【摘要】：目的:1.對貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院2008-2017年十年間陰溝腸桿菌的臨床感染分布特征以及對臨床常用抗生素的耐藥性變遷進(jìn)行分析,為我院抗生素的合理使用提供指導(dǎo)。2.研究我院陰溝腸桿菌的氨基糖苷類修飾酶基因(AMEs基因)、氨基糖苷類甲基化酶基因(16SrRNA甲基化酶基因)和I類整合子基因(intI)的檢出情況,以了解我院陰溝腸桿菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥機(jī)制。3.對我院陰溝腸桿菌的基因組DNA進(jìn)行分型,以了解我院陰溝腸桿菌是否存在克隆傳播現(xiàn)象。方法:1.收集我院2008-2017年十年間的陰溝腸桿菌的耐藥數(shù)據(jù),并采用耐藥分析軟件WHONET 5.6對陰溝腸桿菌的檢出情況、主要標(biāo)本類型中的檢出情況、科室來源分布情況以及對臨床常用抗生素的耐藥性進(jìn)行回顧性分析。2.收集110株我院2016年4月-2017年5月分離的陰溝腸桿菌菌株,采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測110株陰溝腸桿菌的7種AMEs基因(aph(3'')-VI、aac(3)-I、aac(3)-II、aac(3)-III、aac(6')-Ib、ant(2'')-I、ant(3'')-I)、2種16SrRNA甲基化酶基因(armA、rmtB)和intI,并分析其與耐藥表型之間的關(guān)系。3.用ERIC-PCR方法對110株陰溝腸桿菌的基因組DNA進(jìn)行分型,分析菌株間的同源性。結(jié)果:1.2008-2017年十年間本院共分離出2272株陰溝腸桿菌,2010-2017年間,陰溝腸桿菌在傷口分泌物中的檢出率最高,十年間分離的陰溝腸桿菌主要來自外科,占26.45%;藥敏監(jiān)測結(jié)果顯示,陰溝腸桿菌對大部分抗生素的耐藥率在2009年達(dá)到最高,從2009-2017年,陰溝腸桿菌對大部分抗生素的耐藥率基本呈下降趨勢,十年間陰溝腸桿菌對碳青霉烯類抗生素亞胺培南的耐藥率最低。2.在110株陰溝腸桿菌中,共檢出5種AMEs基因,AMEs基因的總陽性率為46.36%(51/110),其中aac(6')-Ib的檢出率最高,未檢出aph(3'')-VI和aac(3)-I,16SrRNA甲基化酶基因的總陽性率為8.18%(9/110),intI基因的陽性率為47.27%(52/110);10株阿米卡星耐藥株中有9株檢出aac(3)-III,慶大霉素耐藥株和妥布霉素耐藥株均以基因aac(6')-Ib的檢出率最高;110株陰溝腸桿菌菌株的基因型與耐藥表型的符合率為82.73%。3.110株陰溝腸桿菌中有40株擴(kuò)增出條帶,被分為20個型別,其中G型最多,有6株,其次是O型,有5株,其余70株未擴(kuò)增出條帶。結(jié)論:1.十年間本院陰溝腸桿菌對臨床常用抗生素的耐藥率基本呈下降趨勢,其中對碳青霉烯類抗生素耐藥的陰溝腸桿菌應(yīng)引起重視。2.本院陰溝腸桿菌氨基糖苷類耐藥基因與氨基糖苷類抗生素的耐藥表型之間的符合率高。3.本院部分陰溝腸桿菌菌株間存在散發(fā)克隆播散現(xiàn)象。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R446.5
【圖文】：

注：陰：陰性對照；M：Marker；1：aac(3)-II；2：aac(3)-III；3：aac(6')-Ib；4：ant(2'')-I；5：ant(3'')-I；6：armA；7：rmtB；8：intI。圖 2-1 各型基因 PCR 電泳圖Fig. 2-1 The PCR electrophoretogram of different genes序列比對結(jié)果機(jī)抽取各 PCR 陽性擴(kuò)增產(chǎn)物 3 份送至上海生工生物工程有限公司序，用 GenBank 中的 Nucleotide BLAST 將測序的序列與 NCBI 中序列進(jìn)行比對分析，比對結(jié)果為：aac(3)-II、armA、rmtB 的基因測nBank 中的 aac(3)-II、armA、rmtB 序列進(jìn)行比對，相似度為 100％aac(3)-II、armA、rmtB 基因；ant(2'')-I、ant(3'')-I 的基因測序序列與 Gant(2'')-I、ant(3'')-I 序列進(jìn)行比對，相似度為 99％，可確定為 ant(2'')-I、aaac(3)-III、aac(6')-Ib 的基因測序序列與 GenBank 中的 aac(3)-III、aa行比對，相似度為 98％，可確定為 aaac(3)-III、aac(6')-Ib 基因；in

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2724755