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十溴二苯乙烷污染脅迫下白腐真菌的生理響應(yīng)與分子機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2022-05-02 20:27
  中國(guó)含有大量的“電子垃圾場(chǎng)”,溴代阻燃劑是電子垃圾中最常見的污染物,具有毒性高、持久性和遷移性強(qiáng)等特點(diǎn)。近年來,由于傳統(tǒng)溴代阻燃劑的禁用,新型溴代阻燃劑作為其替代品大量使用而受到廣泛關(guān)注。十溴二苯乙烷(DBDPE)由于燃燒過程中不會(huì)產(chǎn)生二惡英、呋喃等有害物質(zhì)被作為十溴二苯醚的理想代替品廣泛使用。DBDPE在水、土壤、顆粒物以及動(dòng)物、植物和人的毛發(fā)中均有檢出。鑒于DBDPE的廣泛存在與嚴(yán)重風(fēng)險(xiǎn),探索經(jīng)濟(jì)有效的方法將其從環(huán)境中去除勢(shì)在必行。近年來,白腐真菌因其強(qiáng)適應(yīng)性以及對(duì)異生物質(zhì)獨(dú)特降解性在微生物修復(fù)中表現(xiàn)出良好的前景,只有明確白腐真菌在污染物脅迫下的生理響應(yīng)機(jī)制,才能有針對(duì)性地提高其對(duì)污染物的抗性以及降解性能,更好地利用白腐真菌修復(fù)污染環(huán)境。本研究以白腐真菌的代表菌平菇菌(Pleurotus ostreatus)為研究對(duì)象,通過DBDPE暴露體系平菇菌的細(xì)胞活性、生物量、關(guān)鍵酶(如ATPase)活性等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)DBDPE對(duì)菌體具有明顯的生物毒性,并呈現(xiàn)一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。ATP酶活性不僅影響生物量和蛋白質(zhì)含量,也在降解過程中起著重要作用。同時(shí)研究了在DBDPE污染脅迫下抗氧化... 

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 課題來源及背景
        1.1.1 課題來源
        1.1.2 課題背景及研究意義
    1.2 環(huán)境中十溴二苯乙烷的研究進(jìn)展
        1.2.1 DBDPE在環(huán)境介質(zhì)中的分布
        1.2.2 DBDPE的生物毒性
            1.2.2.1 DBDPE的生物蓄積性
            1.2.2.2 DBDPE的生物毒性
    1.3 白腐真菌及其在環(huán)境修復(fù)中的應(yīng)用
        1.3.1 白腐真菌在溴代阻燃劑降解中的應(yīng)用
        1.3.2 白腐真菌在其他污染物降解中的應(yīng)用
    1.4 轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進(jìn)展
    1.5 蛋白組學(xué)研究進(jìn)展
    1.6 研究目的和研究?jī)?nèi)容
        1.6.1 研究目的
        1.6.2 研究?jī)?nèi)容
        1.6.3 技術(shù)路線
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和材料
    2.2 菌體培養(yǎng)
        2.2.1 菌體活化
        2.2.2 孢子液的制備
        2.2.3 菌絲球培養(yǎng)
        2.2.4 粗酶提取
    2.3 細(xì)胞響應(yīng)測(cè)定方法
        2.3.1 細(xì)胞生長(zhǎng)的測(cè)定
        2.3.2 ATPase活性的測(cè)定
        2.3.3 氧化應(yīng)激的測(cè)定
        2.3.4 平菇菌菌絲微觀形貌觀察
    2.4 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析方法
        2.4.1 RNA提取
        2.4.2 文庫制備和Illumina Hiseq測(cè)序
        2.4.3 讀取質(zhì)量控制和映射
        2.4.4 差異表達(dá)分析和功能豐富
        2.4.5 替代剪接事件標(biāo)識(shí)
        2.4.6 WGCNA構(gòu)建
    2.5 蛋白組學(xué)分析方法
        2.5.1 蛋白提取與定量分析
        2.5.2 胰蛋白酶消化與iTRAQ標(biāo)記
        2.5.3 LC-MS/MS分析
