阿特拉津作為一種長殘留除草劑,已被聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署（UNEP）列為28種持久性有毒化學污染物之一,其環(huán)境問題已經(jīng)得到廣泛關注。在中國東北黑土區(qū),阿特拉津已成為重要的農(nóng)業(yè)污染物,對黑土區(qū)環(huán)境造成較大的威脅。由于微生物能較早的預測土壤環(huán)境污染狀況的變化過程,因此本文以革蘭氏陰性菌EscherichiacoliK12（E.coliK12）和革蘭氏陽性菌Bacillus subilisB7（B.subtil sB7）,以及從黑土中篩選出的阿特拉津降解菌Arthrobacter sp.DNS10和Acinetobacter lwoffii.DNS32為供試菌株,運用現(xiàn)代分子生物學手段,從微生物生長狀況,自由基產(chǎn)生數(shù)量,膜脂過氧化損傷和基因組DNA多態(tài)性分析等方面探討阿特拉津對典型微生物的毒理學效應,力爭為阿特拉津的生態(tài)毒理效應評價提供基礎數(shù)據(jù)。主要結果概括如下:1)經(jīng)過濃度為0.1、0.5、5、10和20 mg L-1阿特拉津脅迫后,非阿特拉津降解菌革蘭氏陰性菌E.coil K12和革蘭氏陽性菌B.subtilis B7以及阿特拉津降解菌Arthrobacter sp.DNS10和Acineto... 

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

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1 引言
    1.1 阿特拉津的概述
        1.1.1 阿特拉津的理化性質
        1.1.2 阿特拉津使用概況
    1.2 阿特拉津對生態(tài)環(huán)境及生物的危害
        1.2.1 阿特拉津對水環(huán)境的影響
        1.2.2 阿特拉津對土壤環(huán)境的影響
        1.2.3 阿特拉津對大氣環(huán)境的影響
        1.2.4 阿特拉津對生物的危害
    1.3 阿特拉津生態(tài)毒理學研究進展
        1.3.1 阿特拉津污染對動物的生態(tài)毒理學研究進展
        1.3.2 阿特拉津污染對植物的生態(tài)毒理學研究進展
        1.3.3 阿特拉津污染對微生物的生態(tài)毒理學研究進展
    1.4 阿特拉津污染對生物氧化脅迫的影響
        1.4.1 活性氧的危害
        1.4.2 脂質過氧化作用
        1.4.3 基因組DNA損傷
    1.5 本研究的目的與意義
    1.6 本研究的主要內(nèi)容
    1.7 技術路線
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 供試菌種
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 阿特拉津標準儲備溶液
    2.2 阿特拉津脅迫對供試菌株生長速度的影響
        2.2.1 試驗設計
        2.2.2 細菌生長情況的測定
    2.3 阿特拉津脅迫對供試菌株超氧自由基產(chǎn)生數(shù)量的影響
        2.3.1 平板菌落計數(shù)
        2.3.2 供試菌株O_2~(-·)的測定
    2.4 阿特拉津脅迫下供試菌株膜脂過氧化水平的檢測
        2.4.1 實驗設計
        2.4.2 粗酶的制備
        2.4.3 蛋白含量的測定
        2.4.4 膜脂過氧化水平檢測
        2.4.5 數(shù)據(jù)處理
    2.5 阿特拉津脅迫對供試菌株基因組DNA損傷的研究
        2.5.1 細菌基因組DNA的提取
        2.5.2 RAPD技術體系
        2.5.3 RAPD引物的篩選
        2.5.4 基因組模板穩(wěn)定性
3 結果與分析
    3.1 阿特拉津脅迫對供試菌株生長速度的影響
    3.2 阿特拉津脅迫對細菌超氧自由基產(chǎn)生的影響
        3.2.1 供試菌株可培養(yǎng)菌落數(shù)與菌懸液OD_(600)值之間的關系
        3.2.2 菌株E.coilK12細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結果
        3.2.3 菌株B.subtilisB7細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結果
        3.2.4 菌株Arthrobacter sp. DNS10細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結果
        3.2.5 菌株Acinetobacter sp. DNS32細胞內(nèi)O_2~(-·)含量的測定結果
    3.3 阿特拉津脅迫下典型細菌膜脂過氧化水平分析
        3.3.1 可溶性蛋白標準曲線的繪制
        3.3.2 菌株E.coilK12細胞內(nèi)MDA含量測定結果
        3.3.3 菌株B.subtilis B7細胞內(nèi)MDA含量的測定結果
        3.3.4 菌株Arthrobacter sp. DNS10細胞內(nèi)MDA含量的測定結果
        3.3.5 菌株Acinetobacter sp. DNS32細胞內(nèi)MDA含量的測定結果
    3.4 阿特拉津對典型細菌基因組DNA損傷的多態(tài)性分析
        3.4.1 供試菌株基因組DNA的提取
        3.4.2 引物篩選結果
        3.4.3 菌株E.coliK12基因組DNA損傷情況
        3.4.4 菌株B.subtilis B7基因組DNA損傷情況
        3.4.5 菌株Arthrobacter sp. DNS10基因組DNA損傷情況
        3.4.6 菌株Acinetobacter sp. DNS32基因組DNA損傷情況
        3.4.7 供試菌株基因組模板DNA的穩(wěn)定性
4 討論
    4.1 阿特拉津脅迫對細菌生長速度的影響
    4.2 阿特拉津脅迫對細菌超氧自由基產(chǎn)生的影響
    4.3 阿特拉津脅迫下典型細菌膜脂過氧化水平
    4.4 阿特拉津脅迫下典型細菌DNA損傷的研究
5 結論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文



本文編號：3649778