【摘要】：目的:1.運(yùn)用培養(yǎng)組學(xué)對(duì)健康及細(xì)菌性陰道病女性陰道樣本進(jìn)行高通量培養(yǎng),探討高通量培養(yǎng)方法對(duì)陰道微生物群研究的意義。2.基于培養(yǎng)組學(xué)的培養(yǎng)結(jié)果,探討不同陰道微生物類型來(lái)源的陰道乳桿菌與陰道其他細(xì)菌的相互作用關(guān)系。方法:收集7例健康女性和8例細(xì)菌性陰道病女性的陰道分泌物,采用7種不同的培養(yǎng)基對(duì)陰道分泌物進(jìn)行高通量培養(yǎng)并同時(shí)抽提細(xì)菌總DNA。對(duì)分離培養(yǎng)出的細(xì)菌使用Clin-ToF飛行時(shí)間質(zhì)譜結(jié)合16S rRNA進(jìn)行細(xì)菌鑒定。同時(shí)采用16S rRNA V1V2可變域進(jìn)行高通量測(cè)序。基于培養(yǎng)組學(xué)的結(jié)果,選取分離自1例健康女性及2例細(xì)菌性陰道病女性的菌株進(jìn)行細(xì)菌相互作用研究。將乳桿菌與七種陰道相關(guān)細(xì)菌共培養(yǎng)0h、24h、48h及72h后,采用絕對(duì)實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)方法分析陰道細(xì)菌的相互作用關(guān)系。結(jié)果:1、通過對(duì)7例健康人及8例細(xì)菌性陰道病陰道分泌物樣本進(jìn)行培養(yǎng)組學(xué)分析,共分離到1328株陰道細(xì)菌,隸屬于33個(gè)屬,92個(gè)種。其中最常分離到的屬為乳桿菌屬(Lactobacillus)、加德納菌屬(Gardnerella)和鏈球菌屬(Streptococcus),分別分離到535株、221株、146株。同時(shí)通過對(duì)7例健康人及8例細(xì)菌性陰道病陰道分泌物樣本進(jìn)行16S rRNA V1V2域高通量測(cè)序,共檢出20個(gè)屬。其中乳桿菌屬(Lactobacillus)在所有樣本中都檢測(cè)到,在10個(gè)樣本中的相對(duì)豐度超過50%。兩者檢出重疊率僅24.24%。2、在同一個(gè)體內(nèi),健康樣本HV4中分離到的卷曲乳桿菌(Lactobacillus crispatus)對(duì)表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)和咽峽炎鏈球菌(Streptococcus anginosus)的生長(zhǎng)有抑制作用。細(xì)菌性陰道病樣本BV4、BV7中分離到的詹氏乳桿菌對(duì)表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、咽峽炎鏈球菌(Streptococcus anginosus)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)、陰道阿托波菌(Atopobium vaginae)的生長(zhǎng)同樣存在抑制作用,但惰性乳桿菌(Lactobacillus iners)對(duì)咽峽炎鏈球菌(Streptococcus anginosus)和無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)的生長(zhǎng)無(wú)抑制作用。3、在不同個(gè)體內(nèi),每株乳桿菌對(duì)非乳桿菌的抑制能力是不同的。樣本HV4中的卷曲乳桿菌對(duì)樣本BV4中的非乳桿菌有抑制作用,而對(duì)樣本BV7中的非乳桿菌無(wú)抑制作用。樣本BV4中的詹氏乳桿菌對(duì)樣本HV4中的咽峽炎鏈球菌無(wú)抑制作用,對(duì)表皮葡萄球菌有抑制作用;對(duì)樣本BV7中的非乳桿菌均無(wú)抑制作用。樣本BV7中的詹氏乳桿菌和惰性乳桿菌除了對(duì)樣本HV4中的咽峽炎鏈球菌無(wú)抑制作用外,對(duì)其余非乳桿菌均有抑制作用。結(jié)論:1、通過高通量培養(yǎng)組學(xué)方法和高通量測(cè)序法對(duì)同一樣本陰道微生物群進(jìn)行研究,結(jié)果差異較大,兩者的檢出重疊率僅24.24%。2、本研究發(fā)現(xiàn)陰道來(lái)源的4株乳桿菌對(duì)非乳桿菌有一定的拮抗作用,但不同株之間的抑制能力差異顯著,說(shuō)明乳桿菌的抑制作用可能存在株的差異。對(duì)細(xì)菌相互作用的研究將有助于提高人們對(duì)菌群與人體健康的認(rèn)識(shí)。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R711.31;R446.5
【圖文】：

圖 2-1 三個(gè)陰道分泌物樣本宏基因組分析（界水平組成）Fig. 2-1 Metagenomic analysis of three vaginal samples (level of kindom)水平上分析，三個(gè)樣本僅檢測(cè)到 10 種微生物。樣本 11 中共檢測(cè)

圖 2-2 三個(gè)陰道分泌物樣本宏基因組分析（種水平組成）Fig. 2-2 Metagenomic analysis of three vaginal samples (level of genus)2.2 陰道菌群液體培養(yǎng)后的微生物組成及培養(yǎng)前后菌群組成變化的分析使用 TSB 羊血液體培養(yǎng)基，對(duì) 3 例正常人及 3 例細(xì)菌性陰道病患者的陰道

注：22×0 表示陰道棉拭子測(cè)序的菌群組成、Y22×1 表示陰道棉拭子有氧培養(yǎng)一代后的菌群組成、N22×1 表示陰道棉拭子厭氧培養(yǎng)一代后的菌群組成、Y22×5 表示陰道棉拭子有氧培養(yǎng)一五代后的菌群組成、N22×5 表示陰道棉拭子厭氧培養(yǎng)五代后的菌群組成圖 2-5 16S rRNA 基因 V1V2 域高通量測(cè)序分析樣本 22 的原代、一代、五代的菌群組成。

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7 賈冬;趙敏;;以咽痛為首發(fā)癥狀的咽峽炎鏈球菌感染并發(fā)縱隔膿腫一例報(bào)道[J];中國(guó)全科醫(yī)學(xué);2013年29期

8 趙月琴,李琳,陳輝,魏蓮花;咽峽炎鏈球菌引起腦膿腫死亡一例[J];中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;1998年05期

9 周海鳳,祁釗,高秀花,袁汶;從心內(nèi)膜炎患者血液及骨髓中分離出咽峽炎鏈球菌[J];上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;2003年05期

10 鞏艷玲;王恒琨;王仁欣;鄭曉濤;張文峰;;咽峽炎鏈球菌致口腔頜面部多間隙感染一例[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年13期

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2 舒發(fā);小兒闌尾炎臨床特點(diǎn)及病原學(xué)分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2788572