病毒是一種個體微小,結(jié)構(gòu)簡單,必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)的非細(xì)胞型生物,只含脫氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA),以復(fù)制的方式增殖。病毒可以感染所有種類的生命,埃博拉病毒病、艾滋病、登革出血熱、嚴(yán)重急性呼吸綜合征和禽流感等許多嚴(yán)重危害人類生命的疾病均是由病毒引起的。快速診斷病毒類型和感染情況,能夠有效減少病毒性傳染疾病的大面積傳播與感染,為其預(yù)防和控制政策及時提供重要的科學(xué)依據(jù)。但傳統(tǒng)病毒檢測方法普遍存在檢測條件苛刻、花費(fèi)昂貴或檢測耗時長、靈敏性有待提高等問題,因此亟待開發(fā)用于病毒現(xiàn)場快速、高靈敏、特異性的檢測技術(shù)。近年來,表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)生物傳感技術(shù)因具有超高的靈敏度和SERS光譜的“指紋”特性,被廣泛應(yīng)用于生物檢測和分析。與此同時,越來越多的核酸放大檢測技術(shù)與生物傳感技術(shù)相結(jié)合,進(jìn)一步提高了生物傳感策略的檢測靈敏度。本論文旨在以甲型流感病毒與登革病毒檢測為模型,研究并提出結(jié)合SERS與核酸放大技術(shù)的病毒基因檢測策略,開發(fā)用于病毒基因檢測的高靈敏、特異性SERS傳感器。主要研究內(nèi)容及創(chuàng)新點(diǎn)如下:(1)設(shè)計(jì)并提出結(jié)合SERS和核酸外切酶III輔助DNA循環(huán)放大技術(shù)的H7N9病...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 病毒的危害
    1.2 病毒的傳統(tǒng)檢測方法
        1.2.1 培養(yǎng)細(xì)胞的顯微學(xué)觀察
        1.2.2 免疫學(xué)方法
    1.3 分子生物學(xué)檢測方法
        1.3.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)
        1.3.2 病毒基因的生物傳感器檢測方法
    1.4 核酸放大策略在病毒基因檢測中的應(yīng)用
        1.4.1 滾環(huán)擴(kuò)增放大技術(shù)(Rolling Circle Amplification,RCA)
        1.4.2 鏈置換放大技術(shù)(Strand Displacement Amplification,SDA)
        1.4.3 雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Hybridization Chain Reaction,HCR)
        1.4.4 催化發(fā)夾組裝(Catalytic Hairpin Assembly,CHA)
        1.4.5 核酸外切酶介導(dǎo)的放大技術(shù)
        1.4.6 多核酸放大技術(shù)相結(jié)合的病毒基因檢測策略
    1.5 基于表面增強(qiáng)拉曼散射技術(shù)(SERS)的病毒基因檢測研究進(jìn)展
        1.5.1 SERS概述
        1.5.2 SERS增強(qiáng)原理
        1.5.3 基于SERS的病毒基因檢測研究進(jìn)展
        1.5.4 結(jié)合信號放大技術(shù)與SERS技術(shù)的核酸檢測的應(yīng)用
    1.6 本論文的研究內(nèi)容及研究意義
        1.6.1 研究內(nèi)容
        1.6.2 研究意義
第二章 結(jié)合核酸外切酶III輔助循環(huán)放大與SERS技術(shù)的H7N9 病毒傳感策略
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 化學(xué)藥品和試劑
        2.2.2 儀器和測量
        2.2.3 檢測機(jī)制
        2.2.4 陣列型檢測芯片制備
        2.2.5 實(shí)驗(yàn)步驟
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 檢測策略/傳感機(jī)制的研究
        2.3.2 傳感檢測條件優(yōu)化
        2.3.3 傳感檢測策略、特異性和均一性表征
        2.3.4 H7和N9 聯(lián)合檢測的工作曲線和檢測限
        2.3.5 H7、N9 聯(lián)合檢測回收率
    2.4 本章小結(jié)
第三章 用于登革病毒基因檢測的無酶雙重信號放大SERS傳感策略
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 化學(xué)藥品和試劑
        3.2.2 儀器和測量
        3.2.3 檢測機(jī)制
        3.2.4 陣列型檢測芯片制備
        3.2.5 實(shí)驗(yàn)步驟
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 傳感策略的研究
        3.3.2 表面封閉劑MCH優(yōu)化
        3.3.3 登革病毒檢測的工作曲線和檢測限
        3.3.4 DENV高靈敏檢測回收率
        3.3.5 檢測策略選擇性和均一性表征
    3.4 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間撰寫的論文
附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間申請的專利
附錄3 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目
致謝



本文編號：3808151