能源微藻胞內(nèi)油脂合成積累路徑的調(diào)控基因是通過基因工程策略提高其油脂產(chǎn)率并實現(xiàn)微藻生物柴油低成本產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵之一。然而由于目前對微藻油脂合成積累路徑關(guān)鍵調(diào)控基因的認知不足及精準研究相對匱乏,導(dǎo)致相關(guān)增強藻細胞脂質(zhì)積累的基因工程策略也缺乏一定理論指導(dǎo)。本研究以新型能源極地膠球藻Coccomyxa subellipsoidea C-169為受試對象,基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)和代謝組學(xué)關(guān)聯(lián)對應(yīng)分析技術(shù),先解析膠球藻細胞脂質(zhì)積累與氮限濃度-時間效應(yīng)的定量關(guān)系,在此基礎(chǔ)上篩選膠球藻細胞中調(diào)控油脂合成積累的相關(guān)基因,再以基因超量表達等方法確認基因表達模式與油脂積累正負相關(guān)性,為準確進行產(chǎn)油微藻基因工程改造奠定理論基礎(chǔ)。取得的主要研究結(jié)果如下:1)在氮充足-氮限制兩段法誘導(dǎo)模式下,膠球藻細胞經(jīng)第一階段的氮充足基礎(chǔ)培養(yǎng)基（1.25 g/L NaNO₃）培養(yǎng)168 h后獲得的最大生物量和油脂含量分別為3.26 g/L和36%,將第一階段3.26 g/L生物量的膠球藻細胞收集離心重懸于新鮮的第二階段氮限制基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（0、0.25、0.5、0.75、1.0、1.25 g/L NaNO₃

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1RNA-seq相關(guān)性檢查Fig.3-1CorrelationtestofRNA-seq

續(xù)表3-9過濾后數(shù)據(jù)質(zhì)量統(tǒng)計Table3-9Dataqualitystatisticsafterfiltering1.25g/L-192h-2148.8440589792604157879797.2392.8011.591.25g/L-192h-31....

圖3-2膠球藻細胞對照組和實驗組細胞差異表達基因（A）差異顯著性基因的聚類圖（B）差異顯著性基因的火山圖；（C）顯著性差異表達基因上下調(diào)數(shù)量

24圖3-2膠球藻細胞對照組和實驗組細胞差異表達基因（A）差異顯著性基因的聚類圖（B）差異顯著性基因的火山圖；（C）顯著性差異表達基因上下調(diào)數(shù)量Fig.3-2Differentiallyexpressedgenesofcontrolandexperimenta....

圖3-4qRT-PCR差異表達基因與轉(zhuǎn)錄組差異表達基因的Pearson相關(guān)系數(shù)Fig.3-4PearsoncorrelationcoefficientbetweenqRT-PCRdifferentiallyexpressedgenesandtranscriptomedifferentiallyexpressedgenes

3-4qRT-PCR差異表達基因與轉(zhuǎn)錄組差異表達基因的Pearson相關(guān)earsoncorrelationcoefficientbetweenqRT-PCRdifferentiallyexpressetranscriptomedifferentiallye....

圖3-5差異表達基因GO富集柱狀圖

圖3-4qRT-PCR差異表達基因與轉(zhuǎn)錄組差異表達基因的Pearson相關(guān)系數(shù)Fig.3-4PearsoncorrelationcoefficientbetweenqRT-PCRdifferentiallyexpressedgenesatranscr....

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