【摘要】：輸血反應(yīng)是由于血型不匹配導(dǎo)致的機(jī)體產(chǎn)生的一種免疫反應(yīng),嚴(yán)重的輸血反應(yīng)會導(dǎo)致死亡。準(zhǔn)確的血型鑒定是血型匹配的前提,而對于難以保證血型匹配的情況,如緊急輸血時某種血型血源尤其是稀有血型血源短缺的情況下,為了防止輸血反應(yīng)的發(fā)生,需要將血細(xì)胞表面的血型抗原除去或者“屏蔽”以提供所需血型細(xì)胞的替代品,即通過血型轉(zhuǎn)化消除紅細(xì)胞血型抗原的免疫原性。所以血型鑒定和血型抗原免疫性的消除是避免輸血反應(yīng)的現(xiàn)有手段。常規(guī)的血型鑒定方法是觀察紅細(xì)胞是否與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集反應(yīng)判斷血型,但血型抗體尤其是稀有血型抗體的獲取十分困難,而且蛋白質(zhì)的保存運(yùn)輸成本較高,易受溫度、pH等條件影響其活性;另一方面,采用聚乙二醇和聚多巴胺對紅細(xì)胞進(jìn)行包裹修飾的方法來消除紅細(xì)胞的免疫原性取得了成功,這種包裹能消除所有血型抗原的免疫原性,但是包裹的“嚴(yán)密性”可能會影響紅細(xì)胞行使除攜氧外的其它生理功能,如物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、信號接收等。目的:通過引入分子印跡技術(shù)突破上述血型鑒定和血型化學(xué)轉(zhuǎn)化法中的限制,實(shí)現(xiàn)血型鑒定的非蛋白鑒定和紅細(xì)胞由B型向O型的特異性轉(zhuǎn)化。方法:本論文根據(jù)B型抗原與A及O型抗原決定簇結(jié)構(gòu)僅一個糖基分子的差異,設(shè)計(jì)并成功合成了能特異性識別B抗原末端特有糖基的分子印跡微球和分子印跡水凝膠,將兩種材料分別應(yīng)用于血型鑒定和血型轉(zhuǎn)化中。結(jié)果:將分子印跡微球吸附在玻璃纖維試紙上后,它表現(xiàn)出對B型紅細(xì)胞較強(qiáng)的特異性吸附作用而對A及O型紅細(xì)胞的吸附較小,吸附后的試紙還能通過聯(lián)用智能手機(jī)進(jìn)行三原色光譜分析實(shí)現(xiàn)B型紅細(xì)胞的鑒定;分子印跡水凝膠修飾的B型紅細(xì)胞則與B抗體發(fā)生較弱的凝集反應(yīng),但A型紅細(xì)胞仍與A抗體發(fā)生較強(qiáng)凝集反應(yīng),表明利用分子印跡水凝膠在血型轉(zhuǎn)化應(yīng)用中的潛力。結(jié)論:上述實(shí)驗(yàn)說明分子印跡方法的引入成功地實(shí)現(xiàn)了B型紅細(xì)胞的非蛋白鑒定和紅細(xì)胞由B型向O型的特異性轉(zhuǎn)化,并且由于分子印跡方法具有通用性,因此有望將該方法應(yīng)用于其它血型的鑒定和轉(zhuǎn)化,分子印跡技術(shù)在臨床輸血治療中展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景。
【圖文】：

成本和精密的實(shí)驗(yàn)室儀器成本，而將分于分子印跡的血型鑒定中的合成方法的同時實(shí)現(xiàn)對血型的不依賴于實(shí)驗(yàn)室性地屏蔽血型抗原在眾多化學(xué)修飾法到血型轉(zhuǎn)化中，，以期對特定血型抗原的飾法在血型轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用限制。系統(tǒng)中，A、B、O 抗原結(jié)構(gòu)僅表現(xiàn)為糖 血型的抗原決定簇(糖蛋白中具有免疫半乳糖(B 型)，而 H 抗原(O 型抗原)末據(jù)這一差別可以設(shè)計(jì)分子印跡材料識的半乳糖分子的 1 號碳原子上的羥基基脫水形成 1,3 糖苷鍵，所以本論文采糖分子(苯基-D-吡喃半乳糖苷, P-Ga示)。

圖 2-1 模板分子的紫外可見光吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線。0、50、100、200、300、400、500ppm 的模板分子的吸光度值分6、0.342、0.608、1.074、1.353，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為 Y=0.000.9979，說明在濃度范圍為 0-500ppm 時，模板分子的吸光度值與呈良好的線性相關(guān)，因此可以根據(jù)模板分子在 267 nm 左右的吸分子的濃度，后續(xù)的關(guān)于吸附實(shí)驗(yàn)中計(jì)算吸附量的公式為：Q= 0 0× 0× Q 為吸附量(mg/g)，A0為吸附前吸光度值，A 為吸附后上清液度值，C0為吸附前模板分子的濃度(μg/mL)，V 為溶液體積(mL料的質(zhì)量(mg)。2 分子印跡功能單體的選擇各 MIP 的分散性及平衡時的吸附量如表 2-1 所示：表 2-1 各 MIP 在 PBS 中的分散性及平衡吸附量
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R446.6

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本文編號：2651860