流行性感冒是由流行性感冒病毒（Influenza Viruses）引起的急性呼吸道傳染病,據(jù)統(tǒng)計全球每年有約25萬到50萬人死于流行性感冒,因此,流行性感冒病毒嚴重威脅著人類的公共衛(wèi)生安全。開展流感監(jiān)測能及時發(fā)現(xiàn)、評估流感疫情,是控制流感流行或大流行的重要手段。目前,全國范圍內已經建立起以流感監(jiān)測網絡實驗室和流感哨點醫(yī)院為基礎的流感監(jiān)測網絡。本研究針對公共衛(wèi)生安全威脅較大的8種流感病毒（A/H1N1-2009亞型、季節(jié)性A/H1N1亞型、A/H3N2亞型、A/H5N1亞型、A/H7N9亞型、A/H9N2亞型、B/Yamagata和B/Victoria譜系流感病毒）,采用MS2噬菌體病毒樣顆粒包裝平臺,將各亞型/譜系流感病毒核酸檢測的靶基因（血凝素基因、神經氨酸酶基因、基質蛋白基因、核蛋白基因、非結構蛋白基因）分別包入MS2噬菌體衣殼蛋白內部,制備了37種的病毒樣顆粒作為流感病毒核酸檢測模擬樣本。為探討流感病毒核酸檢測試劑與其它人患病毒間的交叉反應情況,同時制備包裹麻疹病毒、風疹病毒和丙肝病毒核酸檢測序列的病毒樣顆粒3種,作為流感病毒核酸檢測質評樣本盤中的陰性樣本,以檢測流感病毒核酸檢測... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：301 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
1. 材料和方法
    1.1. 實驗材料和試劑配制
    1.2. 方法
        1.2.1. 內含流感病毒基因的表達載體的構建
        1.2.2. 重組病毒樣顆粒的表達和純化
        1.2.3. 重組病毒樣顆粒的鑒定與定量
        1.2.4. 流感病毒核酸檢測質評樣本盤的建立
        1.2.5. 流感病毒核酸檢測室間質量評價
        1.2.6. 質評結果的統(tǒng)計分析
2. 結果
    2.1. 病毒基因DNA片段的獲取與載體的構建
    2.2. 重組病毒樣顆粒的表達和純化
    2.3. 重組病毒樣顆粒的鑒定
        2.3.1. 瓊脂糖凝膠電泳鑒定重組病毒樣顆粒
        2.3.2. SDS-PAGE鑒定重組病毒樣顆粒
        2.3.3. 逆轉錄PCR鑒定重組病毒樣顆粒內含的目的RNA序列
        2.3.4. 數(shù)字PCR定量病毒顆粒拷貝數(shù)
        2.3.5. 樣本盤的建立及驗證
        2.3.6. 漂流樣本檢測結果
        2.3.7. 2016年全國流感病毒核酸檢測室間質量評價結果
3. 討論
參考文獻
論文綜述
    參考文獻
附錄1 pACYCDuet-1載體詳細信息
附錄2 重組表達載體測序結果
附錄3 室間質量評價情況調查通知
附錄4 全國流感病毒核酸檢測項目開展情況調查表
附錄5 活動安排及注意事項
附錄6 流感病毒核酸檢測室間質量評價調查活動結果回報表
致謝
個人簡介



本文編號：3006222