阿特拉津作為一種長殘留除草劑,已被聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署（UNEP）列為28種持久性有毒化學(xué)污染物之一,其環(huán)境問題已經(jīng)得到廣泛關(guān)注。在中國東北黑土區(qū),阿特拉津已成為重要的農(nóng)業(yè)污染物,對黑土區(qū)環(huán)境造成較大的威脅。由于微生物能較早的預(yù)測土壤環(huán)境污染狀況的變化過程,因此本文以革蘭氏陰性菌EscherichiacoliK12（E.coliK12）和革蘭氏陽性菌Bacillus subilisB7（B.subtil sB7）,以及從黑土中篩選出的阿特拉津降解菌Arthrobacter sp.DNS10和Acinetobacter lwoffii.DNS32為供試菌株,運用現(xiàn)代分子生物學(xué)手段,從微生物生長狀況,自由基產(chǎn)生數(shù)量,膜脂過氧化損傷和基因組DNA多態(tài)性分析等方面探討阿特拉津?qū)Φ湫臀⑸锏亩纠韺W(xué)效應(yīng),力爭為阿特拉津的生態(tài)毒理效應(yīng)評價提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。主要結(jié)果概括如下:1)經(jīng)過濃度為0.1、0.5、5、10和20 mg L-1阿特拉津脅迫后,非阿特拉津降解菌革蘭氏陰性菌E.coil K12和革蘭氏陽性菌B.subtilis B7以及阿特拉津降解菌Arthrobacter sp.DNS10和Acineto... 

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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1 引言
    1.1 阿特拉津的概述
        1.1.1 阿特拉津的理化性質(zhì)
        1.1.2 阿特拉津使用概況
    1.2 阿特拉津?qū)ι鷳B(tài)環(huán)境及生物的危害
        1.2.1 阿特拉津?qū)λh(huán)境的影響
        1.2.2 阿特拉津?qū)ν寥拉h(huán)境的影響
        1.2.3 阿特拉津?qū)Υ髿猸h(huán)境的影響
        1.2.4 阿特拉津?qū)ι锏奈：?br>    1.3 阿特拉津生態(tài)毒理學(xué)研究進展
        1.3.1 阿特拉津污染對動物的生態(tài)毒理學(xué)研究進展
        1.3.2 阿特拉津污染對植物的生態(tài)毒理學(xué)研究進展
        1.3.3 阿特拉津污染對微生物的生態(tài)毒理學(xué)研究進展
    1.4 阿特拉津污染對生物氧化脅迫的影響
        1.4.1 活性氧的危害
        1.4.2 脂質(zhì)過氧化作用
        1.4.3 基因組DNA損傷
    1.5 本研究的目的與意義
    1.6 本研究的主要內(nèi)容
    1.7 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 供試菌種
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 阿特拉津標準儲備溶液
    2.2 阿特拉津脅迫對供試菌株生長速度的影響
        2.2.1 試驗設(shè)計
        2.2.2 細菌生長情況的測定
    2.3 阿特拉津脅迫對供試菌株超氧自由基產(chǎn)生數(shù)量的影響
        2.3.1 平板菌落計數(shù)
        2.3.2 供試菌株O_2~(-·)的測定
    2.4 阿特拉津脅迫下供試菌株膜脂過氧化水平的檢測
        2.4.1 實驗設(shè)計
        2.4.2 粗酶的制備
        2.4.3 蛋白含量的測定
        2.4.4 膜脂過氧化水平檢測
        2.4.5 數(shù)據(jù)處理
    2.5 阿特拉津脅迫對供試菌株基因組DNA損傷的研究
        2.5.1 細菌基因組DNA的提取
        2.5.2 RAPD技術(shù)體系
        2.5.3 RAPD引物的篩選
        2.5.4 基因組模板穩(wěn)定性
3 結(jié)果與分析
    3.1 阿特拉津脅迫對供試菌株生長速度的影響
    3.2 阿特拉津脅迫對細菌超氧自由基產(chǎn)生的影響
        3.2.1 供試菌株可培養(yǎng)菌落數(shù)與菌懸液OD_(600)值之間的關(guān)系
        3.2.2 菌株E.coilK12細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結(jié)果
        3.2.3 菌株B.subtilisB7細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結(jié)果
        3.2.4 菌株Arthrobacter sp. DNS10細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結(jié)果
        3.2.5 菌株Acinetobacter sp. DNS32細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結(jié)果
    3.3 阿特拉津脅迫下典型細菌膜脂過氧化水平分析
        3.3.1 可溶性蛋白標準曲線的繪制
        3.3.2 菌株E.coilK12細胞內(nèi)MDA含量測定結(jié)果
        3.3.3 菌株B.subtilis B7細胞內(nèi)MDA含量的測定結(jié)果
        3.3.4 菌株Arthrobacter sp. DNS10細胞內(nèi)MDA含量的測定結(jié)果
        3.3.5 菌株Acinetobacter sp. DNS32細胞內(nèi)MDA含量的測定結(jié)果
    3.4 阿特拉津?qū)Φ湫图毦蚪MDNA損傷的多態(tài)性分析
        3.4.1 供試菌株基因組DNA的提取
        3.4.2 引物篩選結(jié)果
        3.4.3 菌株E.coliK12基因組DNA損傷情況
        3.4.4 菌株B.subtilis B7基因組DNA損傷情況
        3.4.5 菌株Arthrobacter sp. DNS10基因組DNA損傷情況
        3.4.6 菌株Acinetobacter sp. DNS32基因組DNA損傷情況
        3.4.7 供試菌株基因組模板DNA的穩(wěn)定性
4 討論
    4.1 阿特拉津脅迫對細菌生長速度的影響
    4.2 阿特拉津脅迫對細菌超氧自由基產(chǎn)生的影響
    4.3 阿特拉津脅迫下典型細菌膜脂過氧化水平
    4.4 阿特拉津脅迫下典型細菌DNA損傷的研究
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3649778