        2.5.4 數(shù)據(jù)庫搜索與質(zhì)量控制
第3章 DBDPE污染物脅迫下平菇菌的生理響應(yīng)
    3.1 引言
    3.2 DBDPE對(duì)平菇菌生長(zhǎng)的影響
        3.2.1 對(duì)菌體生物量的影響
        3.2.2 對(duì)菌體蛋白含量的影響
        3.2.3 對(duì)菌體pH的影響
    3.3 對(duì)菌體ATP酶的影響
    3.4 平菇菌在DBDPE脅迫下的氧化應(yīng)激
        3.4.1 DBDPE對(duì) SOD活性的影響
        3.4.2 DBDPE對(duì) CAT活性的影響
        3.4.3 DBDPE對(duì) GSH含量的影響
        3.4.4 DBDPE對(duì) MDA含量的影響
    3.5 平菇菌菌絲微觀形貌觀察
    3.6 本章總結(jié)
第4章 DBDPE脅迫下平菇菌的轉(zhuǎn)錄組學(xué)解析
    4.1 引言
    4.2 不同濃度DBDPE污染下菌體細(xì)胞的全基因表達(dá)
        4.2.1 菌體全基因表達(dá)
        4.2.2 菌體基因表達(dá)模式聚類
    4.3 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞差異基因功能分類
        4.3.1 低濃度下差異基因功能分類
        4.3.2 高濃度下差異基因功能分類
        4.3.3 濃度增加后菌體差異基因功能分類
    4.4 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞差異基因GO富集
        4.4.1 低濃度下菌體細(xì)胞差異基因GO富集
        4.4.2 高濃度下菌體細(xì)胞差異基因GO富集
        4.4.3 濃度增加后菌體細(xì)胞差異基因GO富集
    4.5 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞的代謝差異富集
        4.5.1 低濃度下菌體細(xì)胞差異基因KEGG富集
        4.5.2 高濃度下菌體細(xì)胞差異基因KEGG富集
        4.5.3 濃度增加后菌體細(xì)胞差異基因KEGG富集
    4.6 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞的差異基因功能解析
        4.6.1 加入DBDPE后差異基因功能分析
        4.6.2 增大DBDPE濃度后差異基因的功能分析
    4.7 本章總結(jié)
第5章 DBDPE污染脅迫下平菇菌關(guān)鍵功能蛋白組學(xué)解析
    5.1 前言
    5.2 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞的全蛋白表達(dá)
        5.2.1 菌體全蛋白表達(dá)
        5.2.2 菌體全蛋白表達(dá)模式聚類
    5.3 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞差異蛋白功能分類
    5.4 不同濃度DBDPE處理下菌體蛋白表達(dá)的代謝差異
    5.5 不同濃度DBDPE處理下菌體差異蛋白的蛋白相鄰類的聚簇
    5.6 不同濃度DBDPE處理下菌體細(xì)胞差異蛋白功能分析
        5.6.1 分解代謝有關(guān)的差異蛋白
        5.6.2 合成代謝有關(guān)的差異蛋白
        5.6.3 脅迫響應(yīng)有關(guān)的差異蛋白
        5.6.4 能量代謝相關(guān)的蛋白
        5.6.5 核心蛋白的變化
        5.6.6 運(yùn)輸有關(guān)的蛋白
    5.7 轉(zhuǎn)錄組和蛋白組聯(lián)合分析
        5.7.1 差異轉(zhuǎn)錄本與差異蛋白全表達(dá)比較
        5.7.2 差異轉(zhuǎn)錄本與差異蛋白表達(dá)模式聚類
        5.7.3 差異轉(zhuǎn)錄本與差異蛋白關(guān)鍵蛋白功能解析
        5.7.4 差異轉(zhuǎn)錄本與差異蛋白 GO 功能注釋
        5.7.5 差異轉(zhuǎn)錄本與差異蛋白KEGG功能注釋
    5.8 本章總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間參與發(fā)表的成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào):3649899

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