33
• 5.2 不足與展望33-34
• 參考文獻34-38
• 附錄 英文縮略詞表38-39
• 在學(xué)期間的研究成果39-40
• 致謝40

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本文編號：322173